RNA提取及反转录合成cDNA具体实验步骤(共4页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上RNA提取及反转录合成cDNA具体实验步骤由 杨盛 于 2011/6/8 12:56 创建 一、RNA提取前的准备RNA制备的关键是要抑制细胞中的RNA分解和防止所用器具及试剂中的RNA分解酶的污染。因此,在实验中必须采取以下措施:1、戴一次性手套;2、使用RNA操作专用实验台;3、在操作过程中避免讲话等。通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的RNA分解酶的污染。二、使用器具尽量使用一次性塑料器皿,若用玻璃器皿,应在使用前按下列方法进行处理:1、用0.1%DEPC水溶液在37下处理12小时,2、然后在120下高温灭菌30min以除去残留的DEPC,( RNA实验用的器具建议专门使用,不要用于其他实验。)三、 试剂配制用于RNA实验的试剂,须使用干热灭菌(180,60min)或使用上述方法进行DEPC水处理灭菌后的玻璃容器盛装(也可以使用RNA实验用的一次性塑料容器),使用的无菌水需用0.1%的DEPC处理后再进行高温高压灭菌。RNA实验用的试剂和无菌水都应专用,避免混用后

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