1、脱落细胞学,病理科,脱落细胞学,细胞固定的方法常见固定问题的处理体腔液样本的制备,细胞固定的方法,将细胞标本制作完成后，在细胞湿润时，立即放入以醇性溶液为主的固定液（95%酒精、无水酒精、甲醇、乙醚酒精液等）内，称湿固定法。这种方法是目前最好的固定方法，可以完好的保存细胞内的各种结构，对正确认识各种细胞的性质，减少细胞学的误诊有很大的帮助。,细胞固定的方法,此方法在痰涂片、妇科涂片、穿刺物涂片、各种刷片、食道拉网涂片、肿块印片等水分较少的标本上使用非常方便，但在胸腹水、尿、心包积液、脑脊液等含水量较高的标本制作时，需要一定的技术，才能避免细胞的脱落，这在后面各章节具体会讲。,细胞固定的方法,细
2、胞经过湿固定后，应该直接从固定液内拿出放入染色液中，无需水洗或干燥，水洗容易使细胞脱落，干燥会导致细胞褪变，也就是说无论在固定前还是固定后细胞干燥都会导致细胞褪变。,细胞固定的方法,湿固定后的固定液，一定要过滤或更换，防止细胞的脱落和污染。在固定和染色时，最好能将痰与其他液体标本分开处理，尽可能不要使用相同的苏木素液或使用前过滤，因为痰标本很容易吸附脱落的细胞，造成人为的污染，有时会导致误诊,常见固定问题的处理,1、细胞褪变：通常是由于涂片在干燥过程中，细胞氧化，导致细胞褪变。解决方法，在半湿状态下立即固定。其二，也可能是由于细胞不能及时送检。解决方法：及时送检，或在送检液体内加入福尔马林（送
3、检液体：福尔马林=9：1）。,常见固定问题的处理,2、细胞掉片：最常见的原因是涂片上水分福尔马林太多，导致放入酒精时有大量细胞脱落。解决方法，离心后要把试管内的液体全部吸干。其次可能是细胞量太多或玻片不干净，解决方法，把玻片洗干净，涂片要薄、均匀。,体腔液样本的制备,体腔液样本包括胸水、腹水、心包积液、尿、肾囊肿穿刺液等制作。当送检标本为尿液时，应该要求患者排空清晨第一次尿液，因为这时的尿液中含盐量高，非上皮性物质较多。应该选择第二次以后的中段尿为佳。,体腔液样本的制备,如果患者有有严重的尿道或阴道炎症，应采用导尿管插管取尿，连续三天送检。根据送检标本沉淀物量的多少，区别对待：一、制片1、取液
4、：轻轻的把送检液体上部倒掉，取下层液体15-50ml二管，放入离心管。2、转速2000/分，5分钟 。,体腔液样本的制备,3、观看离心管内沉淀物的量：（1）量少：离心后肉眼只能看到少许沉淀，快速倒去上清液，再加入送检标本，重复离心，反复多次。最后将上清液倒去，把试管竖直倒立于吸水纸上，用吸水纸吸干管口的水分，然后用吸管吸出沉淀物（湿固定的关键就在于如何把沉淀物上的水分去除干净，过多的水分会导致细胞脱片）。,体腔液样本的制备,如果沉淀物太少，又没有多余的标本可以反复离心，或多次离心后细胞量还是很少，可将上清液倒去后，把试管口向上静置几秒，试管壁上的液体会流入管底，用吸管反复抽吸这点液体，把管底的
5、细胞全部洗刷到液体里，然后吸出，放在0.5或1ml的尖底离心管内，重新离心，离心完成后，用200微升加样枪吸取上清液，最后吸出沉淀物。此时，由于离心管较小，底较尖，细胞会非常集中，容易吸出。,体腔液样本的制备,（2）量多：离心后用吸管吸掉上清液，然后，用吸管吸取沉淀物上层细胞。（3）红细胞多的标本处理：离心后吸取上层沉淀物，放入酒精冰醋酸液（25%酒精95ml+5ml冰醋酸）内，打匀，再离心沉淀。然后，吸取沉淀物。,体腔液样本的制备,4、涂片：吸取沉淀物后，滴在载玻片上，可采用二张载玻片对拉法。吸取沉淀物涂片的关键：吸取沉淀物内不能带有水分。涂片的关键在于平整，均匀，不能太厚。当细胞太少时，涂片面积应以量为标准，范围尽可能小而集中，这样才不容易漏诊。然后立即放入95%酒精内固定。,体腔液样本的制备,剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片完成后，根据诊断需要，决定是否需要再制片做免疫组化或做成组织块后再处理。（可放在冰箱内存放）,谢谢！,
