1、1烟叶发酵的化学原理第一节 烟叶发酵概述一、烟叶发酵的重要意义烟叶发酵是卷烟加工中极为重要的环节，良好的发酵工艺可改善烟叶品质。未经发酵处理的烟叶不同程度地带有多种品质缺陷，生青杂气和刺激性突出，没有陈化烟叶的特征香气，香气质单调，香气量不足；不能直接用来生产卷烟。通过发酵处理后，烟叶青杂气和刺激性下降，烟草特征香气显露，可用性显著提高，因此烟叶必须经过发酵处理才能用于生产卷烟。二、烟叶发酵的概念广义上讲，烟叶烘烤（或晾晒） 、复烤和发酵均属烟叶调制的大概念。随着烟叶加工技术的改进和发展，烟草发酵被细分成不同的概念。一般将烟草发酵定义为：烟叶通过烘烤（或晾晒）和复烤后，在人工强化条件或自然条件
2、下陈化一个过程；使烟叶内含物发生一系列化学或生物化学变化，减少原烟某些品质缺陷，使烟草香更加显露，吸食品质明显增强的一个卷烟加工极为重要的工艺环节。根据发酵条件和方法的不同，烟草发酵被分为自然发酵和人工发酵。自然发酵是在库房室温条件下将烟叶贮存一段时间，在自然条件下陈化烟叶，使烟叶更符合吸食要求。这种发酵方法被欧美和中国的云南普遍采用。人工发酵是在特定的人工强化温度和空气湿度的发酵室内，加速陈化烟叶，使其更符合吸食要求的烟叶发酵方式。这种方法是 20 世纪 50 年代前苏联科学家发明并在东欧和中国被广泛推广应用的一种烟叶发酵方法。烟叶发酵、烟叶陈化和烟叶醇化都是含不同侧重内容的烟草发酵概念。陈
3、化，主要偏重于指自然发酵，也叫醇化。发酵，主要偏重于指人工发酵。醇化，侧重于指人工发酵和自然发酵后的效果。多数情况下醇化等同于陈化。烟草发酵与微生物发酵是两个完全不同的概念。三、烟叶发酵机理2烟叶发酵过程的主要物质转化途径和主要催化因子是烟叶发酵机理研究的两大核心问题。1858 年英国科学家 Koller 最早对烟草发酵机理进行研究，指出在某些方面雪茄烟的发酵与乙醇发酵相似，并试图用微生物来提高烟草发酵效果，没有取得成功。1950 年美国烟草专家 Frankenburg.W.G 提出由酶催化烟叶发酵的理论，并在晾晒烟发酵过程中发现近半数的蛋白质被蛋白酶水解成大量氨基酸。20 世纪 50 年代前
4、苏联科学家做了大量微生物烟草发酵试验，均未获得成功；随后改变方法用提供酶作用的温湿度条件创造了人工发酵方法。1977 年瑞士化学家 Demole 证实了烟草的主要香气成分来源于类胡萝卜素、西柏烷类和 赖百当类化合物的降解。1980 年以后我国以高校和研究院为核心的科研队伍对烟叶发酵机理展开了大量研究，对烟叶发酵机理两个核心问题的研究结果进行归纳，可以指导我们加深对烟草发酵机理的了解。（一）陈化过程烟叶内含物的主要转化途径1.烟叶萜烯类化合物降解作用 烤烟和白肋烟主要含二大类萜烯化合物：西柏烷类和类胡萝卜素。这两大类化合物的降解可产生 50 多种香气成分，是陈化烟草表现天然烟香特征的主要成分，香
5、料烟的典型香型来自于赖百当类和类胡萝卜素降解产物（Demole,E.,and P.Dietrich 1977） 。2.Maillard 作用 还原糖和氨基酸在一定条件下产生分子重排，形成类黑素，（L.C.Maillard 1912. J.E.Hodge 1968.） 。烟草内含丰富的还原糖和氨基酸，通过陈化形成 56 种杂环化合物，统称烟草类黑素，此类成分可使烟草表现陈烟香气，在自然条件下这是一个缓慢的分子重排过程。Maillard 作用是烟叶还原糖和氨基酸含量下降的原因之一，使烟叶颜色略有加深。3.烟叶残存叶绿素降解作用 通过调制后，烟叶仍然含有一定量的叶绿素和叶绿蛋白复合体，致使未陈化烟叶
6、表现较重的青杂气特征。通过陈化，烟叶残留叶绿素进一步降解，生成吡咯类化合物，表现陈烟香气特征。在自然条件下这也是一个缓慢的过程。4.杂气成分的缓慢挥发作用 自然陈化过程，烟草逐渐形成挥发性的小分子醛、醇、酸、氨、挥发碱（包括游离态烟碱）等对烟草吸食有明显影响的不良成分，这些成分具有明显的挥发性特征，在陈化过程中逐步挥发，醇化烟叶。小分子不良成分形成是一个化学过程，挥发作用则是典型的物理过程。5.酰胺与易分解氨氮化合物的脱氨挥发作用 烟草氨氮化合物在陈化过程中脱去3氨基，形成有机酸和 NH3，有机酸积累和 NH3 的挥发可达到醇化烟叶的效果。烤烟陈化后总氮一般下降 4%，晾晒烟的下降幅度远远大于
7、烤烟。6.缓慢酸化作用 陈化过程烟叶内含部分易氧化有机质被氧化为有机酸（其中包括部分还原糖） ；另外酰胺和部分易转化氨氮化合物脱氨挥发形成有机酸；同时部分挥发碱挥发使烟叶碱性下降。三方面的作用导致烟叶有机酸相对积累，总酸量相对上升，使烟叶出现明显的酸化过程，该过程还伴随着部分游离态烟碱与有机酸形成有机酸盐，使游离态烟碱变为结合态，有明显的醇化烟气效果。7.多酚降解作用 通过陈化处理，烟草多酚含量迅速下降，一年陈化可使烤烟多酚含量下降 21%，16 天人工发酵处理使烤烟多酚含量下降 51%。因为烤烟多酚主要是芸香甙和绿原酸，它们是一类烤烟特征香气成分，多酚的过多降解，会使烤烟香气变淡。适当分解也
8、有降低烤烟苦涩味的效果。但人工发酵过量降解多酚对烟香有负面影响，应适当控制。8.游离烟碱转化降解作用 烟叶内含游离烟碱常引起较强的刺激性和不良吃味，陈化过程游离烟碱逐渐从结合烟碱中产生，并逐步降解为中性成分烟酸和其他类似物，消除强烈刺激性和不良残留余味。因为游离烟碱在烤烟中是缓慢形成的，所以它的降解也是逐渐进行的。9.果胶质降解作用 果胶质是引起烟气尖刺感的重要成分，陈化过程果胶质被缓慢降解为果胶酸和其它成分，尖刺感逐渐减弱。烟草陈化过程除上述九个主要转化途径外，还有许多转化，由于它们不是影响烟叶品质的主要途径，故不作详细介绍。（二）烟叶发酵的主要催化因子晾晒烟陈化过程烟叶内残存部分活性水解酶
9、和少量活性细胞，大约晾晒烟一半的蛋白质被蛋白酶降解，产生相当数量的氨基酸（Frankenburg.W.G 1950 Enzymology 10:325-431） 。晾晒烟陈化初期的主要催化因子是残存水解酶，后期则是其他酶类。香料烟特征香质有别于烤烟和白肋烟，而白肋烟与烤烟特征香差异是由化学成分间的巨大比例差异导致的。烤烟陈化的催化因子有别于晾晒烟，经初烤和复烤两次高温处理，烤烟残存水解酶活性不能被检测到（卢红、王晶晶、陆富，2001） ，烤烟陈化初期的激烈程度不如晾晒烟。烤烟细胞内酶类是陈化的主要催化因子，主要来自烘烤前的鲜活烟叶，烘烤后4活性变得极端微弱，以致烤烟发酵往往达不到晾晒烟的效果，
10、必须采用长时间的陈化处理。（三）烟叶陈化与环境条件的关系1.温度 烟叶陈化的九个主要物质转化途径对温度的要求各不相同。以反应速度而论，多酚氧化最快为 47，Maillard 作用最适温度 90110，在 105时合成的烤烟类黑素最具纯正陈化香气。温度越高杂气挥发越快，香气损失也随温度上升而加快。以烤烟品质而论，陈化温度以 3038最优。2.烟叶含水量和空气湿度 烤烟防霉含水量以低于 12%为标准，但对烤烟陈化最有利的含水量是 13%14%，工业上往往将烟叶含水量降至 12%以下，陈化过程烟叶从空气中吸湿，含水量一般上升至 13%14%；烤烟陈化在空气相对湿度 60%80%最佳，空气湿度随气温变
11、化而变化，干湿交替对烟叶排杂有利，尤其是具挥发性的强极性成分排除，需要烤烟有分子水的吸收排放过程。3.打包方式及光线 烟包有少量气体交换有利烤烟陈化排杂和保持香质，工业上烟包密度一般为 370kg/m3。包装材料需无异味并具有一定吸湿能力，以木材最佳，其次是纸箱。光线对烟香不利，光线直接破坏某些带双键的化学成分，包括多种香气成分，避光对陈化质量有利。四、烟叶发酵技术烟叶发酵主要分为自然发酵和人工发酵两类。（一）自然发酵自然发酵也称“醇化”或“陈化” ，主要是借助自然气候的变化进行发酵的，所以也叫季节性发酵。它的主要特点是在烟叶贮藏期间，利用一年一度的春季温度上升，促进烟叶内酶的活动，使烟叶经过
12、缓慢的发酵过程，以达到改善烟叶品质的目的。其优点是工艺简单，操作方便，发酵后烟叶色泽鲜明，比较均匀，而其缺点主要有：时间长（12 年） ，占用仓库面积大，烟叶周转慢，不够经济。（二）人工发酵烟叶的人工发酵，又称加温发酵。它是利用人为的适合烟叶内在品质变化的条件（即适宜的温度和湿度） ，促使烟叶加快变化的方法。发酵后烟叶质量相当于陈烟质量。其优点是：发酵周期短，一般为 1215 天，比较经济。烟叶的类型不同，其发酵方法也不同，这主要根据烟叶的性质和具体要求来决定。5决定烟叶发酵方法的主要条件包括：第一，烟叶的特性，主要指烟叶的成熟度，烟叶等级的高低，烟叶的柔软粗糙程度，调制方法，化学成分及烟叶含
13、水量的大小；第二，周围空气的温度和相对湿度；第三，发酵的堆垛体积和重量；第四，各种类型烟叶的发酵程度；第五，发酵前烟叶贮存的时间。下面将分别叙述不同类型烟叶的发酵方法。1烤烟人工发酵方法 在我国，卷烟工业所需原料绝大部分是烤烟，作为烤烟型卷烟对烟叶的色泽要求偏浅。因此发酵时，烟叶的含水量需低，否则，将会使烟叶颜色加深。有的甚至会变成褐色，光泽较暗，香气减少。不同烟叶有不同的发酵方法。烟叶发酵水分差距较大。一般来说，烟叶水分较高，如原烟水分 18%20%，发酵作用较猛烈，发酵进展速度快，发酵时间短，质量较差；反之，若烟叶水分较低，复烤后烟叶水分控制在 11%13%，发酵作用较缓慢，发酵时间长，烟
14、叶质量好。温度是烤烟发酵的主要技术条件，温度太低，烟叶发酵进程缓慢。例如，在冬季，烟叶温度低至 0时，烟叶在仓库贮存基本上不发酵。到春末夏初气温达到 20左右时，烟叶即开始发酵。根据有关方面的研究认为，中、高等烟叶仍采用 50发酵法；低等烟叶采用 55发酵法。采用一次连续性强化醇化或发酵醇化再发酵来延长发酵时间，促进烟草的棕色化反应，以达到改进色、香、味的目的。2.白肋烟发酵方法 烤烟的主要烟气趋酸性反应，而白肋烟则产生一种碱性的烟气，有一种浓郁好闻的香气，对卷制混合型卷烟是很有益处的。但白肋烟也有其较突出的缺点，氨气很重，故而使用前应进行发酵。其发酵方法为：第一阶段，发酵室温度提高到 50的
15、升温阶段，时间为 22.5d；第二阶段，发酵的烟叶保温 10d；第三阶段：发酵终了后 22.5d。总的发酵时间为 1415d，烟叶水分为 15%17%之间，发酵后的白肋烟烟叶质量，应除去大量的氨，使其浓郁香味显露出来，吃味纯净，刺激性减轻，颜色呈棕色，一般最低要求成棕褐色即可。3.香料烟发酵法 香料烟的上部烟叶和顶叶具有较浓的香气，这种香气叫做热固树脂香，它释放出烟草的自然组分，造成更有效的香味。香料烟的热固树脂比其他类型的烟草要强 46 倍，其熔点只有 5967。因此，在发酵上采用较低的温度，否则热固树脂变为热熔树脂，香气容易挥发。香料烟经过分级包装，水分为 14%16%，即可进行发酵，发酵
16、的温度 4045较宜，发酵时间为 3045d。香料烟发酵的质量，要求保持其原有的色泽和香气，只改善它的生青气即可。64.雪茄烟的发酵方法 雪茄烟的发酵方法大致分为两类，及堆垛发酵和装箱发酵。通常所用的雪茄烟外包皮、内包皮和芯烟的发酵方法是不同的。对外包皮烟叶而言，一般比较喜欢青灰色或棕黄色。因此，采用较低温度和较长发酵时间，即经过长时间的低水分条件下进行缓慢的发酵方法。从质量方面讲，要求只控制其颜色不转深，适当减轻刺激性，通常用装箱发酵来完成。内包皮和芯烟则与外包皮烟相反，发酵时不控制颜色，只注重提高内在质量，降低尼古丁含量，消除氨气，保留雪茄烟香气，故采用堆垛方法。烟叶水分较大，一般第一次堆
17、垛时，烟叶的水分在 40%50%之间，堆垛温度升到 58以后，经过若干次倒垛，烟叶水分逐渐降低到 18%20%，尼古丁从4%7%降低至 2%左右，氨气就可以消除，烟叶所含的强烈雪茄香显露出来，此时即停止发酵。5.晒黄烟的发酵方法 晒黄烟在混合型卷烟中作用较大，可以增加吸味，谐调烟气，增加光泽油润等。但晒黄烟的突出缺点是地方性杂气较重。晒黄烟的发酵以湖北均县为例，用 60发酵，相对湿度在 65%70%，发酵时间 911d，地方性杂气即显著减轻，颜色适当地转棕色，有光泽。因此，初步认为发酵晒黄烟采用 60温度为宜。6.晒红烟的发酵方法 我国的晒红烟作为混合型卷烟原料是有其广阔前景的。例如，吉林延边
18、的晒红烟，已用于著名的人参牌卷烟中；再如，贵州的打宾、独山，湖南的凤凰、辰溪，江西的云都、广丰，广东的罗定，浙江的桐乡和遂昌，其晒红烟都是较好的混合型卷烟原料。但上述地方晒红烟的特点是烟碱含量高，含糖量低，土杂气重，烟味辛辣、苦涩，劲头特大，要改进其质量，必须采用人工发酵方法。真空回潮法是将烟包温度升到 90再进行发酵，发酵室的温度为 50，相对湿度 70%，发酵时间 24d，晒红烟质量便有很大改善，不仅杂气减轻，氨气消除，而且劲头亦有所降低。60人工发酵法是发酵前将烟叶水分从 16%加至 30%左右，在发酵室内发酵46d，其杂气和氨气消除，劲头和刺激性减轻，烟香显露，但颜色转变为较暗淡。蒸、
19、煮、漂、洗的方法以蒸的烟叶质量最佳，蒸的时间按烟叶质量好坏确定，一般 23h即可，煮、漂、洗对烟叶香气有损失，处理时间宜短，一般 35min 即可。第二节 烟叶发酵过程中的变化一、发酵过程中干物质损耗在发酵过程中，烟叶内在化学成分发生很大变化，主要表现为氧气的吸收和二氧7化碳、水、氨、挥发性小分子物质的排出，最终导致干物质的减少。一般而言，经发酵后，烤烟干物质的减少范围从微量到 2%，晾晒烟干物质损耗较大，一般在 3%4%。但是，有些晾晒烟在采用特殊方法进行人工发酵时干物质损耗则较大，最高可达 18%左右。烟叶中的亲水性胶体物质在发酵过程中会进一步分解，从而使那些原来与胶体物质结合在一起的水分
20、被游离出来，导致烟叶表现出“回潮现象” 。发酵过程中出现的这种特异现象，在发酵成熟度差的烟叶上表现尤为突出。当然，造成烟叶发生“回潮现象”所用的水分，除了发酵过程中烟叶内某些物质的结合水可能被释放排出外，还可能由氧化反应的结果所产生。这又可能是由于脱氢作用过程中产生的氢与氧结合的产物。显然，这种现象表现的强烈程度与烟叶干制加工进行的深度有关。换言之，如果烟叶在干制时化学变化比较小，那么，这种烟叶在发酵过程中从结合状态释放出来的水分就多，发酵时发生“回潮现象 ”就比较明显，烟叶内部发热就高。此类烟叶在发酵时的干物质损耗就大。（一）干物质的损耗量烟叶发酵过程中的干物质损耗主要是有机物挥发造成的，这
21、些挥发性物质主要是：游离烟碱氧化；果胶质解体时甲醇排出体外；在条件适宜的情况下氨类物质的排出。另外，还有一些芳香油类和有机酸类物质的排出。有试验报道，烟叶内有机酸含量越高，发酵时干物质损耗就越大，其结果见表 91。表 91 室内发酵时干物质和有机酸类的损耗（ Frankenbury. W. G., 1947）烟叶干物质损耗（mg/100mgCa ）有机酸类（mg/100mgCa）等 级实 验重 复发酵前 发酵后 损 耗损 耗（% ）发酵前 发酵后 损 耗损 耗（ %）1 2676 2640 36 1.35 330 293 37 11.212 2420 2390 30 1.24 285 252
22、33 11.5813 2422 2393 29 1.20 294 259 35 11.904 2332 2300 32 1.37 281 248 33 11.745 2471 2439 32 1.27 302 266 36 11.928平 均 31.8 1.29 34.8 11.671 2639 2602 37 1.42 415 361 54 13.012 2704 2663 41 1.53 388 336 52 13.403 2494 2459 35 1.30 335 291 44 13.424 2398 2363 35 1.47 298 258 40 13.1325 2542 2584 3
23、8 1.49 363 316 47 12.94平 均 37.2 1.46 47.4 13.181 2659 2604 55 2.07 436 375 61 13.992 2610 2560 50 2.00 451 385 66 14.633 2410 2361 49 2.02 418 360 58 13.884 2471 2418 53 2.16 446 380 66 14.0835 2497 2445 52 2.09 418 358 60 14.35平 均 51.8 2.07 62.2 14.33（二）影响干物质损耗的因素烟叶等级不同，发酵时干物质的变化不同，等级越低的烟叶，发酵后干物质的损
24、耗越大。烟叶水分对于烟叶干物质的变化也有很大影响，烟叶水分含量越高，发酵后干物质损耗越大。烟包容量越大，干物质的损耗越多。发酵时烟叶温度与干物质损耗量呈正相关。晒烟烟叶在发酵过程中干物质的损耗比烤烟多，其原因主要是：一方面晒烟烟叶具有较高的原始水分；另一方面是在调制过程中，晒烟中的胶体物质未受到充分破坏，干制后烟叶仍具有较强的持水力。此外，成熟度越差的烟叶，发酵时干物质损失越大。需要说明的是：烟叶发酵虽然造成其干物质的损耗，使其重量有所下降，但发酵明显地改善了烟叶的内在和外观品质，故这种干物质的损耗是一种正常的工艺损耗。烟叶发酵过程中，由于干物质损耗而造成重量下降的多少，只能反映烟叶发酵时进行
25、的猛烈程度，并不能说明发酵方法的好坏，也就是说，发酵对烟叶重量的损失多少并不表明发酵成功与否。在某种情况下，烟叶发酵时有相当多的物质减少，并未获得发酵的成功。相反，烤烟借助陈化，改善了品质，但烟叶干物质损耗却比较少，这是因为叶组织里发生一些很细微的或者更重要的化学变化，并不释放出挥发性产物而9使干物质减少。二、发酵过程中糖类化合物的变化（一）淀粉的变化香料烟自然发酵前淀粉含量为 5.18%，经 2 年自然发酵变为 4.38%，烤烟人工发酵前后的淀粉含量分别为 4.15%和 4.08%。说明淀粉在整个发酵过程中，尽管有所消耗，但总含量变化很小，尤其是烤烟的变化最小，见表 92。表 92 发酵后烟
26、叶糖类化合物的变化品种 发酵方法 淀粉（% ）可溶性糖（ %）总计（% ）自然发酵前 5.18 11.03 16.21自然发酵一年4.43 9.03 13.46香料烟自然发酵二年4.38 8.78 13.16人工发酵前 4.15 19.02 23.17烤烟人工发酵后 4.08 16.73 20.81注：引自钟庆辉.烟草化学基础知识.上海烟业，1994（2）.（二）水溶性糖的变化调制后的烤烟，一般含有 10%30%的可溶性糖。在发酵过程中，由于烟叶内部发生强烈的化学反应，使烟叶中的水溶性糖含量发生明显的变化。以香料烟和烤烟为例（见表 92） ，经过发酵的烟叶水溶性糖损失量达 16%25%之多。另
27、据玉溪卷烟厂张德厚报道，采用同年份、同地区、同品种、同等级烤烟的可比条件，经过 2.5 年自然发酵过程的烟叶，其总糖量减少 7.64%。发酵后的烟叶中一般都不含蔗糖，蔗糖在发酵过程中几乎全部被分解。而复杂多糖类物质，如纤维素、半纤维素和木质素等都改变极微。相反，这些成分在发酵后的烟叶中含量有所增加，原因是发酵过程中其它许多成分被消耗，烟叶干物质明显减少，而纤维素等则几乎未被分解，这些物质的含量比例相对地增加。三、发酵过程中含氮化合物的变化10（一）蛋白质的变化烟叶的蛋白质属于复杂高分子化合物，性质比较稳定，在通常的发酵条件下，一般变化不大。因此，发酵处理烟叶，蛋白质几乎不减少，甚至有的烟叶在发
28、酵后蛋白质含量反而会略有增加，其主要原因是由于发酵后烟叶干物质总量减少，蛋白质则几乎保持不变，结果在干物质总量中所占的比例相对增长。见表 93。（二）水溶性含氮化合物的变化烟叶中的水溶性含氮化合物主要是指氨基酸、水溶性短肽、烟碱和氨，与蛋白质的变化相反，上述水溶性含氮化合物在发酵过程中却发生明显的变化，见表 93。表 93 发酵后烟叶中含氮化合物的变化（%）品种 发酵方法 蛋白质氮 可溶性氮 烟碱 总氮自然发酵前 0.95 0.217 1.00 2.17自然发酵一年 0.93 0.156 0.92 2.01自然发酵二年 0.92 0.145 0.86 1.93变化(%) -3.1 -33.1
29、-14.0 -11.2人工发酵前 0.73 0.169 2.05 2.95人工发酵后 0.77 0.113 1.96 2.84香料烟烤烟变化（ %） 5.20 -33.1 -4.39 -3.60注：引自钟庆辉.烟草化学基础知识.上海烟业，1994（2）.由上表可以看出，无论是经过自然醇化，还是经过人工发酵，烟叶中的水溶性含氮化合物变化较大。经发酵后水溶性氮降低 33%以上；烟碱氮损失量达 14%左右。总氮量在发酵过程中一般损失占干物质重量的 0.01%0.6%，或者是原始氮含量的 0.25%12%。据张德厚报道，采用同年份、同地区、同品种、同等级的烤烟，经过2.5 年的自然醇化，其总氮量减少 6.84%，烟碱减少 10.95%。烟叶中氮量损失的主要原因是一部分挥发性氮化合物的分解产物氨散失到了空气中。当然这种氨挥发量的多少，要依据烟叶组织的 pH、烟叶的温度、水分、周围环境的温度以及空气流动的情况而定。如果被发酵烟叶含水量较大，发酵过程空气的温度和湿度较高，而且烟叶又呈碱性反应，那么烟叶中的氮量损失就较大，即氨容易从烟叶组织中逸出。此外，氮量损失的另一原因，可能是在发酵过程中，氮化合物从叶片中转移到主脉中去，因为一般烟叶的主脉在分析以前均去掉。这种转移的结果，虽然使叶片中的氮减少，却不
