细菌的革兰氏染色法一、目的要求 学习并掌握革兰氏染色的方法。二、实验材料 1. 菌种:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金 黄色葡萄球菌。 2. 染料:草酸铵结晶紫液、路哥氏碘 液、95% 乙醇、番红液。 3. 其他:显微镜、载玻片、接种环、酒 精灯、无菌生理盐水、香柏油、二甲 苯等。三、基本原理 革兰氏染色法是细菌学中广泛使用 的一种鉴别染色法。 1884 年由丹麦医师Gram 创立。细菌先经碱性染料结晶紫染色,再经碘液 媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的 细菌紫色不被脱去,有的可被脱去,因此 可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳 性菌(G+ ),后者为革兰氏阴性菌(G- )。为观察方便,脱色后再用一种红色染料,如 碱性番红等进行复染。阳性菌仍带紫色, 阴性菌则被染上红色。有芽孢的杆菌和绝 大多数球菌,以及所有的放线菌和真菌都 成革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数 致病性的无芽孢杆菌都成负反应。 革兰式阳性菌和革兰氏阴性菌在化 学组成和生理性质上有很多差别,染色 反应不一样。 一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊 的核蛋白质镁盐与多糖的复合物,它与 碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱 色,阴性菌