1、细胞工程集体备课内容,五莲中学高三生物组马启明2018.1.19,一、考纲要求：,1.植物组织培养（）2.细胞融合与单克隆抗体（ ）3.动物细胞培养与体细胞克隆（ ）,二、近三年高考题研究,6.（2015江苏卷.3）下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述,正确的是（ ）A. 乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养B. 细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行C. 采用胚胎分割技术产生同卵多胚的数量是有限的D. 培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质,【考点定位】动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养和胚胎分割本题综合考查了动物细胞工程和胚胎工程的相关知识，意在检测学生对相关知识的
2、理解和记忆能力。由于现代生物科技专题的知识都是学生在中学期间无法直接观察到和直接操作实验的知识，所以学生学习只能依靠自己想象的理解和识记相关的考点知识才能完成相应试题。,c,9.（2015天津卷.6）2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。据图分析，下列叙述错误的是（ ）A、该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代B、捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿C、三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核D、三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术,C,【考点定位】本题考查核移植技术、动物细胞培养、体外
3、受精和早期胚胎培养、胚胎移植及细胞质遗传和核基因遗传等知识。,考生需要了解细胞质基因的遗传与细胞核基因的遗传的不同点，然后再结合图示做出具体判断。图示信息告诉同学们这三亲分别是母亲、捐献者、父亲，母亲提供细胞核，捐献者提供去核卵母细胞，父亲提供精子。考生还需要知道染色体存在于细胞核中，因此结合图示即可做出正确的推断：三亲婴儿的染色体来自于母亲和父亲。由此可知本题很好的考查了考生的识记能力、分析能力。,10.（2015北京卷.5）在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ）A.用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞B.用选择培养基筛法导入目的基因的细胞C.用聚乙二醇诱导转
4、基因细胞的原生物质融合D.用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽,【考点定位】基因工程操作程序和植物细胞工程解决本题必须明确土壤农杆菌转化法培育转基因植株的程序有：获取目的基因 目的基因与Ti质粒结合形成重组质粒 将重组质粒导入土壤农杆菌 用土壤农杆菌感染植物细胞 检测是否导入目的基因并鉴定是否成功表达 通过植物组织培养技术培养 获得转基因植株。,C,4.（2016江苏卷.9）下列有关细胞工程的叙述，正确的是A.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合B.用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂C.骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体D.核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵
5、母体,D,【考点定位】细胞融合，人工种子，单克隆抗体，核移植,此题是对细胞工程的考查，解答本题的关键在于理解动植物细胞融合的区别，表现在诱导因素和融合过程的区别；同时理解制备人工种子的过程，理解原生质体的应用范畴；对于单克隆抗体的制备过程要重视；弄清楚核移植的过程是正确D项的关键。,27.( 2015四川卷.9)（11分）将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有TDNA片段能转移到植物细胞中）。（1）过程需用同种酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用培养基。（2）过程中将
6、棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是。（3）若过程仅获得大量的根，则应在培养基中增加以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是。（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是。种植转基因抗虫棉能减少的使用，以减轻环境污染。,【答案】（1）限制性核酸内切选择（2）TDNA筛选获得TDNA片段的植物细胞（3）细胞分裂素浓度顶芽端合成的生长素向基部运输，促进根的分化（4）投放棉铃虫农药,【考点定位】查基因工程与细胞工程的原理与相关操作，涉及培养基的功能及使用等知识点。基因工程操作要点提示：（1）基因表达载体的构建是实施
7、基因工程的第二步即，也是基因工程的核心。（2）对于植物来说，受体细胞可以是受精卵或体细胞，但常用体细胞。（3）对于动物来说，受体细胞一般是受精卵。受精卵作为受体细胞具有体积大、易操作、经培养可直接表达性状的优点。而动物体细胞的全能性受限。选择培养基的运用主要依据的是质粒上的标记基因。,20.（2016新课标2卷.40)生物选修3：现代生物科技专题（15分）下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程,回答下列问题：（1）图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为_。过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_的方法。代表的过程
8、是_。（2）经过多次传代后，供体细胞中_的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_。（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了_。,【答案】（15分）（1）XX或XY 显微操作（去核法） 胚胎移植（2）遗传物质 （3）卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响（4）已经分化的动物体细胞核具有全能性,【考点定位】核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植本题以“获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程图”为情境，综合考查学生对核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植的熟记和理解能力。
9、解决此类问题的关键是，熟记并理解相关的基础知识、形成知识网络，“读懂”流程图中的每个箭头的含义，据此结合每个问题情境进行图文转换、实现对知识的整合和迁移。,12（2017海南卷.31）选修3：现代生物科技专题（15分）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是_。（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到_。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是_（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体
10、”或“已转入抗性基因”）。（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是_。A中的愈伤组织是叶肉细胞经_形成的。,（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，_（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是_。,【学科网考点定位】植物组织培养 明确植物组织培养过程和原理是解题关键。,【答案】（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株。 （2）葡萄糖、果糖 具有完整的细胞核 （3）细胞分裂素、生长素
11、脱分化 （4）不能 对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株。,15（2017新课标卷.38）生物选修3：现代生物科技专题（15分）编码蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。,回答下列问题：（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCTCAGGAAGGA），则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是_。（2）某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，
12、在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为_，加入了_作为合成DNA的原料。,（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。由图2 可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是_。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是_。仅根据图、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中
13、，若缺少_（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。,【答案】（1）编码乙的DNA序列起始端无ATG，转录出的mRNA无起始密码子（2）模板 dNTP（3）进行细胞传代培养 维持培养液是的pH C,【考点定位】基因工程、细胞工程,三、课本内容分析,专题二、细胞工程,1、概念:,植物细胞工程动物细胞工程,基因工程：操作水平分子水平 胚胎工程只是指对动物的早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。,所采用技术的理论基础,植物细胞工程,通常采用的技术手段,植物组织培养,植物体细胞杂交,植物细胞的全能性,一、植物细胞工程,(离体的植物器官、组织或细
14、胞),脱分化避光,再分化光照,培养条件：,离体、含有全部营养成分的培养基、激素、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适合的光照等,外植体,举例：,花药离体培养；基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株；细胞工程中培育的“番茄-马铃薯”杂种植株等。,1、植物组织培养,去壁,去壁,纤维素酶果胶酶,原生质体,植物细胞,融合的原生质体,离心、振动、电刺激聚乙二醇,再生细胞壁,杂种细胞,脱分化,愈伤组织,杂种植株,激素,筛选,激素,再分化,2、植物体细胞杂交过程示意图,植物体细胞杂交原理： 细胞膜流动性,植物组织培养原理： 植物细胞全能性,A,B,意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种,6.下图为植物体
15、细胞杂交过程示意图，据图回答：,步骤是去掉 ，最常用的方法是用 酶去除，使植物细胞成为 。步骤一般常用的化学试剂是 ，目的是 。在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是 ，其中步骤相当于 ，步骤相当于 。,细胞壁,纤维素酶和果胶酶,原生质体,聚乙二醇,诱导原生质体融合,植物组织培养,脱分化,再分化,植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株，使两株植物的性状能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是 。从理论上讲，杂种植株的育性为 。若运用传统有性杂交方法能否实现？ 因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于 。利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，遗传物质的传递是
16、否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？,杂种细胞具有两个亲本的遗传物质,可育,不能,克服远缘杂交不亲和的障碍,不遵循，植物体细胞杂交属于无性生殖。,(1)过程是 ，实际融合的过程中原生质体可能会形成 种细胞团(只考虑两个细胞融合的情况)。与过程密切相关的细胞器是 。,3,高尔基体和线粒体,课堂练习,原生质体融合,(2)若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，若将番茄和马铃薯采用有性杂交的育种方法培育(假设能成功)，得到的后代应含 条染色体，若采用体细胞杂交技术所得植株含 条染色体，(3)若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则杂种植株为 倍体。,习题,(A+B)/2,A+B,六,(4) 在培养
17、杂种苗的过程中，一般在2428小时后，大部分原生质体已经再生出细胞壁。怎样鉴别细胞壁是否再生？,植物细胞质壁分离和复原实验,植物组织培养技术有哪些应用？,.植物繁殖的新途径微型繁殖： 不仅可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。作物脱毒：利用植物分生组织(如茎尖、根尖)进行培养,可以使新长成的植株脱除病毒。,人工种子： 植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽或腋芽,包上人工种皮就可以形成人工种子。右图是人工种子的结构示意图。,人工种子,自然种子,胚状体包埋在胶囊内形成球状结构：胶质化合物薄膜种皮营养成分和植物激素 人工胚乳胚状体新植物的幼体,优点： 快速繁殖，解决作物繁
18、殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。保持杂种优势。,(2)作物新品种的培育 单倍体育种： 花药离体培养过程就是植物组织培养过程。,单倍体育种的优点是后代不发生性状分离,都是纯合子，能够稳定遗传,明显缩短了育种年限。,突变体的利用： 在植物组织培养过程中,由于培养细胞一直处于不断的分生状态,因此容易受到培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响而发生突变。 从这些产生突变的个体中可以筛选出对人们有用的突变体,进而培育成新品种。(3)细胞产物的工厂化生产： 可以利用植物组织培养技术大量生产某些细胞产物,如蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料、生物碱等。,1.对细胞全能性的表述正确的是A.非离体植物细
19、胞能够表现出全能性B.动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现C.单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性D.花粉培育成单倍体是细胞全能性的体现2.植物细胞表现出全能性的必要条件是A.给予适宜的营养和外界条件B.脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件C.导入其他植物细胞的基因D.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内,3.在生物体的所有细胞中，全能性最高的是A卵细胞 B 植物花粉 C体细胞 D.受精卵4.在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为： A.细胞丧失了全能性 B.基因的表达有选择性 C.不同的细胞内基因不完全相同 D.在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化
20、,5.植物组织培养可以形成愈伤组织，下列有关愈伤组织的叙述错误的是A.愈伤组织是离体细胞经过脱分化形成的B.形成愈伤组织的培养基不需含有机分子C.愈伤组织可以形成具有生根能力的胚状结构D.愈伤组织细胞的线粒体和核糖体可能发生碱基互补配对6.能刺激愈伤组织形成的诱导剂是A.细胞分裂素和生长素 B.赤霉素 C.生长素和赤霉素 D.细胞分裂素和乙烯,7.将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是A、具有完整细胞核的细胞 B、一定的营养物质和植物激素C、离体状态 D、导入指定基因 8.（多选）植物体细胞的组织培养常被用于保留杂种优势。因为植物组织培养的过程 A.不可能发生基因突变 B.生殖方
21、式属于无性生殖C.子代不发生性状分离 D.体细胞内不存在等位基因,10.植物体细胞杂交的目的是A.用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体B.以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合C.用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株D.通过以上三者来完成 11.在细胞工程 原生质体融合育种技术中，、其技术的重要一环是将营养细胞的细胞壁除心去，通常是采用纤维素酶的酶解破壁法处理。如将去掉了细胞壁的成熟植物细胞置于清水中，细胞最终将 A.皱缩 B.胀破 C.呈球形 D.保持原状,二、动物细胞工程,植物细胞工程常用的技术手段：,植物组织培养、 植物体细胞杂交等,动物细胞培养,动物细胞核移植,动物细胞
22、融合,单克隆抗体制备等,回顾：,常用的技术手段：,动物组织,单个细胞,细胞悬液,贴壁生长,分瓶培养,10代细胞,50代细胞,不死细胞,原代培养,传代培养,胰蛋白酶,剪碎,加培养液,接触抑制,少数癌变,动物细胞培养技术流程,畸形分化,？传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型,1.动物细胞培养的基本原理是什么？2.动物细胞培养液的主要成分是什么？3.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？,离体的细胞在适宜的条件下可以增殖（ 细胞增殖）,通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。,一般取胚胎组织或
23、幼龄动物的组织做动物细胞培养。因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞生命力旺盛，分裂能力强。,4.哪些细胞会失去接触抑制？5.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？6.动物细胞培养有何应用价值？,肿瘤细胞,无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、适宜温度、PH、气体环境（O2和CO2，C02的主要作用是维持培养液的PH）。,.大规模生产生物制品，如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等；.药性、毒性检测；.培养基因工程中的受体细胞,动物细胞核移植技术和克隆动物,动物细胞核移植：,是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克
24、隆动物）,分类：,细胞分化程度低，恢复全能性容易,细胞分化程度高，恢复全能性困难,原理：动物细胞核的全能性,细胞质,细胞核,细胞核移植,多莉羊的培育过程,体细胞核移植的过程,卵母细胞去核,体细胞取核,重组细胞,体细胞核移植技术的应用前景,1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程,2、保护濒危物种,3、医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植,细胞膜的流动性,灭活病毒、PEG、电激等,融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞,诱导的手段？,融合后细胞的类型？,AB杂种细胞遗传物质有什么特点？,三种AA、AB、BB,含两种生物的遗传物质,1.2动物细胞融合过程,原理？,1.2动物细胞融合过程
25、,为什么灭活的病毒能作诱导剂？,灭活丧失感染性,保留融合活性,1.4 比较动、植物细胞杂交技术,抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。,如何解决这个问题呢？,单克隆抗体！,读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念,人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。,2.1单克隆抗体的概念,单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体,一个B淋巴
26、细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,设计方案：,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞,1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验,为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？ 会有几种融合方式？ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？ 是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？,BB 、B瘤 、瘤瘤 （B、瘤）,（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活,获得产生相应抗体的B细胞,（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大
27、量增殖。,单克隆抗体,杂交细胞,杂交瘤细胞,骨髓瘤细胞,特异性杂交瘤细胞,杂交瘤细胞系,提取,经过免疫的B淋巴细胞,动物细胞融合技术,动物细胞培养技术,单克隆抗体的制备过程：,特点：既能产生专一抗体又能大量繁殖,特点：特异性强灵敏度高可大量制备,强调：,是其他动物细胞工程技术的基础。,动物细胞培养技术,单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？,你学会了吗？,2.3单克隆抗体的应用,1、诊断试剂最广泛应用准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。,“生物导弹” 单克隆抗体药物 单抗导向，药物为弹
28、头,2、治疗疾病和运载药物,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。,例下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。,（1）_技术是单克隆抗体技术的基础。（2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于_培养基。（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。（4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_。（5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_特点，又具备淋巴细胞的_特点。（6）淋巴细胞是由动物体_中的_细胞分化、发育而来。（7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。,动物细胞培养,选择,特异性
29、强,灵敏度高,灭活的病毒,在体外大量增殖,分泌特异性抗体,骨髓,造血干细胞,主动运输,1975年Kohler和Milstein的单克隆抗体技术在生产和使用抗体方面开创了新纪元，图10示单克隆抗体制备流程阶段示意图。请据图回答下列问题：（1）该技术是在动物细胞培养技术和 技术的基础上发展起来的。（2）图10中细胞A体外培养不具有分裂能力，但能分泌 ，细胞B体外培养能够 。（3）动物细胞融合常用的方法是 。,图10,动物细胞融合,分泌特异性抗体,无限增殖,PEG（灭活的病毒、电激）,图10,（4）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，要筛选出 细胞。在细胞培养过程中，为了促进细胞摄取葡萄糖，
30、常向培养液中加入 (激素) （5）要获得大量的单克隆抗体，可对获得的杂交瘤细胞进行 培养。,体外或体内,杂交瘤,胰岛素,例人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：,提取,请回答：（1）过程代表的是 。（2）过程构建A基因表达载体时，必须使用 和 两种工具酶。,DNA连接酶,逆转录,限制性核酸内切酶,（3）过程采用的实验技术是 ，获得的X是 。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。 对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 _ 比较；或用图中的 _ _ 进行特异性结合检测。,抗A蛋白的单克隆抗体,细胞融合 杂交瘤细胞,A蛋白,核酸（基因）序列,(4)在培养时通过_分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）_。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_。,特异性强、灵敏度高,有丝,无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境,本节小结,学生任务：回归教材、读透教材，归纳整理，储备答案,65,
