液相色谱的方法开发 （二）梯度方法梯度洗脱的特点 优点 . 单位时间的分离能力增加 . 检测灵敏度提高 缺点 . 仪器设备要求高 . 不适合某些检测方式 . 柱需再生 . 定量分析的重复性较低梯度的洗脱方式 高压梯度及低压梯度梯度洗脱的可变参数 A 及B 液的成分和化学特性 梯度的陡度 梯度的变化形状如不用梯度：分离不理想梯度条件的优化梯度曲线的变化凹线梯度曲线的变化凸线梯度平衡时间的影响（一） 10分钟的梯度，6分钟的平衡时间色谱图不重复梯度平衡时间的影响（二） 平衡时间6分钟 平衡时间7分钟 平衡时间8分钟 平衡时间9分钟 平衡时间从6到7分钟，第一个峰的保留时间有明显的 变化，说明6到7分钟的平衡时间不足，而8到9分钟变化 不大因而大于这个时间时，平衡充足。有机污染物的影响（一） 50ml 超纯水的有机物污染状态有机污染物的影响（二） “ 三蒸水” 有大量的有机污染物不适合梯度分析有机污染物的影响（三） 典型的“ 实验室水” 有大量的有机污染物不适合高灵 敏度梯度分析梯度方法开发实例 - 第一步 开发一个有9个烷基苯酮化合物的梯度方法，用C18 柱，在最初的条件下(0-100%
