1、深部真菌的感染特点及耐药分析摘要 目的 了解深部真茵感染的临床分布特点及耐药情况，以指导临床合理应用抗真菌药物。 方法 收集我院临床患者深部的标本(痰液、尿液、粪便、血液、脑脊液、生殖道分泌物、创口分泌物)共 426 份，接种到沙保弱培养基和显色培养基鉴定菌株。将分纯的菌种接种梅里埃公司生产的 ATB Fungus 2 真菌药敏板条，用 ATB Expression 鉴定仪读取最小抑菌浓度(MIC)，得出临床常见真菌对抗真菌药物的药敏结果。 结果 发生深部真菌感染 167 例，感染真菌标本以痰液检出率最高为 63.5%，其次为尿液占15.6%。167 株真菌中，假丝酵母菌属感染有 160 株，
2、其中以白假丝酵母菌为主（67.1%，112/167） 。科室分布中，干诊科感染率最高，为 41.9%；其次为呼吸科，占26.3%。60 岁老年患者有 123 例，占 73.6%。假丝酵母菌属对伏立康唑和伊曲康唑的耐药率较高，分别为 75.05%和51.10%，对 5-氟胞嘧啶和两性霉素 B 耐药率较低，分别为2.20%和 2.90%。 结论 老年患者容易患深部真菌感染，感染部位主要为呼吸道，假丝酵母菌属为主要病原菌，其中以白假丝酵母菌感染率最高；两性霉素 B、氯康唑和 5-氟胞嘧啶耐药率最低，氟立康唑和伊曲康唑的耐药率最高。 关键词 深部真菌感染；临床分布特点；耐药性；抗真菌药物 中图分类号
3、R379文献标识码 B文章编号 2095-0616（2014）08-52-04 An analysis of characteristics and drug resistance of deep fungal infection ZHAOHui1WANGQun1ZHAOBing1WANGNing2XUEHong1 1.Department of Clinical Laboratory, the Second Affiliated Hospital of Shenyang Medical College,Shenyang 110001,China; 2.Department of Clinic
4、al Laboratory, Affiliated Central Hospital of Shenyang Medical College,Shenyang 110024,China Abstract Objective To understand the characteristics of clinical distribution and drug resistance of deep fungal infection,so as to guide appropriate clinical application of antifungal drugs. Methods 426 dee
5、p samples (sputum,urine,excrement,blood,cerebrospinal fluid, genital secretions and wound secretions) from clinical patients in our hospital were collected and cultured in Sabourands medium and chromogenic media used to identify bacterial strains.The isolated strains were then cultured in an antifun
6、gal susceptibility strip of ATB Fungus 2 produced by the bioMrieux Group, and minimum inhibitory concentration was obtained via an identification instrument of ATB Expression. The drug susceptibility regarding clinically commonly seen fungus against antifungal drugs was obtained. Results 167 deep fu
7、ngal infections were detected.The detection rate of infected fungal samples in sputum was 63.5%, the highest one.The second highest rate was in urine, accounting for 15.6%.Among 167 strains of fungus, 160 strains belonged to Candida infection, in which the majority was Candida albicans(67.1%,112/167
8、).In departments, the highest infection rate of 41.9% was seen in the department of elderly officials;the second infection rate of 26.3% was seen in the department of pneumology.123 patients were older then 60 years of age,accounting for 73.6%.The drug resistance of genus Candida was relatively high
9、 against voriconazole and itraconazole,accounting for 75.05% and 51.10% respectively.Its drug resistance was relatively low against 5-fluorocytosine and amphotericin B, accounting for 2.20% and 2.90% respectively. Conclusion Elderly patients tend to be infected with deep fungus,and the main infected
10、 position is respiratory tract. Genus Candida is the main pathogen, in which Candida albicans has the highest infection rate;amphotericin B,cloconazole and 5-fluorocytosine have the lowest drug resistance rate,while voriconazole and itraconazole have the highest drug resistance rate. Key words Deep
11、fungal infection;Characteristics of clinical distribution;Drug resistance;Antifungal drugs 由于免疫受损群体的不断增多，真菌引起的感染日渐突出，已成为全球卫生机构共同关注的问题1， 国内外许多研究表明：目前真菌感染的患病率呈急剧上升的趋势，如果在早期不能获得实验室的阳性报告，临床医生用药正确率相对较低。提高真菌诊断水平及对症用药已成为医疗领域共同关心的一个热点问题，特别是当前临床感染真菌的耐药株不断出现，常导致手术治疗失败、并发症增多、感染复发、住院时间延长、昂贵的治疗药物的使用增加等严重后果2。微生物工
12、作者的任务之一是为临床提供准确的真菌检测的药敏监测数据，并进行综合分析。 1资料与方法 1.1一般资料 选择 2012 年 5 月2013 年 5 月间我院各科室住院患者的痰液、血液、尿液、粪便、脑脊液、生殖道分泌物、创口分泌物等送检标本 426 份，共检出真菌 167 株（39.4%） 。1.2方法 1.2.1试剂与设备 ATB Expression 半自动微生物鉴定/药敏分析仪，FUNGUS 2 药敏板条均为法国生物梅里埃公司产品，沙保弱琼脂培养基，CHROMagar Candida 显色培养基，由法国科玛嘉公司生产。 1.2.2分离培养及菌种的鉴定方法 严格按照操作规程收集各类标本，将标
13、本接种在沙保弱培养基上，37温箱孵育 2448h 观察结果，若培养出真菌样菌落，涂片革兰染色镜检为酵母样真菌后，挑取菌落接种于CHROMagar Candida 显色培养基上，37温箱培养2448h 观察结果。显绿色为白假丝酵母菌，显紫色为光滑假丝酵母菌，蓝色为热带假丝酵母菌，粉色为克柔假丝酵母菌。 1.2.3药敏试验方法 药敏试验采用法国生物梅里埃公司生产的 ATB Fungus 2 真菌药敏板条，该法为微量稀释法，用 ATB Expression 鉴定仪读取最小抑菌浓度（MIC ） ，得出临床常见真菌对 5 种抗真菌药物 5-氟胞嘧啶、两性霉素 B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑进行药敏试验，
14、严格按照说明书操作和判定结果。 1.3统计学方法 运用 WHONET5.5 软件进行统计分析，计数资料以构成比方式表示。 2结果 2.1标本来源分布 检出的深部真菌感染共 167 例，其中临床痰标本真菌检出率所占比例最高，占 63.5%，其次为尿液标本，真菌检出率为 15.6%。见表 1。 表 1医院深部真菌感染标本分布构成比 标本 株数 构成比（%） 痰液 106 63.5 尿液 26 15.6 粪便 13 7.8 血液 11 6.6 脑脊液 7 4.2 生殖道分泌物 3 1.8 创口分泌物 1 0.6 2.2医院深部真菌感染构成比 分离的 167 株深部真菌中，假丝酵母菌有 160 株，其
15、中白假丝酵母菌有 112 株，占 67.1%（112/167） ，其次为光滑假丝酵母菌，有 24 株，占 14.4%。见表 2。 表 2医院深部真菌感染常见菌株分布构成比 病原菌种类 菌株数 构成比（%） 白假丝酵母菌 112 67.1 光滑假丝酵母菌 24 14.4 热带假丝酵母菌 13 7.8 近平滑假丝酵母菌 11 6.6 曲霉菌 4 2.4 毛霉菌 2 1.2 新型隐球酵母菌 1 0.6 2.3医院深部真菌菌株科室分布 科室分布中，干诊科感染率最高，为 41.9%；其次为呼吸科，占 26.3%。见表 3。 表 3167 株深部真菌的临床科室分布 科室名称 菌株数 构成比（%） 干诊科
16、70 41.9 呼吸科 44 26.3 内分泌科 18 10.8 神经内科 14 8.4 神经外科 10 6.0 泌尿内科 8 4.8 消化科 3 1.8 2.4医院深部真菌在不同年龄段的分布情况 167 株深部真菌感染标本中，60 岁老年患者有 123例，占 73.6%。见表 4。 表 5不同菌对 5 种抗真菌药物的耐药性（%） 病原菌种类 两性霉素 B 伏立康唑 5-氟胞嘧啶 氟康唑 伊曲康唑 白假丝酵母菌 1.80 25.6 2.12 1.70 12.50 近平滑假丝酵母菌 0 0 0 0 0 热带假丝酵母菌 0.70 39.67 0.00 10.10 26.30 光滑假丝酵母菌 0.4
17、0 9.78 0.08 10.30 12.30 合计 2.90 75.05 2.20 22.10 51.10 表 4167 株深部真菌在不同年龄段的分布 年龄段（岁） 菌株数 构成比（%） 2030 5 2.9 3140 7 4.3 4150 13 7.9 5160 19 11.3 6170 76 45.5 71 47 28.1 2.5假丝酵母菌对 5 种抗真菌药物的耐药性 5 种假丝酵母菌对伏立康唑和伊曲康唑的耐药率较高，分别为 75.05%和 51.10%，对 5-氟胞嘧啶和两性霉素 B 耐药率较低，分别为 2.20%和 2.90%。见表 5。 3讨论 近年来，深部真菌感染在医院内感染占重
18、要地位，且发病率逐年升高。是由于广谱抗生素、激素、免疫抑制剂的广泛应用3；导管插管、器官移植和导管介入技术以及静脉高营养等现代治疗手段的普遍开展；临床严重疾病，如艾滋病、糖尿病、肿瘤、血液病、老年性疾病等发病率的不断上升4-5。 本调查结果表明，医院深部真菌感染的标本主要分布在干诊科和呼吸科分别占 41.9%，26.3%。60 岁老人 123例，占 73.6%。主要原因是老年人免疫功能低下，抵抗力差，增加了真菌感染的机会。老龄化、基础疾病等导致的免疫力低下、侵入性操作等都是深部真菌感染的危险因素。长期使用抗生素，并且随着老年人年龄的增大，咳嗽反射差，支气管腺体增生，分泌物增多，黏膜纤毛清除功能降低，痰不易咳出，使上呼吸道病菌向下呼吸道蔓延，易造成真菌感染6-7。 深部真菌感染的标本主要来自痰液和尿液分别占63.5%，15.6%。因此，对呼吸道和泌尿道应加强真菌感染的监测。在分离的 167 株深部真菌中以假丝酵母菌属感染率最高占 95.8%，其次为曲霉菌属、毛霉菌属和新型隐球酵母菌分别为 2.4%、1.2%和 0.6%。在真菌感染的假丝酵母菌属中白色假丝酵母菌最多为为 106 株，占 67.1%，说明白假丝酵母菌是深部真菌感染的主要病原菌，这可能与白假丝酵母菌对宿主细胞的高黏附性及该菌株在环境中分布很广
