流式细胞术在白血病淋巴瘤分型和监测中的应用,1,世界卫生组织血液肿瘤分类方案（1999年）,“新分类方案的基本原则是：结合形态学、免疫表型、遗传改变和临床特征来鉴定疾病的真实本质”。 “这为世界各国肿瘤学家和病理学家提供了一个全新的与令人兴奋的合作交流新篇章，必将极大促进人们对血液肿瘤的治疗与认识。
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1、流式细胞术在白血病/淋巴瘤分型和监测中的应用,1,世界卫生组织血液肿瘤分类方案（1999年）,“新分类方案的基本原则是：结合形态学、免疫表型、遗传改变和临床特征来鉴定疾病的真实本质”。“这为世界各国肿瘤学家和病理学家提供了一个全新的与令人兴奋的合作交流新篇章，必将极大促进人们对血液肿瘤的治疗与认识。”（美国临床肿瘤协会，临床肿瘤杂志 17卷3835-3849页，1999年）更重要的是提供了疾病分类与治疗选择和预后判断的较明确关联性，开启了血液肿瘤靶向性治疗和个性化方案的新时代。,2,白血病分子诊断的意义,系统诊断,白血病初发。
2、流式细胞术实验方法及应用何 玉 萍,科研型分选功能488nm激光四色荧光(525、575、610、675nm）,一、流式细胞术的原理,流式细胞仪的发展起源于细胞计数自动化的研究。其原理是被荧光染色的单细胞或颗粒，经过高速的液流系统形成细胞柱，排列成单细胞依次通过流动室，在激光照射区域，携带荧光素细胞受激发产生不同的荧光信号，这些荧光信号可以反映细胞的生物特性。,前向散射,激光,FCM的液流系统（如何形成单个细胞流）,样本管,鞘液管,近30年来流式细胞术在我国得到很快的发展，应用范围不断增大。目前，流式细胞术作为一门生物检测技术广泛。
3、 流式细胞术在临床中的应用马雷流式细胞术20世纪60年代末发展起来的细胞定性和定量的技术。通过收集激光照射到细胞后的散射光信号和荧光信号反映细胞的物理化学特征，并且根据细胞的物理化学特征分选得到感兴趣的细胞。流式细胞仪构造模式图液流系统光学系统电子系统分选系统细胞与分子生物学、流体力学、电磁理论和生物技术、激光技术、荧光技术、光电子技术、单克隆抗体技术、计算机技术、纳米技术等。流式细胞术是现代科学技术发展的综合交叉的产物，是集多种技术发展于一体的“大成者”。涉及多种学科及技术流式在肿瘤学中的应用 1、J。
4、利用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 1. 细胞按每孔4105 个的密度接种于60 mm细胞培养皿内，培养过夜后，用相应药物处理细胞。 设置实验组和对照组，实验组依辛伐他汀浓度分为3组，2molL5molL10molL辛伐他汀组 正常对照组NC。
5、流式细胞术实验技巧及数据分析上海交通大学医学院史桂英BD公司不同型号流式细胞仪FACSCaliburLSRII FACSAriaFACSCountFACSVantage&DiVaFACSCanto一 流式细胞仪的基本原理*稳定流动*激发光斑*荧光补偿*荧光素选择二 数据分析及开窗FCM原理示意图层流是液体稳定流动的必要条件 ,管道中层流 的形成要满足雷诺数dVRe = 2300， 式中 、 分别为液体的密度和粘滞系数， d和V分别为管道的直径和液体的平均流速。 FCM利用层流技术 ,使细胞流动稳定 ,并具有自聚焦作用 ,为细胞分析分选提供技术保证 . 层流技术液流驱动系统 （示意图）流速与压力的关。
6、流式细胞术原理及应用,For FCM Training,流式细胞术,流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒，如各种细胞、染色体、微生物、及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以定量,流式细胞仪系统,简介通过流式细胞仪我们可以得到以下信息-相对细胞大小- 相对细胞颗粒密度和内部复杂度- 染色过细胞的相对荧光强度,流式细胞仪的光信号,散射光信号荧光信号,1. 散射光信号,前向角散射光（FSC,。
7、流式细胞术的原理及其应用马洪星FLOWCYTOMETRY流式细胞术FLOWCYTOMETOR流式细胞仪 FlowCytometry Measuringpropertiesofcellsinflow FlowSorting Sortingse。
8、流式细胞术Flow Cytometry,（FCM）,什么是流式细胞仪,流式细胞仪实物,BD FACSVantage,BD-Calibur,1. 发展历史1934 Moldavan 1973 Steinkamp,一、概述,2. 定义：对在高速流动的鞘液包括下对特异荧光标记的细胞、粒子进行分析和分选的技术.3. 特点测量速度快，每秒钟能测数千个乃至上万个细胞可进行多参数测量在分析的同时可把具有指定特征的细胞分离出来，即分选技术。,凡是能被荧光素标记的细胞或颗粒都可用流式细胞仪检测。前提这种荧光素能被流式细胞仪所配置的激光光源激发在生物检测技术中流式细胞仪是不可多得的一机多用的仪器。,4. 。
9、流式细胞术样品制备技术流式细胞术对细胞的分析检测必须基于单细胞的基础上，这是流式细胞术的基本要求。因此就必须把实体组织制备成单细胞悬液。在应用 FCM 技术中，制备出合格的单分散细胞是流式细胞术样本制备技术中重要的一环。它要求这种分散细胞方法既要使细胞成为单个细胞，又能保持细胞的固有生物化学成分及生物学特性。流式细胞术样品制备大致可分为下面五个步骤： 取材：取手术或活检组织必须具有代表性，如取手术肿瘤组织，必须取瘤细胞生长旺盛部位；组织等标本必须在取材后保持样本的新鲜；一般在室温 1 个小时之内处理好样。
10、流式细胞术的发展史,1934年细胞在显微镜载物台的毛细管中流过。1949年流动的悬浮粒子计数方法Coulter效应。1967年发展了一种液流束、照明光轴、检测系统三者垂直的流失细胞仪。80年代出现了完善的流失细胞仪。,概 述,流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）是一种自动分析细胞的高技术，其原理是悬浮在液体中的分散细胞一个个地依次通过测量区，当每一个细胞通过测量区时产生电信号，这些信号可以代表荧光、光散射，光吸收或细胞的阻抗等。这些信号可以被测量、存贮、显示，于是细胞的一系列重要的物理特性和生化特性就被快速地、大量地测定。。
11、1,流式细胞术,胡嘉波江苏大学基础医学与医学技术学院,2,流式细胞仪（FlowCytometer简称FCM）是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。概括来说，流式细胞术就是对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒进行多参数的、快速的定量分析和分选的技术。从开始设想到第一台仪器的问世,科技工作者进行了不懈的努力。随着各相关技术的迅速发展，FCM技术已经成为日益完善的细胞分析和分选的工具。,3,FCM仪器分为二大类：一类为台式机，其特点为：仪器的光路调节系。
12、流式细胞术免疫标记应用简介 20091203 流式细胞术系列讲座之免疫标记上次流式细胞术讲座内容概述 流式细胞术的一般介绍 流式细胞术在临床检测和科研中的应用流式细胞仪可检测的细胞参数 细胞结构 细胞大小 细胞颗粒性程度 细胞表面面积 核浆。
13、血液病的流式细胞术分析 华西医院临检血液室 蒋能刚流式细胞术在血液病中的应用： 急性白血病免疫分型 淋巴细胞增殖性疾病免疫分型 骨髓增生异常综合征辅助诊断 微小残留白血病 ZAP70P糖蛋白等预后指标检测 PNHCD55CD59 细胞周期分。
14、流式细胞术分析技术及应用,流式细胞术：Flow cytometry,1930年，Caspersson 和Thorell开始致力于细胞的计数,1934年，Moldaven 试图用光电仪 记录流过一根毛细管的细胞,1949 年 Wallace Coulter 提出在悬液中 计数粒子的方法的专利,流式细胞的发展史,1953年，Croslannd-Taylor 应用 分层鞘流原理，成功的设计红细 。
15、流式细胞检测技术 n 流式细胞检测技术的原理和方法 n 流式细胞检测技术的应用 n 流式细胞相关技术流式细胞检测技术的发展 n 从本世纪初开始，科学家们就在不断探索细胞 测量技术，1968年斯坦福大学的BillBonner等 研制出第一台以。
16、流式细胞术原理及应用,一、什么是流式细胞术？流式细胞仪的构造二、怎样设计流式实验？三、流式实验中涉及到的关键步骤四、常见流式细胞术应用,一、流式细胞术基本概念,流式细胞术（Flow Cytometry）是对于处在快速直线流动中的细胞和生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选技术.研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等。对生物颗粒的物理参数及生物学特性进行定性和定量分析。,流式细胞仪构造图,流式细胞仪五大系统,流动室与液流驱动系统激光光源及光束成形系统光学系统信号检测与分析系统细胞分选系统,流动室与液流。
17、流式细胞术及其应用,第一部分流式细胞术的一般介绍,概念,流式细胞术（FlowCytometry，FCM）利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代。
18、利用流式细胞仪( flow cytometer ) 通过检测荧光信号来检测细胞或其它颗粒性物质（表面或胞浆或胞核）的物理、化学特性并通过这些特性对细胞或颗粒进行定量。& 检测表面标记物& 检测胞浆标记物& 检测胞核内标记物& 检测可溶性蛋白,流式细胞术（FLOW CYTOMETRY）,一、流式细胞仪的原理应用技巧的基础,1、仪器的基本原理,光源：激光(488nm 氩离子空冷激光) 细胞： 单细胞悬液液流：鞘液(Sheath Fluid) 流动室：Flow Cell检测器：光电倍增管(PMT)检测信号：散射光(FS，SS)，荧光信号(FL1FL4)统计分析：计算机,散射光信号FS 细胞大小SS 细胞颗。
19、流 式 细 胞 术,徐琦 副教授新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,第一节 流式细胞术概述,流式细胞术,流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且同时检测单个微粒（通常是细胞）的多项特性的技术，同时可以对特定群体加以分选,流式细胞术最大的特点是能在保持细胞及细胞器或微粒的结构及功能不被破坏的状态下，通过荧光探针的协助，从分子水平上获取多种信号对细胞进行定量分析或纯化分选。,细胞不被破坏，测量快速、大量、准确、灵敏、定量,流式细胞术的特点,流式细胞仪,流式细胞仪 是测量染色细胞标记物荧。
