1、,化学药物原料药制备工艺申报资料的技术要求及案例分析李 眉中国医学科学院 医药生物技术研究所,（一）概 述,1、相关法规 药品注册管理办法（局令第28号） 正文：生产现场检查 附件2： 包括工艺流程和化学反应式、起始原料和有机溶媒、反应条件（温度、压力、时间、催化剂等）和操作步骤、精制方法、主要理化常数及阶段性的数据积累结果等，并注明投料量和收得率以及工艺过程中可能产生或引入的杂质或其他中间产物，尚应包括对工艺验证的资料。,法规相关要求的变化,现场检查前置确认生产工艺的可行性确认实际生产工艺与注册工艺一致,SFDA发布的指导原则: -化学药物原料药制备和结构确证研究的技术指导原则 -化学药仿制
2、药研究技术指导原则,过渡期品种集中审评工作方案,-国食药监办2008128号,2008年03月28日 发布,化学药品技术标准 多组分生化药技术标准 化学药品研究资料及图谱真实性问题判定标准 -（国食药监注2008271号 ） 2008年06月03日 发布,2、原料药的概念,指通过化学合成、半合成以及微生物发酵或天然产物分离获得的，经过一个或多个化学单元反应及其操作制成的, 用于制造药物制剂的活性成分，简称API（active pharmaceutical ingredient）。,3、原料药的管理,中国- 实行批文号管理，需注册申报。 需全套技术资料，与制剂同时申报（仿制药除外），符合要求的发
3、批件。,药品注册管理办法第二十五条规定- 单独申请注册药物制剂的，研究用原料药必须具有药品批准文号、进口药品注册证或者医药产品注册证，该原料药必须通过合法的途径获得。,附件2规定- 申请制剂的，应提供原料药的合法来源证明文件，包括： -原料药的批准证明文件 -药品质量标准 -检验报告 -原料药生产企业的三证（营业执照、药品生产许可证、药品生产质量管理规范认证证书） - 销售发票 - 供货协议,化学药品技术标准规定 - 基于该规定，对存在以下情况的注册申请将不予批准：a单独申请注册药物制剂，提供原料药虚假证明性文件的；申报生产时，原料药如系通过赠送途径获得而未能提供该原料药合法来源证明和供货协议
4、的；b单独申请注册药物制剂，在药品注册过程中，所用原料药的批准文号已被废止的，或原料药生产企业已被吊销药品生产许可证的；,c制剂所用原料药由相同申请人或不同申请人申报，原料药申请已因现场核查被撤回或退回，或因其他各种原因不予不批准或予以退审的；d所用原料药、辅料的质量控制不能保证药品安全性和有效性的。例如对于注射剂所用原辅料未按照“化学药品注射剂基本技术标准”、“已有国家标准药品研究技术指导原则”等相关要求进行充分研究，原料药和辅料的质量达不到注射用要求的。,国外-, 一般无批准文号，随制剂管理申报 制剂厂自产的原料药：与制剂资料一并申报 制剂厂外购的原料药：采用药品主卷（DMF，Drug M
5、aster File）模式 欧洲药典收载的原料药，审评通过后有批准文号 -“欧洲药典适用性证书”(Certificate of Suitability to Monographs of the European Pharmacopoeia，COS，或称CEP),国内原料药药学资料的要求, 资料7：药学综述资料 资料8：制备工艺的试验及文献资料 资料9：结构确证的试验及文献资料 资料10：质量研究的试验及文献资料 资料11：质量标准及起草说明 资料12：样品的检验报告 资料14：稳定性研究的试验及文献资料 资料15：内包材的选择依据及质标,国外对原料药技术资料的要求, ICH：CTDQ（国际：新
6、的化学实体） DMF（欧美：仿制的原料药） COS/CEP（欧洲：EP收载的原料药）,CTD药学综述,2.3.S.2 制备工艺： 生产厂的有关信息 生产过程简介（包括原材料、关键步骤、回收再 利用等）及保证质量一致性的日常质控措施 工艺流程图 论证关键工艺、过程控制及指标确定的合理性，并突出关键中间体的质控 工艺验证与评估 简述研发过程中工艺变更的情况，以及对质量一致性的影响,3.2.S.2 制备工艺资料,2.1 生产厂的信息2.2 详细的操作工艺和过程控制2.3 原材料质控2.4 关键步骤与关键中间体的控制2.5 工艺验证与评估2.6 制备工艺的研发过程,工艺过程的描述与过程控制： 合成路线
7、，包括起始原料、中间体、试剂、产物的分子式、化学结构（及立体结构）重量及收率。 按照操作顺序介绍整个制备工艺，包括代表工业化生产规模的原材料、溶剂、催化剂、试剂的投料量、关键步骤的确定、过程控制措施、生产设备情况及操作条件。 备选的工艺，也应如上述进行详细描述。 对回收再利用过程进行描述与合理性评估。,关键步骤与中间体的控制： 关键步骤：提供所有在此步骤中保证工艺可控的控制方法（工艺控制与质量控制）与指标（包括具体的实验数据及由此进行的评估结果）。 中间体：工艺过程中分离出来的中间体的质量及控制要求。, 保密部分 制备工艺：包括详细的操作方法、所有原材料及中间体的质量标准、每步反应的质控、终产
8、品的分离纯化。 公开部分 1、制备工艺主要包括合成路线及工艺流程图。 2、结构确证资料。 3、理化性质包括化学结构、分子式、分子量、熔点、溶解性、晶型及粒度分布等性质。,DMF技术部分的资料要求（1）,4、杂质说明产品中所有杂质的研究过 程，包括杂质的定性及定量方法。提供各 批次产品的实测结果。提供已知杂质的结 构。制订单个杂质及总杂质的限度。5、对照品对照品的制备及纯化方法、质 检报告。6、稳定性包括热、高湿、强光等影响因素试验，两批以上样品的长期留样实验。另外还应提供含测及降解产物检查方法的验证资料。,DMF技术部分的资料要求（2）,COS/CEP的资料要求（1）, 概述资料：名称、生产厂
9、、生产地址、上市历史（上市国及产品）、GMP状态及同意进行现场核查的声明、质量标准 化学及药学资料： 详细的生产工艺 生产过程（起始原料、重要中间体）的质控 分析方法的验证, 杂质 溶剂 两批产品的质检报告 其他技术要求（粒度、晶型等） 无菌、细菌内毒素（热原） 稳定性（明确有效期、包装材料及贮存条件） COS证书的附件：非EP药典杂质及溶剂（与工艺相关）的限度,COS/CEP的资料要求（2）,ICH 、FDA 都将原料药生产工艺的起始原料作为GMP要求的起点 但起始原料之前的生产和加工过程可以不受GMP要求的约束。,在起始原料的选择和质控上- FDA要求申请人应当充分考虑如何降低上市后起始原
10、料质量变化可能带来的风险， 所谓的质量变化包括: - 起始原料的结构（组成）、 - 杂质概况、 - 含量（效价） - 其它 可能影响制剂行为的质量属性的变化。,作为选择起始原料的依据，申请人应当提供充分的生产过程信息，以供FDA对原料药的质量和安全性进行技术评价。,目前,SFDA:研究探索适应中国的DMF制度 起草-药用原辅材料备案管理规定及其相关附件,我国药品DMF制度的构想,围绕技术审评，以CDE审评系统为基础平台，逐步建立、推广和完善我国的DMF系统。基本框架、管理方式和国际通用模式一致：自愿报送原则分为公开和非公开部分原则不单独进行实质审查和批准的原则按照CTD内容准备资料原则持有者授
11、权使用原则变更控制的原则,我国药品DMF制度的基本内容,范围：包括原料药、中药提取物、药用辅料、直接接触药品的包装材料和容器。程序：按照要求提交符合CTD格式技术资料的过程。管理：CDE具体维护、操作和使用，并以相关技术指导原则规范具体品种范围的技术资料提交。使用：药品的技术审评和生产检查，制剂厂选择供应商。,中国药品注册通用技术文件,2010年5月5日发布了关于对CTD格式申报资料征求意见的函（食药监注函201086号）2010年9月30日正式发布化学药品CTD格式申报资料撰写要求 （国食药监注2010387号）,有关事项的通知:,一、药品注册管理办法附件2化学药品注册分类3、4、5和6的生
12、产注册申请的药学部分申报资料，可参照印发的CTD格式整理提交，同时提交电子版。申请临床试验阶段的药学资料，暂不按CTD格式提交资料。二、药品注册管理办法附件2化学药品注册分类1和2的临床试验申请和生产注册申请的药学资料，暂不按CTD格式提交资料。三、为鼓励CTD格式提交申报资料，并稳步推进该项工作，目前拟采取以下方式。（一）按药品注册管理办法附件2申报资料要求提交的生产注册申请申报资料仍予接收。（二）技术审评部门将对提交CTD格式申报资料的注册申请单独按序进行审评。,化学药品CTD格式申报资料撰写要求,CTD格式申报主要研究信息汇总表（原料药）CTD格式申报主要研究信息汇总表（制剂）CTD格式
13、申报资料撰写要求（原料药）CTD格式申报资料撰写要求（制剂）,（二）原料药制备工艺研究的主要内容及评价要点,确定目标化合物设计合成路线制备目标化合物结构确证工艺优化中试放大研究、工业化生产,研究的一般过程,需关注的重点问题,1. 合成路线的选择与设计要有依据； 2. 起始原料、试剂和有机溶剂要有标准; 3. 合成中间过程要进行控制; 4 工艺的研究要强调放大与验证;,关注之一:合成路线的选择与设计要有依据强调：合理性,新的化学实体, 根据其结构特征，综合考虑： a. 起始原料获得的难易程度; b. 合成步骤的长短; c. 收率的高低; d. 反应的后处理、反应条件是否符合工业生产、环保要求;
14、确定合理的合成路线。 根据国内外对类似结构化合物的文献报道，进行综合分析，确定适宜的合成方法。,结构已知的药物,通过文献调研，对该药物制备的研究情况有一个全面的了解，重点关注：a. 可行性（原材料是否易得，反应条件是否能工业化）b. 可控性（反应条件是否温和、易控）c. 稳定性（中间体质量是否可控、终产品质量和收率是否稳定）d. 先进性（所采用路线与文献路线比较的先进性）e. 合理性（成本及原料、试剂、溶剂的价格和毒性等）,实例. 克霉唑（邻氯代三苯甲基咪唑）,此法合成的克霉唑的质量较好；但是这条工艺路线中应用了Grignard试剂，需要严格的无水操作，原辅材料和溶剂质量要求严格，且溶剂乙醚易
15、燃、易爆，工艺设备上须有相应的安全措施，而使生产受到限制。,FriedelCrafts反应,线路2,此法合成路线较短，原辅材料来源方便，收率也较高。但是这条工艺路线有一些缺点：要用邻氯甲苯进行氯化制得。这一步反应要引进三个氯原子，反应温度较高，且反应时间长，并有未反应的氯气逸出，不易吸收完全。以致带来环境污染和设备腐蚀等问题。,线路3,本路线以邻氯苯甲酸为起始原料，经过两步氯化，两步FriedelCrafts反应来合成关键中间体25。尽管此路线长，但是实践证明：不仅原辅材料易得，反应条件温和，各步产率较高，成本也较低，而且没有上述氯化反应的缺点，更适合于工业化生产。,氯化1,氯化2,Fried
16、elCrafts,FriedelCrafts,实例2. 头孢类3异构体,7-ACA母环结构如下：,头孢吡肟合成过程中产生3异构体的可能机制,产生3异构体的途径-,途径之一: 由起始原料中引入的 措施 -加强对起始原料质量控制,对异构体制订严格的内控指标途径之二: 由合成过程中引入的 措施 -在选择适宜的工艺路线和反应条件上下工夫,尽可能降低异构体的比例,工艺路线的选择: 选择一:先7位酰化,后3位取代 7-ACA环内的双键发生重排,由2 3 高达30% 选择二:先3位取代,后7位酰化, 并使用二苯甲基作为2位羰基或7位氨基的保护基 可大大降低终产物中3,反应条件的选择 选择一.使用TMSI 作
17、为C3位乙酰氧基离去反应试剂 可控制3异构体的含量 选择二.使用FreonTF 作为反应溶剂 由于2异构体在该溶剂中溶解度很低,在反应过程中一旦生成2异构体,立即从溶剂中沉淀析出,使反应向2异构化转移,大大降低了生成3异构体的可能性,关注之二:起始原料、试剂和有机溶剂要有标准强调：规范性,(1) 起始原料的一般要求,化学名称、组成和结构明确 API的关键结构组件有商业来源理化性质明确，稳定性满足工艺的要求有公认的制备方法可查，质量可控越接近API的起始原料质控应当越严格,GMP的要求：从源头控制产品的质量对于合成产品- a.物料的清单：列出原料药生产工艺中使用的材料（如原材料、起始材料、溶剂、
18、试剂、催化剂）名称，说明各自的使用工序。确认关键物料； b.物料的检测方法：阐明这些物料的质量控制信息； c.关键物料供应商COA：质量标准和检验报告书；,以动、植物或其组织器官为原材料的- 提供原材料科属种、产地、采集季节、采集物保存条件等，并提供其质量要求 生物合成的抗生素- 提供菌种科属种和培养基的组成,美国FDA关于原料药制备工艺指导原则,起始原料的控制程序： 应将起始原料列表，提供可接受的包括鉴别、定量及纯度在内的质量标准。分析方法应简单叙述。 当杂质可能带入原料药时，应提供其纯度的控制（如用色谱法对杂质定性或定量）。,实例1. 采用不稳定,易降解的起始原料,头孢类抗生素起始原料:
19、7-ACA,由7-ACA引入最终产物的杂质包括: 合成杂质 残留溶剂 聚合物 异构体 降解产物等,7ACA “开环”过程,在头孢类抗生素合成工艺中要使用7ACA作起始原料时，首先要掌握这类-内酰胺抗生素降解物的规律，对它们可能引入的杂质，即：开环物进行相关的研究工作，并制订质量控制的方法。,实例2. 采用毒性较大的起始原料,丙泊酚（Propofol） 化学名称为2, 6-二异丙酚 烷基酚类静脉用全麻药 合成工艺-,苯酚毒性较大 ,其中可能含有二苯酚、三苯酚等多种杂质 毒理学简介 大鼠经口LD50: 317 mg/kg；吸入LC50: 316 mg/m3。小鼠经口LD50: 270 mg/kg；
20、吸入LC50: 177 mg/m3。兔经皮LD50: 630 mg/kg。 人口服致死量报道不一，LD为215g，或MLD为140mg/kg，14g/kg。国外报道酚液污染皮肤面积为25%，10分钟死亡，血酚为0.74mmlo/L。 低浓度酚能使蛋白变性，高浓度能使蛋白沉淀。对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用，也可抑制中枢神经系统或损害肝、肾功。 若以苯酚为起始原料，应严格控制其杂质的限量，建立相应的内控标准。,实例3. 采用特殊的起始原料,羟乙基淀粉系列产品(羟乙基淀粉200/0.5、130/0.4原料药及制剂 ) 原料药: 制备工艺- 以支链玉米淀粉为起始原料，经过水解、羟乙基化、精制制得,起始
21、原料的控制： 对玉米淀粉的来源和质量均应关注。建议通过比较完善的供应商审计工作，确定玉米淀粉的供应商，并尽量固定供应商。 建议关注: -农药残留情况 -重金属情况 -支化度情况（建议控制在95%以上）， 应在国家标准基础上制定起始原料玉米淀粉的内控质量标准。,实例4.采用专用中间体为起始原料,专用中间体-外购的化工产品 a. 将原批准工艺的前面步骤转到联营企业，由联营企业按原工艺制得粗品或最后一步中间体后，再由申报单位通过精制或一两步反应制得成品； b. 购买其他公司按化工产品生产的中间体，再由申报单位按后续工艺完成原料药的制备； c. 委托其他企业生产中间体，再由申报单位按后续工艺完成原料药
22、的制备。,美国FDA要求,要用这样的化合物进行原料药的合成，必须以药品主卷（DMF）的形式，提供其质量控制数据、杂质种类及含量等信息。,化学药物原料药制备技术指导原则,关注： 外购中间体的合成路线（包括反应试剂、溶剂、温度、纯化方法等）和原工艺中该中间体的合成路线是否一致。 直接关系到工艺变更前后中间体的质量（如杂质的种类/个数、杂质的含量、残留有机溶剂的种类等）是否一致，而这些因素都可能直接影响到终产品的质量，也会关系到质量研究中项目设置及方法学研究验证等工作的合理性。,第一.如果外购中间体的合成路线与原工艺路线一致: a)首先予以明确，外购中间体合成路线与原工艺路线的一致性； b)说明该中
23、间体的生产单位。,第二.如果外购中间体合成路线与原中间体工艺路线不一致，需要进行全面的研究验证工作: a) 说明现中间体的详细工艺路线和制备方法; b) 对变更前后终产品应进行质量对比研究。如果研究发现所购中间体和原合成中间体在杂质种类、含量等方面有差异，对原质量研究中的分析方法需重新验证，如有关物质检查方法的适用性问题； C) 如果外购中间体工艺使用了新的有毒溶剂，还应提供此类溶剂残留情况的研究资料。 D) 对杂质方面的差异可能对药品稳定性产生的影响进行认真分析，并提供相应的研究资料。,第三.应根据外购中间体的工艺制订完善的质量标准，在进货时进行检验。 在生产中应固定所购中间体的供货来源（即
24、供货单位），以保证质量的一致性 。在签定供货合同时，应规定供货方在变更工艺时需及时告知，以便修订中间体的质量标准。,对原料药合成路线长短的相关要求,FDA认为- 在制备工艺中，拟定的起始原料应当与原料药的最后中间体间隔多步反应； 并且，在间隔的反应中应当有分离纯化的中间体。 这样可以有效降低由于起始原料之前的制备工艺变更可能对原料药质量带来的负面影响。,应当注意- 一个反应可能包括多个纯化步骤，但应当视为一步反应。 如果工艺中对最后中间体进行分离纯化处理，那么合成最后中间体的反应可以看作一步反应，而游离酸（或游离碱）与盐之间的相互转化则不应看作一步反应。,欧盟要求- 至少有一步化学反应（不包括
25、成盐或精制）是在申报的企业生产， 并且要在起始原料中确定一个关键原料，该原料也应在符合GMP条件的车间进行生产。,化学药品技术标准规定-,对于未按照上述原则开展相关研究工作，且未做出合理说明并提供科学合理依据的下列注册申请，经专家审评会议讨论确认后将不予批准： -采用市售原料药粗品精制制备原料药 -采用市售游离酸/碱经一步成盐、精制制备原料药 且未提供充分、详细的粗品或游离酸/碱生产工艺和过程控制资料的,特别注意: 对于合成步骤较少，所用起始原料的结构复杂、合成和质控难度大的品种- 应提供充分、详细的起始原料生产工艺和过程控制资料。,例1. 帕米膦酸二钠,存在问题： 本品采用帕米膦酸为起始原料
26、经一步成盐制备，所用起始原料为化工产品，且未提供充分详细的该起始原料的生产工艺和过程控制资料、质量标准等，无法判断该起始原料生产工艺是否可行、可控，也无法评价该起始原料的质量控制情况以及对本品质量的影响。,例2. 酒石酸长春瑞滨,合成路线： 长春瑞滨碱与酒石酸成盐得成品。有关起始原料的资料 提供了简单的制备工艺、购货发票及供应商的检验报告书，补充资料提供了长春瑞滨碱的内控标准，检验项目包括 性状、水分、含量测定。（无有关物质）存在的问题： 未提供长春瑞滨碱的全部和详细的制备工艺，未提供各步反应的质量控制方法，未根据长春瑞滨碱的制备工艺制定有效的质量控制（尤其是有关物质）方法，无法有效保证终产品
27、的质量。,例3. 盐酸多塞平,存在问题： 本品合成路线较短，所用起始原料“羟基物”系化工产品，未提供该起始原料的生产工艺和生产过程控制资料，质量标准等。无法评价该起始原料的质量控制情况以及对本品质量的影响。,实例5:采用手性化合物为起始原料,手性化合药的特殊点: 在研究与制备过程中需要随时关注与控制其光学纯度.,实例. 维库溴铵,起始原料A引入6个手性中心，合成过程中引入4个手性中心: -其中生成B的反应中引入3个手性中心 -生成C的反应中引入1个手性中心 可以通过对起始原料A和合成过程中引入手性中心的步骤的控制，实现对维库溴铵构型的控制。,（2）溶剂、试剂的选择原则:,应选择毒性较低的试剂；
28、 有机溶剂的选择一般应避免使用一类溶剂，控制使用二类溶剂； 应对所用试剂、溶剂的毒性情况进行说明，以便于在生产过程中加以控制。,（3）内控标准的制订,在药物的制备工艺中，由于起始原料和反应试剂可能存在着某些杂质，若在反应过程中无法将其去除或者参与了副反应，对终产品的质量有一定的影响，因此需要对其进行控制，制定相应的内控标准。 一般要求对产品质量有一定影响的起始原料、试剂制订内控标准，同时还应注意在工艺优化和中试放大过程中起始原料和重要试剂规格的改变对产品质量的影响。,内控标准应重点考虑以下几个方面, 对名称、化学结构、理化性质要有清楚的描述； 要有具体的来源，包括生产厂家和简单的制备工艺； 提
29、供证明其含量的数据，对所含杂质情况（包含有毒溶剂）进行定量或定性的描述； 如需要采用起始原料或试剂进行特殊反应，对其质量应有特殊要求； 对于不符合内控标准的起始原料或试剂，应对其精制方法进行研究；,关注之三:制备工艺的全过程要进行监控强调：可控性,工艺过程的监控- 对关键中间体的质量控制 - 对重要工艺条件和工艺参数的选择、优化和控制 - 对工艺杂质的分析和控制,（1）对关键中间体的质量控制,提供的资料应能够表明如何通过研究确定了关键中间体、一般中间体，如何通过对中间体的不同控制实现过程控制，从而更好的保证终产品的质量 包括中间体的纯化方法、内控质量标准、检验结果、对杂质谱的分析,FDA对于主
30、要中间体的归纳,枢纽中间体：可由不同方法合成的中间体; 关键中间体：通常是分子中重要部分第一次形成的中间体。如：具有立体异构的分子第一次引入手性原子的中间体; 最终中间体：原料药合成最终反应的前一步;,实例1. 恩替卡韦,终产品中存在3个手性中心- 需要结合工艺中的过程控制来综合控制终产品的光学纯度，对引入手性中心后的关键中间体1S-（1,2,3,4)-l-2-氨基-6-（苯基甲氧基）-9H-嘌呤-6-基-4-（二甲基苯基甲硅烷基）-2-羟基-2,3-环戊烷二甲醇 中的立体异构体杂质进行检测，监测并控制外消旋化的可能性。,实例2.毛茛科植物XXXX,涉及动植物提取的化学原料药审评要点 : 动植
31、物原材料的来源及质量控制 提取工艺研究及过程控制,粉碎工艺路线及参数的研究 - 确定粉碎的方法混合粉碎还是单独确定粉碎的设备 - 确定粉碎的程度使用药典筛号粉末细度采用特殊方法-微粉化,提取工艺参数的研究,正交实验法,正交试验因素水平表,不同净化方法的比较,离心与醇沉不同工艺路线的比较,浓缩程度对转移率的影响,（2）对工艺条件和工艺参数的选择、优化和控制,a. 工艺操作步骤的描述应详细； b. 工艺条件, 如：反应装置、温度、压 力、时间、溶剂、pH值、光照等的控制应严格； c. 反应终点（ 提示原料转化为目的生成物的程度、杂质的生成情况等）的判断应明确；,工艺流程图生产过程描述过程控制方法,
32、详细、翔实的制备工艺资料的要求,工艺流程图,化学反应和分离纯化步骤起始原料和关键中间体及副产物的化学结构各步骤所用的溶剂、催化剂或其它助剂各步骤的操作参数（温度、pH、压力等）中间体进入下一工序的处理方法（分离或原位）各步骤的产率,生产过程描述,所有反应物的化学名称、结构式和用量各步骤所用的溶剂、试剂、催化剂和其它助剂主要反应设备（关键设备的构造和材质）关键工序和操作的详细说明过程控制方法和控制参数（监测项目、参数范围或接受标准）各步反应或操作的产率批量规模及用途,过程控制方法,生产工艺的可调节参数（温度、压力、pH、搅拌速度）环境控制（温度、湿度、清洁级别等）反应进程监测（如反应物消耗和产物
33、生产的浓度监测）关键中间体的检验,(3)杂质的分析与控制,目的和意义原料药制备过程中产生的杂质是原料药杂质的主要来源；通过对工艺过程产生的杂质进行详细的研究、分析，为质量研究提供十分有用的信息。,原料药的杂质谱 -原料药中该药物实体之外的任何成分：各种无机杂质 来源： 工艺设备、管路的表面材料的脱落和浸出。 各个反应起始物和中间体引入 不洁净的空间和包装材料引入各种有机杂质 来源： 各个反应起始物和中间体引入（包括有机残留溶剂） 工艺合成的副产物 降解物 -因为时间或反应引起的药物分子的化学改变生成的杂质。 -光照、温度、酸、碱、氧化或还原、水分、或者与辅料、容器接触反应产生的物质 与包装材料
34、产生的反应物,实例 .,从杂质分析入手，强化异烟肼原料药生产过程控制的基本思路 异烟肼 一线抗结核药物。列入WHO预认证项目目录。 其原料药收载于CP、BP/EP 、 USP等国际药典中。,关注之一: 工艺杂质分析,(1)起始原料引入的杂质 -未反应完的4-甲基吡啶 -混杂在4-甲基吡啶中的3-甲基吡啶 -氨氧化产生的3-氰基吡啶,(2)水解反应步骤产生的杂质 -未反应完的起始原料: 4-氰基吡啶 -反应副产物: 异烟酸 - 3-氰基吡啶水解产生: 烟酰胺,(3)缩合反应步骤产生的杂质,-异烟酰胺水解产生: 异烟酸-未反应的中间体: 异烟酰胺-反应试剂: 水合肼-烟酰胺和水合肼发生缩合反应产生
35、: 3-吡啶甲酰肼,关注之二: 降解产物分析,(1)水解、氧化条件下，异烟肼降解生成: -异烟酸 -异烟酰胺 -肼 (2)光照后产生的降解产物: - N，-(4-吡啶羰基)异烟肼 - 亚乙基异烟肼 - 4-吡啶亚甲基异烟肼,落脚点: 加强制备全过程的控制,(一) 起始原料的杂质控制 (1)严格制订起始原料的质量标准 重点控制可能引入的杂质: 4-甲基吡啶、3-甲基吡啶、3-氰基吡啶 (2) 注意后续生产过程中对以上杂质及其转化产物的控制,(二) 生产过程的控制 (1)对关键工艺步骤的工艺参数进行控制 关键工艺步骤-水解、缩合 重要工艺参数-反应温度、反应时间 (2)对关键中间体的质量进行控制
36、关键中间体-异烟酰胺 重点:异烟酸、 4-氰基吡啶,(三) 终产品的杂质控制 重点: 游离肼-TLC法(CP、EP/BP) 异烟酰胺 异烟酸 光降解产物: N，-(4-吡啶羰基)异烟肼异烟酸、异烟酰胺应作为已知杂质进行控制,HPLC法,生化药物工艺研究中应注意的问题,实例：多组分生化药-依诺肝素钠,依诺肝素钠是一种低分子肝素钠盐，它通过对猪肠粘膜肝素的苄基酯衍生物进行碱解聚而获得。 制备工艺- 猪肠粘膜肝素肝素季铵盐肝素苄酯碱解聚 酸中和醇沉淀精制脱色脱水干燥成品,增加: 起始原料来源和质量的控制,应严格按照多组分生化药注射剂技术审评基本要求，从动物源头开始: - 控制源头（原材料），包括动物
37、的种属、健康状况、饲养环境（封闭饲养）、年龄、采集时间和采集方法等 - 制订原材料的质量标准 严格进行全过程的研究和控制，以保证最终产品的质量。,强化: 工艺过程研究和优化,作为大分子多组分混和物类仿制药，在起始原料来源和质量控制之后，经过优化筛选的、固定的工艺过程也是产品质量恒定的决定性因素。所以本品的工艺研究和验证必须到位, 并以最优的方式固化生产过程,1）应对本品的生产路线、工艺参数等的选择提供充分的文献依据与试验依据，与文献不同的独创之处应重点详细说明并提供相关的研究数据。 2）应提供详细完整的工艺描述，包括主要的生产设备。,3）对于生产路线中各步反应条件、物料配比、中间体、副产物、残
38、留试剂的研究和过程控制等应有尽可能详细的摸索筛选，提供有效的监控方法与合理的质控指标，确定工艺关键步骤并提供工艺参数控制范围。 工艺关键点: -肝素季铵盐制备时, 铵盐试剂的选择及投料量配比; -肝素苄酯的制备中酯化程度的控制等，可通过测定肝素苄酯或酯化产生的苯甲醇的含量来进行监控等; - 解聚的力度控制. 确定解聚用碱浓度、温度、时间、物料比的范围和要求，以便监控产品的分子量及其分布、末端结构和生物活性的变化; -精制、脱色的方法选择，程度的控制等;,重视: 质量的控制和管理,应与原研药进行全面的质量对比研究。对比最好在同实验室进行同时同法比较。 也可通过考察3批仿制品的质量，然后与EP7.
39、0标准对比来确定仿制品与被仿品的质量一致性。,质量研究应全面规范，应符合相关技术要求。 研究考察的范围除EP7.0已有的依诺肝素钠质量标准所涉及的范围外，还应结合申报的工艺对相应的残留溶剂、残留试剂、关键中间体、副产物等潜在杂质进行研究。,重点-杂质研究 包括各种条件强制降解试验。 鉴于本品为多组分混合物，组分比例的恒定性是保证多组分混合物药物有效性与安全性恒定的前提，故建议进行组分组成相似度的研究与控制。 选择的分析方法均应按中国药典2010年版二部附录“药品质量标准分析方法验证指导原则”要求分别进行定性、限度或定量分析的方法学验证。,注意:两个重要的质控指标 -分子量与分子量分布 -抗a因
40、子与抗a因子活性测定 应采用EP7.0已收载的方法，并参照生物制品质量控制分析方法验证技术一般原则进行方法学验证 包括-线性、范围、重现性、精密度、耐用性等考察 测定使用的标准品应与被仿制的依诺肝素钠具有同质性。,安全性研究: -过敏物质 -降压物质 -异常毒性等 注意: 因不同动物的敏感度不同，异常毒性试验应选取小鼠和豚鼠两种动物进行。,生化药物制备工艺控制的核心- 全程控制 即：从源头到终产品， 工艺过程控制与质量控制相结合。,微生物来源的化学药物工艺研究中应注意的问题,源头控制: 生产菌种 (1) 菌种来源、诱变、选育 诱变和筛选的手段; 诱变剂的诱变处理; 菌株传代的稳定性 (2) 菌
41、种的特征鉴别、保藏: 形态特征、培养特征、生理生化特征、细胞壁化学成分 判断生产菌株的种属，明确菌株的各方面特征,过程控制: (1) 发酵 培养基组成、温度、时间、质控方法，接种量等工艺参数; 代谢曲线; 最终发酵罐放罐控制参数等 (2) 提取 发酵液的预处理、提取工艺的详细过程，重点关注工艺过程除去发酵液中杂质的能力以及可能对主药质量产生的影响。 (3) 精制 主要中间体(滤液、解析液、脱色液、浓缩液、结晶液)的质量标准及检测方法,植物提取药在制备工艺中应注意的问题,涉及动植物提取的化学原料药审评要点 : 动植物原材料的来源及质量控制 提取工艺研究及过程控制,植物提取药: 一般指从植物中提取
42、得到的化学单体，如葛根素、山莨菪碱、秋水仙碱等。,应注意以下问题: a. 起始原药材的质量要符合药用标准; b. 工艺参数: 包括详细的溶剂用量、提取和萃取的次数、精制方法等, 以保证仿制产品质量批间的一致性; c. 由于提取和萃取用到了许多有机溶剂，如果采用粗品一步精制得到终产品的工艺，则需要提供粗品的制备工艺，以判断与质量相关的指标是否需订入标准，如残留溶剂等。另外为保证最终产品质量的可控性，还需要提供粗品的内控标准，对主成分、其他成分的含量做出明确的规定。,例如: 苦参总碱（提取）,* 本品提取工艺直接套用文献工艺，没有提供工艺条件和参数的考察与优化研究资料，无法评价所用工艺的合理性。
43、* 本品为多组分混合物，未进行充分研究以说明本品组分组成及含量与已上市同品种的一致 性。同时，本品纯度较低，未对除苦参碱及氧化苦参碱外的其他不明成分进行研究和控制。 * 稳定性研究中未对降解产物进行考察，研究结果不能充分反映药品的稳定性。,关注之四: 工艺的研究要强调放大与验证 强调：工艺验证,工艺研究的一般过程,包括: 实验室规模的工艺研究与优化、中试放大、生产规模的工艺验证小试 特点: 规模小(实验室)、研究较全面、深入 目的: 了解影响产品质量的关键环节(步骤与因素) 、形成初步完整的工艺、为其他研究服务,中试放大 特点: 模拟大生产(中试车间)、批量与产生规模相关(1/10) 目的:
44、研究如何在模拟的工业化条件下实施小试工艺(各单元操作的控制点与参数范围) 、提供足量样品工艺验证 特点: 生产规模(生产厂) 、至少应连续三批 目的: 考察大生产的重现性与可行性、形成书面证据、为生产出质量恒定的药品服务,(1) 工艺研究强调一定的规模,化学药品技术标准规定- 由于原料药的生产规模变化可能导致设备、工艺条件、操作参数等的变化，并可能导致原料药质量（例如杂质、晶型等）的变化，因此，原料药的制备工艺研究应在一定制备规模下开展，所取得的研究数据（包括工艺条件、工艺参数、起始原料和中间体的质量控制要求等）应能直接用于或指导原料药的工业化生产，用于质量研究、稳定性研究的样品的质量也应能代表工业化生产产品的质量。,
