1、,第十八章 分枝杆菌属,Department of MicrobiologyHarbin Medical University,主讲教师：陈思佳,第二篇 致病性细菌,第十八章 分枝杆菌属Mycobacterium,医学微生物学教研室哈尔滨医科大学,结核分枝杆菌 形态、染色及培养特性 抵抗力和变异性 致病物资及特点 所致疾病 免疫性及超敏反应 郭霍现象 结核菌素试验 卡介苗 治疗和预防原则麻风分枝杆菌 形态染色特点 致病特点及分型 防治原则非结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌的分组及致病性,主要内容,分枝杆菌属（Mycobacterium）共同特性,细长略带弯曲的杆菌生长速度慢无鞭毛、无芽孢、不产生内
2、外毒素细胞壁含有丰富的脂质成分（分枝菌酸）致病性与菌体成分相关抗酸杆菌（acid-fast bacillus）,分枝杆菌属,分类结核分枝杆菌复合群结核分枝杆菌牛型分枝杆菌非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌麻风分枝杆菌 非结核分枝杆菌,根据生长速度快生长菌慢生长菌,第一节 结核分枝杆菌,Mycobacterium tuberculosis(TB),流行病学,结核病的病原菌1882年德国细菌学家 Koch 证明全球性卫生问题是艾滋病高发区人群的首要死因世界防治结核病日3月24日,结核病的国际形势,WHO统计世界1/3的人口感染结核世界范围每年死亡人数为200万人140万（2010年）90%以上在发展中国家每
3、年新病例为800万-1000万人我国结核病人450万人，每年死亡人数约25万,生物学形状,形态染色培养特性抵抗力变异性,形态与染色,细长略弯, 分枝状杆菌无芽胞无鞭毛, 无内外毒素抗酸染色阳性(Zeihl-Neelsen acid-fast stain),齐-尼氏抗酸染色法 Ziehl-Neelsen method for acid fast bacteria,涂片、固定、干燥初染：石炭酸复红脱色：3%的盐酸酒精复染：美篮染液干燥、镜检,培养特性,专性需氧，最适pH6.5-6.8生长缓慢：代时18h营养要求高罗氏培养基：甘油、天门冬素、蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔雀蓝液体培养基 吐温-80 (T
4、ween 80),抵抗力,Resistant to 干燥酸碱碱性染料青霉素等,Sensitivity 紫外线酒精湿热抗结核药物异烟肼利福平等,变异性,形态 L型 Much 颗粒菌落耐药性毒力变异,卡介菌-卡介苗（Bacilli Calmette-Gurin，BCG）是毒力变异株，将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中，经230次传代，历史13年而获得的减毒活菌株，目前广泛应用于结核病的预防,致病性,致病物质类脂蛋白质多糖,致病物质,类脂（lipid）分枝菌酸（mycolic acid）.抗酸染色特性索状因子（cord factor).慢性肉芽肿磷脂（phosphatide
5、）.结核结节，干酪样坏死蜡质D（wax-D）迟发型超敏反应硫酸脑苷酯（sulfatide）.细胞内寄生蛋白质结核结节形成、全身中毒多糖（polysaccharide）.胞内寄生,所致疾病,感染类型肺部感染：肺结核（原发感染、继发感染）肺外感染传播途径呼吸道消化道破损皮肤黏膜等侵犯多种组织器官,肺结核-原发感染(primary infection),多发生于儿童,原发结核,原发综合征：原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大,致病性,原发型肺结核正,肺结核-继发感染：成人多发,诱发因素原发病灶中潜伏的结核分枝杆菌引起外界的结核分枝杆菌再次入侵感染特点病灶局限，不累及临近淋巴组织易发生慢性肉芽肿和干酪样坏
6、死和空洞,肺结核-继发感染,病程呈慢性渐进性，伴有乏力、体重减轻、咳嗽、盗汗、午后潮热、胸痛等。病灶多局限呈干酪样结节，若结节破溃，则可形成空洞，传染性强。,致病性,右上干酪样肺结核,右下干酪样肺结核,右下干酪性肺炎并空洞形成,肺外感染,免疫力低下患者形成全身粟粒性结核或播散性结核,临床表现,咳嗽，咳痰(血痰）全身倦怠感微热盗汗胸痛食欲低下体重减少,感染结核菌的过程,感染不发病（既往感染）,初次感染发病 原发感染,抵抗力下降时发病 继发感染 成人多发,数月-2年之内发病 儿童多见,80%-90%,5%-10%,5%-10%,免疫机制：主要是细胞免疫,感染免疫、有菌免疫（infection im
7、munity ）感染TB或接种BCG后，机体可产生对该菌特异性免疫力，维持依赖于TB在体内的存在细胞免疫迟发型超敏反应,结核菌,初次感染（10-14d),既往感染(1-2d),皮下注射,红肿、溃疡、坏死,红肿、浅表溃烂,淋巴结肿大 全身播散,死亡,病灶局限无播散，无死亡,获得免疫力,郭霍现象,结核菌素试验,结核菌素试剂旧结核菌素（old tuberculin，OT)纯蛋白衍化物 (purified protein derivative，PPD),结核菌素试验,方法取两种PPD 5单位注入两前臂皮内4872小时后观察红肿直径结果阴性：5mm阳性：5mm强阳性：15mm,结核菌素试验结果、临床意义
8、,阳性强阳性 阴性,硬结、红肿直径515mm之间,既往感染过结核分枝杆菌卡介苗接种成功,硬结直径超过15mm以上,表明可能有活动性结核，应进一步检查,注射部位有针眼大的红点或稍有红肿，硬结直径小于5mm,原发感染的早期严重结核病或其他传染病（麻疹）老年人免疫力低下病人,微生物学检查,标本取材和处理涂片染色镜检：抗酸染色须与非结核分枝杆菌进行鉴别加热法：非结核分枝杆菌加热2分钟即失去抗酸性，而结核分支杆菌则不然结核菌素皮肤试验：检测潜伏结核感染的唯一的方法细菌学基因诊断：PCR动物试验,结核分枝杆菌痰标本抗酸染色,结核分枝杆菌尿标本抗酸染色,荧光金胺染色,结核分枝杆菌,结核病快速诊断方法,全自动
9、核酸扩增试验（NAAT）被世界卫生组织认可约100分钟内可为多名病人做出准确诊断,特异性防治,卡介苗预防接种对象：新生儿和结核菌素试验阴性的儿童免疫时间：35年药物治疗五项原则早期、联合、规则、足量、全程,第二节 麻风分枝杆菌,Mycobacterium leprae,麻风分枝杆菌（M. leprae）,麻风病的病原菌慢性传染病主要侵及皮肤、粘膜和神经引起关节的畸形性病变世界各地均有报道主要分布在亚、非洲拉丁美洲,生物学形状,形态与染色,细长略弯曲无芽胞，无荚膜，无鞭毛抗酸染色阳性典型的胞内寄生菌麻风细胞抵抗力抗干燥：可存活7天低温环境生存良好紫外线及加热敏感,培养特性,不能在人工培养基中生长
10、小鼠足垫：传代动物模型：犰狳（armadillo),致病性,易感人群： 人传播途径： 密切接触和呼吸道传播潜伏期： 平均2-5年发病慢、病程长麻风分为3种类型瘤型麻风结核样型界线类、未定类,瘤型麻风,传染性强病情严重侵犯部位皮肤和粘膜神经眼睛及内脏镜检病变部位麻风细胞肉芽肿,结核样型,传染性小侵犯部位皮肤外周神经很少累及内脏,Mycobacterium leprae,结核样型麻风皮肤损害,界线类麻风引起的手变形,微生物学诊断,显微镜检查，抗酸染色PCR：尚在研究阶段,麻风细胞抗酸染色,麻风分枝杆菌组织切片（Triff染色）,防治原则,特异的预防尚无有效的菌苗早期发现、早治疗目前多采用二三种药联
11、合治疗氨苯砜（dapsone，DDS）,Lepromatous Leprosy Pre- and Post-Treatment,非结核分枝杆菌,除人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌菌群海分支杆菌 ( M. marinum )耻垢杆菌 ( M. smegmatis )多存在于自然界，是条件致病菌与结核分支杆菌鉴别,小结,生物学性状形态大小、培养、染色特点及抵抗力致病性致病物质及引起的疾病郭霍现象、结核菌素实验及判定标准微生物学检查抗酸染色及快速检测方法（核酸检测）治疗与预防：BCG,问题,简述结核分枝杆菌的主要生物学特性简述结核菌素试验原理、结果判断及意义简述结核病的
12、预防及抗结核药物的治疗原则何为卡介苗？简述卡介苗在实际工作中的应用及对其效果的评价简述麻风分枝杆菌的生物学特性及致病特点,参考文献,普通高等教育 “十一五”国家规划教材医学微生物学(第二版)谷鸿喜主编，北京大学医学出版社 2009年7月普通高等教育 “十一五”国家规划教材医学微生物学(第六版)李凡主编，高等教育出版社 2011年5月WHO：http:/www.who.int/en/US CDC: http:/www.cdc.govNIH: http:/www.nih.govChina CDC: http:/China Ministry of Health: http:/维基百科：http:/w
13、ww.wikipedia.org,第十九章 梭菌属,第二篇 致病性细菌,第十九章 梭菌属Clostridium,医学微生物学教研室哈尔滨医科大学,主要内容,破伤风梭菌 芽胞及抵抗力 破伤风痉挛毒素 致病机制 所致疾病 特异性防治产气荚膜梭菌 形态及培养特点 致病物质 所致疾病 微生物检查法 肉毒梭菌 形态特点 肉毒毒素 致病机制 肉毒中毒 毒素检测艰难梭菌 毒素及致病性,梭菌属 （Clostridium）,一群专性厌氧、革兰阳性的粗大杆菌形成芽胞，细菌膨胀呈梭形产生外毒素广泛分布于自然界破伤风梭菌破伤风产气荚膜梭菌气性坏疽肉毒梭菌肉毒中毒艰难梭菌假膜性结肠炎、抗生素相关腹泻,Drawing o
14、f a Soldier dying of Tetanus,第一节 破伤风梭菌(C.tetani),生物学性状,形态与染色G+ ,1mx5m ，粗大杆菌芽胞位于顶端，菌体呈鼓槌状芽胞抵抗力强,专性厌氧,周身鞭毛,破伤风梭菌,致病性,感染途径 创伤、不洁接生 疾病 引起破伤风、新生儿破伤风感染条件厌氧微环境伤口深而窄混有泥土、异物局部组织缺血或同时伴有需氧菌混合感染,致病性,致病物质破伤风痉挛毒素（tetanospasmin）强毒性蛋白质对人的致死量是1g轻链具有毒性作用重链能与神经细胞表面受体神经节苷脂结合0.3%甲醛作用4周后脱毒成为类毒素,破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力,
15、局部感染,毒素,脊髓前角神经细胞,与神经节苷脂结合,封闭抑制性突触,阻止抑制突触释放介质(甘),兴奋性增高,全身肌肉痉挛,血、淋巴,外周神经间隙,阻断上下神经元间正常抑制性神经冲动传递,致病机制,破伤风痉挛毒素作用,嚼肌痉挛，牙关紧闭和吞咽困难。躯干及四肢肌肉强直，角弓反张体征。膈肌痉挛、呼吸困难窒息而死。,免疫性,破伤风免疫是典型的抗毒素免疫微量毒素即发病，且与神经迅速结合，不能引起有效免疫应答有效地获得抗毒素的途径是：主动免疫：注射类毒素被动免疫：注入大剂量抗毒素,微生物学检查法,临床诊断主要结合创伤史和特有体征微生物学检查对早期诊断意义不大必要时可取伤口渗出物涂片染色镜检及厌氧菌培养，并
16、以培养物滤液做动物试验，以确定有无毒素产生,防治原则,人工主动免疫 制剂：精制破伤风类毒素对象：婴幼儿、部队战士、建筑工人及其他易受伤人群方法：基础免疫1年后加强免疫对36个月儿童可采用白百破（DPT）三联疫苗人工被动免疫 制剂：注射破伤风抗毒素（TAT）用途：紧急预防 1500-3000u特异治疗 早期、大量注射破伤风抗毒素 注意事项：注射前应做皮肤过敏试验，脱敏疗法抗生素的使用 大量青霉素或甲硝唑,第二节 产气荚膜梭菌,革兰阳性大杆菌卵圆形芽胞荚膜无鞭毛厌氧培养：繁殖极快分解乳糖产气多凝固酪蛋白A-E 5型 A型常见,汹涌发酵实验,所致疾病,多种毒素和酶 ：-毒素气性坏疽（gas gang
17、rene）局部组织坏死、水肿、气肿、肿胀剧痛，触摸有捻发感特殊的臭味全身中毒食物中毒： A型产肠毒素,微生物学检查法,直接涂片镜检分离培养与动物实验血平板或疱肉培养基厌氧培养涂片镜检生化鉴定取细菌培养液给小鼠或家兔静脉注射,防治原则,及时处理伤口扩创、清创、手术器械灭菌早期可用多价抗毒素血清抗生素使用,第三节 肉毒梭菌（C.botulinum）,革兰阳性粗大杆菌周鞭毛无荚膜椭圆形芽胞专性厌氧透明溶血,致病物质肉毒毒素对人致死量为0.1g嗜神经性所致疾病食物肉毒中毒（豆制品、牛羊肉）神经麻痹婴儿肉毒中毒（蜂蜜）创伤肉毒中毒（伤口）,致病性,微生物学检查法,检出毒素动物实验：1组注上清发病；2组注煮沸上清不发病；3组注上清和抗毒素不发病。,防治原则,加强食品管理和监督，定期抽样检查食品进食前加热煮沸即可破坏毒素治疗应尽早注射A、B、E三型多价抗血清,第四节 艰难梭菌（C. difficile）,革兰阳性粗大杆菌芽胞呈卵圆形位于菌体近极端专性厌氧营养要求较高 可产生4种毒素 A为肠毒素人类肠道中的正常菌群抗生素相关性腹泻和假膜性结肠炎,小 结,重要厌氧性细菌的种类及主要特点破伤风梭菌 致病条件 特异性防治原则产气荚膜梭菌、肉毒梭菌致病物质 所致疾病,本章图片均来自网络,问 题,简述破伤风梭菌的致病条件。简述破伤风梭菌的防治原则。,
