1、毕业论文文献综述生物工程拟除虫菊酯类农药降解菌研究进展摘要拟除虫菊酯类农药的残留问题是农业生产上一个备受关注的问题,本文就对于拟除虫菊酯类农药及其危害进行了介绍,阐述了农药降解菌的筛选培养以及对于农药的降解机制,及其在农业生产上的科学研究和应用,并且对拟除虫菊酯类农药降解菌的发展前景作了展望。关键词拟除虫菊酯;降解菌;生物修复;筛选分离1、拟除虫菊酯类农药的介绍及危害11拟除虫菊酯类农药的介绍拟除虫菊酯类农药是继有机氯、有机磷和氨基甲酸酯类农药后兴起的在天然除虫菊酯农药的化学结构基础上研究发展起来的仿生农药。由于其具有低毒、高效、低残留、易于降解等特点而被广泛应用于农业生产1。LAFORLGE
2、在1947年合成了第一种拟除虫菊酯类农药丙烯菊酯,随后开发拟除虫菊酯的热潮在世界范围内掀起2。至今拟除虫菊酯农药种类繁多,主要有联苯菊酯、苯醚菊酯、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。12拟除虫菊酯类农药危害随着生物科学研究的不断前进,曾今被认为安全,低毒的拟除虫菊酯类农药,在近年来科学研究发现,此类农药有蓄积毒性3,长期接触导致慢性疾病的危害4,5对鱼类、蜜蜂和家蚕的毒性较高6,7。这类农药作为除虫剂在水产养殖产业中有着广泛的应用,然而对于水产养殖中鱼类也有着潜在的危害,鱼体内的农药残留物能够通过食物链的传递间接的危害到人类的健康。汝少国等8运用VTG免疫印记实验法,检测出甲氰菊酯、
3、氰戊菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯四种菊酯类农药能够诱导雄性鱼类分泌VTG,具有潜在的环境雌激素活性,并且抑制了精巢GTP和LDH生物活性,其中氯氰菊酯和溴氰菊酯明显降低了雄鱼GSI,对于鱼类有着一定的生殖毒性。GAREY9通过实验检测出氰戊菊酯会导致人子宫内膜癌ISHIKAWAVARI和乳腺癌T47D细胞系异常增殖。2、农药降解菌的介绍和筛选培养鉴定21农药降解菌的介绍农药降解菌是一类利用天然存在或特殊培养的微生物,在可调控环境条件下,通过微生物的降解或生物转化,把有害污染物转变或降解为无毒无害的物质10。主要运用生物修复技术从被农药污染的土壤中分离、筛选降解菌,然后用于农药的生物降解、修复。22
4、农药降解菌筛选培养鉴定国内外对于农药降解菌的研究很多,艾涛等11采用富集培养和平板稀释法,从农药污染的土壤中分离得到一株降解能力较强的降解有机磷农药的真菌菌株L3,经鉴定为ASPERGILLUSNOMIUS,这种菌对乐果和辛硫磷降解率很大。马爱芝等12从受六六六HCH污染的土壤中分离得到对六六六高度选择性降解的菌株BHCA,经鉴定为鞘氨醇单胞菌属SPHINGOMONAS,对、HCH4种异构体的降解率很大。郑永良等13利用加入甲胺磷(MAP)无机盐的培养基进行富集筛选,通过对比各菌种对于MAP的降解程度成功筛选出能够在特定培养基生长的甲胺磷降解菌。得出结论该菌能以MAP作为唯一的碳源和氮源生长。
5、庞金钊等14在加入带菌土壤的培养基内不断提高有机氯的浓度,不断富集筛选出有机氯农药降解菌。拟除虫菊酯类农药降解菌主要有产碱菌属(ALCALIGENES)。虞云龙教授从蚕沙坑淤泥中分离到能以部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类农药为唯一能源生长的降解菌YF0515后又从农药厂废污水淤泥中分离能降解部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类农药的YF1116菌株被鉴定为产碱菌属的一个未知种。该分离菌株可降解三氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯氯菊酯、溴氰菊酯、氰戊菊酯、对硫磷、甲基对硫磷等农药。王兆守后又奖阴沟肠杆菌经诱变筛选出了对拟除虫菊酯农药降解作用的降解菌17。3、微生物降解农药机理以及应用31微生物降解农药机理
6、微生物降解农药的机理归纳为两大类一,直接作用于农药,通过酶促反应降解农药;二,通过微生物的活动改变化学和物理环境从而间接作用于农药。常见的作用包括矿化、共代谢、生物浓缩或累积和微生物对农药的间接作用等,而通过酶促反应降解农药的方式则主要涉及氧化、脱氢、还原、水解、合成等几种反应类型。降解菌具有降解活性主要因为它体内存在的各种酶。其中的关键性酶酯酶是一类很重要的酶,只负责水解与酯有关的物质,使酯键断裂,催生多种含酯类农药。拟除虫菊酯类农药就是其中一种还酯类农药。虞云龙采用GCMS测定杀灭菊酯降解产物来推断拟除虫菊酯类农药的降解途径,结果发现YF11降解杀灭菊酯类属于矿化作用。拟除虫菊酯类农药在酶
7、促降解过程中,首先,降解菌产生的酶特异性的切断羧酸酯键,是原农药分子生成个较小的羧酸和醇,而后再进一步氧化、脱氢18,19,20,21,生成毒性更小或者无毒的化合物22。32微生物降解的应用有关于农药降解菌应用研究这方面的报道相对较少,李顺鹏23从活性污泥中分离到兼厌气性降解菌产碱菌属的一个种(ALCALIGENESSP。)应用于盆栽试验、小区试验、和田间试验取得对甲基对硫磷很好降解效果。方玲24将分离到的微生物制成混合降解菌应用于盆栽和田间试验,降解效果显著。程国锋25也用试验验证降解菌对于农药残留的问题的可行性。目前,对于拟除虫菊酯类降解微生物的应用主要分为三类一类是直接降解菌液运用于土壤
8、等环境中,考虑其成本与效益,此类研究难以保持长远发展。第二类是通过生物工程技术,直接合成作用于农药的相关降解酶,此类技术尚还在开发中,应用还未得到广泛推行。第三类是酶的应用研究,尤其是酶固定化研究尤为重要。但是国内外研究仍然甚少。4、展望降解菌能够有效的降解农药,具有高效、安全、费用低等优点,随着农药残留问题的日益严重,如何采取高效率的遏制这种现象的发生,控制环境污染的加剧程度成为现在可持续发展的一个重要环节,合理的运用降解菌及其技术,相信能够对于环境污染的控制能够达到比较理想的程度。但是,微生物降解的技术在国内外研究还不是很多,这就需要我们在农药降解科研这一领域不断突破,相信今后农药降解技术
9、会有一个美好的未来。参考文献1李玲玉,刘艳,颜冬云,徐绍辉拟除虫菊酯类农药的降解与代谢研究进展J环境科学与技术,2010,4(4)33342王兆守,刘丽花,陈小兰,邵宗泽拟除虫菊酯类农药降解菌及降解酶的研究现状J微生物学通报,2008,35(5)8258293SAHAS,KAVIRAJAEFFECTOFAMBIENTTEMPERATUREANDDAYLIGHTONTHESURVIVALOFFRESHWATERCATFISHHETEROPNEUSTESFOSSILISEXPOSEDTOCYPERMETHRINJENIRONMENTALENGINEERINGSCIENCE,200926245946
10、24ALMAKKAWYHK,MAGDYDMPERSISTENCEANDACCUMULATIONOFSOMEORGANICINSECTICIDESINNILEWATERANDFISHJRESOURCESCONSERVATIONANDRECYCLING,1999,27121051155KOLACZINSKIJH,CURTISCFCHRONICILLNESSASARESULTOFLOWLEVELEXPOSURETOSYNTHETICPYRETHROIDINSECTICIDESAREVIEWOFTHEDEBATEJFOODANDCHEMICALTOXICOLOGY,2004,4256977066谢涛,
11、熊丽,王奎拟除虫菊酯类杀虫剂对鱼类的毒性研究J生物学教学,2005,30747497孙克坊,周勤,周金钱微量菊酯类农药对家蚕毒性的调查初报JBULLETINOFSERICULTURE,2002,33327298邴欣,汝少国四种拟除虫菊酯类农药的环境雌激素活性研J中国环境科学,2009,2921521569GAREYJ,WOLFFMSESTROGENICANDANTIPROGESTAGENICACTIVITIESOFPYRETHROIDINSECTICIDESJBIOCHEMICALANDBIOPHYSICALRESEARCHCOMMUNICATIONS,1998,25185585910金志刚,
12、张彤,朱怀兰污染物生物降解J华东理工大学出版社,1997,PP21323011艾涛,王华,温小芳,等有机磷农药乐果降解菌株L3的分离鉴定及其性质的初步研究J农业环境科学学报,2006,2551250125412马爱芝,武俊,汪婷,等六六六HCH降解菌SPHINGOMONASSPBHCA的分离与降解特性的研究J微生物学报,2005,45572873213郑永良,刘德立,刘世旺,邹煜甲胺磷农药降解菌的筛选鉴定及其降解效能研究J华中师范大学学报,2007,411959814庞金钊,王丽坤,刘文芝,杨宗政,胡丽云有机氯农药降解菌的特性研究J生物技术,2006,16(1)707215虞云龙,盛国英,傅家
13、摸,等一株农药降解菌的分离与鉴定J华南理工大学学报,199618(5)152016虞云龙,宋凤鸣,郑重,等一株广谱性农药降解菌的分离与鉴定J浙江农业大学学报,1997,23(2)11111517王兆守,梁小虾,李秀仙,等拟除虫菊酯类农药降解菌的紫外线诱变J华东昆虫学报,2003,12(2)628618GRANTRJ,BETTSWBMINERALANDCARBONUSAGEOFTWOSYNTHETICPYRETHROIDDEGRADINGBACTERIALISPLATESJJAPPLMICROBIOL,2004,9736566219LEES,GANJ,KIMJS,ETALMICROBIALTRA
14、NSFORMATIONOFPYRETHROIDINSECTICIDESINAQUEOUSANDSEDIMENTPHASESJENVIRONTOXICOLCHEM,2004231120PAINGANKARM,JAINM,DEOBAGKARDBIODEGRADATIONOFALLETHRIN,APYRETHROIDINSECTICIDE,BYANACIDOMONASSPJBIOTECHNOLLETT,2005,271909232421SAIKIAN,DASSK,PATELBKETALBIODEGRADATIONOFBETACYFLUTHRINBYPSEUDOMONASSTUTZERISTRAINSLJBIOTECHNOLLETT,2005,271909232422张久刚,闫艳春微生物对拟除虫菊酯类农药残留的生物修复J生物技术通讯,2006,17061004100823李顺鹏,丁宪根甲基对硫磷降解菌的生态效应及应用J土壤学报,1996,33(4)38038424方玲降解有机氯农药的微生物菌株分离筛选及应用效果J应用生态学报,2000,11(2)24925225程国锋,李顺鹏,沈标,等微生物降解蔬菜残留农药研究J应用与环境生物学报,1998,4(1)8184