蛋白质的表达纯化课件.ppt

上传人:晟*** 文档编号:14777288 上传时间:2022-11-29 格式:PPT 页数:16 大小:1.02MB
下载 相关 举报
蛋白质的表达纯化课件.ppt_第1页
第1页 / 共16页
蛋白质的表达纯化课件.ppt_第2页
第2页 / 共16页
蛋白质的表达纯化课件.ppt_第3页
第3页 / 共16页
蛋白质的表达纯化课件.ppt_第4页
第4页 / 共16页
蛋白质的表达纯化课件.ppt_第5页
第5页 / 共16页
点击查看更多>>
资源描述

实验八 蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定 (1)了解重组蛋白表达的方法和意义。 (2)了解亲和层析分离纯化的方法。 实验原理 克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠杆菌是目前应用最广泛的蛋白质表达系统,其表达外源基因产物的水平远高于其它基因表达系统,表达的目的蛋白量甚至能超过细菌总蛋白量的80%。 本实验中,携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在37 ,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸(NTA)使镍离子(Ni2+)固相化的层析介质加以提纯,实为金属熬合亲和层析(MCAC)。蛋白质的纯化程度可通过聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。 材料与试剂 试剂 1 LB液体培养基:Trytone 10g, yeast extract 5g, NaCl 10g, 用蒸馏水配至1000mL. 2 氨苄青霉素:100mg/mL 3 上样缓冲液(GLB):100 mM NaH2PO4, 10

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 实用文档资料库 > 公文范文

Copyright © 2018-2021 Wenke99.com All rights reserved

工信部备案号浙ICP备20026746号-2  

公安局备案号:浙公网安备33038302330469号

本站为C2C交文档易平台,即用户上传的文档直接卖给下载用户,本站只是网络服务中间平台,所有原创文档下载所得归上传人所有,若您发现上传作品侵犯了您的权利,请立刻联系网站客服并提供证据,平台将在3个工作日内予以改正。