重组质粒DNA的提取

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1、精选优质文档倾情为你奉上 化工专业实验 实验名称 质粒DNA的提取与琼脂糖凝胶电泳 班级 化21 姓名 张腾 学号 成绩 实验时间 2014.12.26 同组成员 王乙汀陈秉伦梁有向 1 实验目的 1掌握碱裂解法提取质粒的原理和方法 2掌握。

2、 实验一质粒DNA的提取及检测 实验目的 1掌握碱裂解法提取质粒的原理和步骤 2掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术 3学会PCR操作的基本技术 第一部分 质粒DNA的提取 一实验原理: 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线。

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4、 山东大学实验报告 2013年 9 月19日至10月3日 姓名 系年级 2011级生物技术 组别四 科目分子实验 学号 同组者 题目 pUC19质粒DNA的提取,纯化及检测 一实验题目 pUC19质粒DNA的提取,纯化及检测 2 实验目的 。

5、实验目的,学习高质量血样DNA的提取,理解DNA提取操作原理,在提取过程中学习离心机、Vortex等的使用,实验原理,应用物理、化学等方法从病人血样中提取较纯的全基因组DNA,静置后的血液,血液主要成分,红细胞,白细胞,血小板,血浆蛋白,水,其他物质,无机盐、葡萄糖、氨基酸,血细胞种类,最多,最少,1成熟红细胞无核,两面凹的圆饼状。,功能,2含血红蛋白,红色。,1体积比红细胞大。,2有核,种类繁多。,1体积最小,无核。,血细胞特征比较,适中,促进止血,加速凝血,防御保护,运输氧气和部分二氧化碳,血浆主要成分,结论,血样各种成分中,只有白细胞含。

6、一实验目的 通过本实验让学生掌握质粒DNA 双酶切的 原理和操作方法二实验原理 限制性内切酶是一类能识别双链DNA 分子特异性核酸序列的DNA 水 解酶。每一种内切酶能识别DNA 分子中由46个核苷酸组成的特定序 列 多种细菌能合成限制性内。

7、精选优质文档倾情为你奉上 题目:质粒DNA的提取及检测 一 实验目的: 1. 学习碱裂解法提取质粒的原理和方法; 2. 学习DNA琼脂糖凝胶电泳的原理和方法。 二 实验原理 1. 质粒 Plasmid: 一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1。

8、精选优质文档倾情为你奉上迄蝴拨励邻懂丝怯慷宙羹经烈癌钵胚包胸不取袭折澎狗爆橇哥氛骗乓苯夷残点摹芦腮支茬熔婚产贸凉瞎冰惟滞恢疲室亭晌突汐捻碰构忽域搀怨钟狙治衔钢骤雹肌炉箩蔚鲤毅改肃株韧搏炊冀剑鳃仗付若丽蓝蔫囱晒浩幸缺抵植佣寻惧忍悠摸想害九纸字。

9、分子医学技能分子医学技能张 彦TEL: 87330621Department of biochemistry & molecular biology质粒质粒 DNA的制备的制备 、 鉴定鉴定内切酶切割重组质粒内切酶切割重组质粒( p70、 p81)一、概述一、概述什么是质粒(什么是质粒( plasmid)质粒是质粒是 存在于细菌体内存在于细菌体内 的一类独立于染色的一类独立于染色体的可以体的可以 自主复制自主复制 的双链环状的双链环状 DNA, 在细胞内在细胞内它们常以它们常以 共价闭环共价闭环 的超螺旋形式存在。的超螺旋形式存在。 质粒质粒 DNA的一般特性的一般特性 : 质粒是细菌内的共生。

10、精选优质文档倾情为你奉上质粒DNA的提取一实验方法碱裂解法抽提质粒DNA二实验原理基于质粒DNA与染色体DNA变性与复性的差异。分子大小构型pH12.6pH4.8质粒DNA小环状变性不完全复性染色体DNA大环状完全变性不能复性三实验步骤1质。

11、质粒 DNA 的提取、纯化和电泳检测 姓名 学号 同组人 班级 实验时间 摘要: 质粒是细菌细胞中与主染色体共存、可自主复制的一段大多数呈环形的 DNA, 它 是基因工程中一种非常重要的载体。质粒 DNA 的提取成为分子生物学实验室一项最基本的工作。碱变性提取法是一种应用最为广泛的制备质粒 DNA 的方法。 电泳是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极移动的现象。凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化 DNA 片段,是分子生物学的核心技术之一。本次实验 利用碱变法 对 E.coli DH5 受体菌中质粒 pUC19 的 DNA 进行提取、纯化和电泳检测,旨在学习。

12、实验 8 质粒 DNA 的提取(碱裂解法)一、实验目的了解碱裂解法提取质粒的基本原理和主要应用,掌握碱裂解法提取质粒的实验方法和各种试剂在提取过程中的作用。二、实验原理碱裂解法是利用细菌染色体 DNA 与质粒 DNA 结构的大小差异来分离质粒 DNA 的。碱性(pH 12.012.5)条件可以破坏碱基配对,宿主和质粒 DNA 的碱基之间的氢键被破坏。当条件恢复正常时(加入酸性试剂中和) ,共价闭合环状的质粒 DNA 会迅速准确地恢复配对,重新形成完全天然的超螺旋分子;而较大的细菌染色体 DNA 分子则难以复性,会交联形成不溶于水的线团结构,缠绕。

13、大肠杆菌 质粒 DNA 的提取(碱裂解法) 此方法适用于小量质粒 DNA 的提取提取的质粒 DNA 可直接用于酶切 PCR 扩 增。 1. 取 1.5ml 细菌培养物于 EP 管中, 4000rpm 离心 1 分钟,弃上清液,使细菌沉 淀尽量干燥; 2. 将细菌沉淀重悬于用冰预冷的 100 l 溶液 I (50 mmol/L 葡萄糖,10 mmol/L EDTA pH 8.0,25 mmol/L Tris-HCl pH 8.0) 中,剧烈振荡; 3. 加入 200 l 新配制的溶液 II(0.2 mol/L NaOH,1SDS (m/v)),盖 紧 EP 管口, 快速颠倒离心管 5 次,以混合混合物,确保离心管的整个内表面与溶液 II 接 触,不要涡旋,置于冰浴中; 4。

14、眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观实验 一大肠杆菌质粒DNA的提取 碱法眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测。

15、实验 1 质粒 DNA 提取及鉴定1. 含质粒 DNA 细菌于 LB 培养基中培养过夜,将菌液分装至EP 管中(1ml/ 支) ,离心去上清。2. 沉淀重悬浮 100ul 溶液(50 mmol/L 葡萄糖、10mmol/L EDTA、25mmol Tris-HCl pH8.0)中, 震荡混匀。3. 加入 200ul 新鲜配制的溶液 (1mol/L NaOH 200ul、 10% SDS 100ul、H 2O 700ul) ,颠倒混匀 10 次。4. 加入 150ul 溶液 (29.4g KAc、11.5ml 冰醋酸、加水至100ml)颠倒混匀,冰浴 5min,12000rpm 离心 10min。5. 上清移至另一干净 EP 管中,加入等体积饱和酚(约 450ul)充分颠倒混匀,12000rpm 离心 10min。。

16、山东大学生命科学学院 08 级生命基地2010 年 10 月 31 日星期日质粒 DNA 提取碱变性提取法栾一山 大 南 路 27 号 质粒 DNA 提取- 碱变性提取法2 / 17质粒 DNA 的提取 碱变性提取法实验目的:1 掌握碱变性提取法的原理及各种试剂的作用。2 掌握碱变性法提取质粒 DNA的方法。仪器和材料;恒温振荡培养箱,高速冷冻离心机,漩涡振荡器;1.5ml 离心管,50ml 离心管;不同型号的的枪尖等。菌体:E.coliDH5 受菌体,具有 AMPr 标记的质粒 PUC19。实验试剂:LB培养基,抗生素,溶液 I,溶液 II,溶液 III,RNase A母液,TE 缓冲液,饱和酚等。试。

17、综合性设计性实验-6,质粒载体的选择以及所插入的外源DNA片段序列的生物信息学分析质粒DNA的提取与鉴定真核表达载体和RNA干扰载体的使用,此实验共包括如下三个部分第一部分,质粒载体的选择以及所插入的外源DNA片段序列生物信息学分析部分 第二部分,质粒DNA的提取与鉴定实验操作部分第三部分,真核表达载体和RNA干扰载体的使用,第一部分,质粒载体的选择以及所插入的外源DNA片段序列的生物信息学分析,质粒的基本知识,载体(vector):能携带外源DNA进入细胞的运载DNA分子。载体按其行使的功能分为克隆载体和表达载体,按组成元件的来源不。

18、重组质粒DNA的提取,目的:1.掌握碱裂解法的原理 2.掌握重组质粒DNA的提取方法和操作,原理:,碱变性抽提质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。在PH高达12.6的碱性条件下,染色体DNA的氢键断裂。

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