1、第四章 色谱分析法导论4.1 概述4.2 色谱流出曲线4.3 色谱法基本原理4.4 色谱定性和定量分析Chromatography1906年,俄国植物学家 茨维特在分离植物叶子中的色素时,将叶片的石油醚(饱和烃混合物)提取液倒入一根装有 CaCO3粉末的竖直玻璃管中,再加入纯的石油醚任其自然流下,一会儿柱中出现不同颜色的谱带,植物浸取液中的色素得到了分离。4-1 概述色谱法的产生 色谱法中包含两相固定相 固定不动的相 CaCO3 流动相 推动混合物流动的液体 石油醚 色谱法 : 一种重要的 分离 分析方法,混合物在流动相的携带下通过色谱柱分离出几种组分的方法 。1、按两相状态分类气相色谱( G
2、C)液相色谱( LC)超临界流体色谱( SFC)气固色谱 GSC 固体吸附剂气液色谱 GLC 液体液固色谱 LSC 固体吸附剂液液色谱 LLC 液体2、按操作形式分类( 1)柱色谱: 固定相装在柱管内的色谱法。( 2)纸色谱: 滤纸为固定相的色谱法,流动相是含一定比例水的有机溶剂,样品在滤纸上展开进行分离。( 3)薄层色谱: 把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。3、按分离原理分类( 1)吸附色谱: 利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。( 2)分配色谱: 利用固定液对各组分的溶解能力不同进行分离。( 3)离子交换色谱: 利用离子交换剂对各组分的亲和力不同进行分离。( 4)凝胶色谱
3、: 利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。 4 -2 色谱图及色谱常用术语一、色谱图1、 基线 在实验操作条件下,色谱柱后没有样品组分流出的曲线 称为基线。稳定的基线应该是 一条水平直线 。2、 峰高 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离,以( h) 表示。 峰高低与组分浓度有关,峰越高越窄越好。二、色谱图中的基本术语 标准偏差 峰高 0.607倍处的色谱峰宽的一半。 半峰宽 Y1/2 峰高一半处对应的峰宽。Y1/2 =2.354 基线宽度 Y 色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离。Y =44、 色谱 峰面积 A 色谱峰与峰底所围的面积。3、色谱峰的宽度( 1) 死时间 t0 不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。( 2) 保留时间 tR 组分流经色谱柱时所需时间。( 3) 调整保留时间 tR 扣除了死时间的保留时间。tR =tR-t0*tR体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间, 更合理的反映了被测组分的保留特性。 5、 色谱保留值 定性的依据