1、一、填空1大肠杆菌长为 2.0m,宽为 0.5m,其大小表示为 0.5m2.0m 。2放线菌的菌丝体分为 基内菌丝体 、 气生菌丝体 、 孢子丝 。在放线菌发育过程中，吸收水分和营养的器官为 。3侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 温和噬菌体 。4无分枝单细胞的群体典型生长曲线，根据单细胞微生物生长速度的不同可将曲线分为 延滞期 、 指数期 、 稳定期 、 衰亡期 四个时期。5微生物学的奠基人是 巴斯德 。6革兰氏染色法是鉴别细菌的重要方法，染色的要点如下：先用草酸铵结晶紫初染，加碘液 媒染，使菌体着色，然后用 95乙醇 脱色，最后用番红复染，呈 紫 色为革兰氏阳性反应，呈 红 色为革兰
2、氏阴性反应。7只含 RNA 一种成分，专性细胞内寄生的亚病毒因子叫做 类病毒 。8微生物吸收营养物质的方式有 单纯扩散 、 促进扩散 、主动运送 、 基团移位 四种类型。二、名词解释菌落、菌苔、荚膜、烈性噬菌体、温和噬菌体、L 型细菌、鉴别培养基、选择性培养基、同步生长、生长限制因子、cfu、灭菌、消毒、防腐、化疗、巴氏消毒法、营养缺陷型、转化、转导、结合、感受态、菌根、互生、共生、寄生、拮抗1.菌落: 单个细胞在固体培养基表面经过培养形成肉眼可见的微生物集团称为菌落。2.菌苔: 大量菌落相互连成一片就是菌苔。3.荚膜: 包裹在单个细胞上，在壁上有0.2m 的较厚固定层次的的糖被。4.烈性噬菌
3、体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解等 5 个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体5.温和噬菌体：某些噬菌体感染宿主细胞后并不使宿主细胞马上裂解而是噬菌体的核酸整合到宿主细胞染色体上并随宿主细胞的分裂把噬菌体的核酸传给子细胞。这种感染宿主细胞后不引起宿主细胞迅速裂解的噬菌体称为温和噬菌体。6.L 型细菌：那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株7.鉴别性培养基：一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基，称为鉴别性培养基。 8.选择性培养基：一类根据某微生物
4、的营养要求或其对某化学、物理因素抗性的原理而设计的具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌功能的培养基。9.同步生长：设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样的细胞生长和分裂周期中，通过分析此群体在各阶段的生物化学特性变化，来间接了解单个细胞的相应变化规律。这种通过同步培养使细胞群体处于分裂步调一致的生长状态称为同步生长。 10.生长限制因子：凡处于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的某营养物称为生长限制因子。11.Cfu：一个活菌在合适的培养基表面，逐渐生长成一个肉眼可见的菌落，此即“菌落形成单位”（cfu）12.灭菌：采用强烈的理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力，称
5、为灭菌。13.消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌，而对被消毒的对象基本无害，称为消毒。14.防腐：采用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施，称为防腐。15.化疗：利用具有高度选择毒力（对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒）的化学物质来抑制宿主体内的病原微生物的生长繁殖，达到治疗该宿主传染病目的，称为化疗。 16.巴氏消毒法：一种低温湿热消毒法，处理温度变化很大，一般 6085处理30min15s17.营养缺陷型：野生型菌株经诱变剂处理后，由于发生了丧失某酶合成能力的突变，因而只能在加有该酶
6、合成产物的培养基中才能生长，这类突变菌株称为营养缺陷型菌株（简称营养缺陷型）。18.转化：受体菌直接吸收供体菌的 DNA 片段而获得供体菌部分遗传性状的现象，称为转化。19.转导：通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞中的小片段 DNA 转移到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。20.接合：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把 F 质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象，称为接合。21.感受态：受体细胞最易接受外源 DNA 片段并能实现转化的一种生理状态，称感受态。22.菌根：真菌与植物根系形成的一类特殊共生体，具有改善植物
7、营养、调节植物代谢和增强植物抗病能力等功能。23.互生：两种可单独生活的生物，当他们在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的相互关系，称为互生。24.共生：两种生物共居在一起，相互分工合作、相依为命，甚至形成独特结构、达到难分难解、合二为一的极其紧密的一种相互关系，称为共生。25.寄生：一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内（包括细胞内）或体表，从中夺取营养并进行生长繁殖，同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系，称为寄生。26.拮抗：由某种生物所产生的的特定代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系，称为拮抗。三、简答题1、简述微生物多样性的主要体现
8、形式2、简述革兰氏染色的机制？3、什么是烈性噬菌体？简述其裂解性增殖周期。4、什么是质粒？其特点是什么？5、比较呼吸，无氧呼吸和发酵的特点。6、简述微生物的五大共性7、简述革兰氏染色的步骤8、描述烈性噬菌体侵染寄主的过程9、什么是锁状联合？其生理意义如何？10、什么叫转导？试比较普遍性转导与局限性转导的异同。1、简述微生物多样性的主要体现形式答：物种的多样性：微生物的总数约在 50 万600 万种之间，其中已记载过的仅约 20万种，包括原核生物 3500 种，病毒 4000 种，真菌 9 万种，原生动物和藻类 10 万种，且这些数字还在急剧增长。.生理代谢类型的多样性：分解初级有机物，多种产能
9、方式，生物固氮作用，合成复杂有机物，生物转化能力，分解剧毒物质的能力，抵抗极端环境的能力。.代谢产物的多样性：目前已知微生物产生的代谢产物数约 5 万种。遗传基因的多样性：现已完成测序和装配基因组的细菌有 1214 种，古生菌有 93 种，真菌有 17 种。生态类型的多样性：微生物广泛分布于地球表层的生物圈（包括土壤圈、水圈、大气圈、岩石圈和冰雪圈），还有一些嗜极菌可生活在极热、极冷、极酸等极端环境中。2、简述革兰氏染色的机制？答：通过结晶紫液初染和碘液煤染后，在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫-碘复合物。G菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障 缩小
10、，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上，呈紫色。G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其类脂含量高 ,乙醇将类脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。3、什么是烈性噬菌体？简述其裂解性增殖周期。答：在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、裂解等 5 个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。周期：1.吸附：噬菌体与宿主细胞特异性结合2.侵入：噬菌体核酸或毒粒进入宿主细胞；3.增殖：核酸的复制、蛋白质合成；4.成熟：核酸与蛋白质各部分组装成噬菌体；5.裂解：成熟的子代噬菌体释放到细胞外。4、什么是质粒？其特点是什么？凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立
11、复制能力的小型共价闭合环状的 dsDNA 分子即 cccDNA，就是典型的质粒。特点：.质粒结构：麻花状的超螺旋结构，大小一般为 1.5300kb，相对分子质量为 8610，相当于约 1%基因组.质粒功能：质粒上携带某些核基因组上所缺少的基因，使细菌等原核生物获得了非必需的特殊功能（接合、产毒、抗药、固氮、产特殊酶和降解环境毒物、基因重组）。.质粒复制：质粒是一种独立存在于细胞内的复制子严紧型复制控制：质粒复制与核染色体复制同步，一般只含 1 3 个质粒。松弛型复制控制：质粒复制与核染色体复制不同步，一般可含 1015 个甚至更多质粒。.质粒消除：含质粒的细胞在正常的培养基上受吖啶类染料、丝裂
12、霉素 C、紫外线、利福平、重金属离子、高温等因子处理时，由于其复制受抑而核染色体的复制仍继续进行，从而引起子代细胞中不含质粒，此即质粒消除。.可整合性质粒可以与核染色体发生整合与脱离，如 F 因子，这种质粒称附加体整合：指质粒或温和噬菌体、病毒、转化因子等小型非核染色体 DNA 插入核基因组等大型 DNA 分子中的现象重组性质粒与质粒之间、质粒与核染色体之间的基因重组5、比较呼吸，无氧呼吸和发酵的特点。呼吸：以分子氧为最终电子（和氢）受体的作用，即有机物脱氢后，经完整呼吸链递氢，最终以分子氧作为氢受体产生水，释放 ATP 形式的能量，最终产物为 CO2无氧呼吸：呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化
13、物(少数为有机氧化物)的生物氧化，称为无氧呼吸。发酵：在无氧等外源受氢体（外源最终电子受体）条件下，底物脱氢以后产生的还原力H未经过呼吸链传递而直接交给某一内源中间代谢产物接受，以实现底物水平磷酸化产能的生物氧化反应。6、简述微生物的五大共性答： 体积小、面积大；吸收多、转化快；生长旺、繁殖快；适应强、易变异；分布广、种类多。7、简述革兰氏染色的步骤答： 涂片固定；草酸铵结晶紫初染 1min，水洗；碘液媒染 1min，水洗，吸水； 95%乙醇脱色 0.5min，水洗，吸水；番红复染 1min，水洗，吸水,镜检。结果:阳性菌紫色；阴性菌红色。8、描述烈性噬菌体侵染寄主的过程吸附;当噬菌体与其相应
14、的特异宿主在水中发生偶然想碰后,如果尾丝尖端与宿主细胞表面的特异受体接触,则尾丝被刺激散开而附着在受体上;侵入;吸附后尾丝收缩，基板获得一个构象刺激,使蛋白质亚基发生位移，尾端携带的溶菌酶可水解细胞壁的肽聚糖使细菌头部的核酸注入宿主细胞，将蛋白质躯壳留在壁外;增殖;细菌将其核酸注入宿主细胞后,利用宿主细胞的物质作为自己合成的物质来源进行大量的繁殖;装配即成熟;噬菌体将自己在宿主细胞体内合成的各种部件进行有序的自装配,形成完整的子代噬菌体;裂解即释放;当宿主细胞内的大量子代噬菌体成熟后,由于水解细胞膜的脂肪酶和水解细胞壁的溶菌酶的作用,促使细胞裂解从而完成了子代噬菌体的释放.9、什么是锁状联合？
15、其生理意义如何？答：锁状联合：形成喙状突起而连合两个细胞的方式不断使双核细胞分裂，从而使菌丝尖端不断向前延伸的特殊方式。生理意义：这 一 过 程 保 证 了 双 核 菌 丝 在 进 行 细 胞 分 裂 时 ， 每 节 （ 每 个 细 胞 ） 都能 含 有 两 个 异 质 （ 遗 传 型 不 同 ） 的 核 ， 为 进 行 有 性 生 殖 ， 通 过 核 配 形 成 担 子 打 下 基础 。 锁 状 联 合 是 双 核 菌 丝 的 鉴 定 标 准 。10、什么叫转导？试比较普遍性转导与局限性转导的异同。答：通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞中的小片段 DNA 转移到受体细胞中，通过交换与整合，使后
16、者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。比较项目 普遍性转导 局限性转导能够转导的基因 供体菌的几乎任何一个基因 供体菌的少数特定基因噬菌体的位置 不整合到宿主染色体的特定位置上 整合到宿主染色体的特定位置 上转导噬菌体的获得 通过裂解反应或诱导溶源菌得到 只能通过诱导溶源菌得到转导子的性质 非溶源型 缺陷溶源型转导的物质 主要是供体菌的 DNA 主要是噬菌体 DNA，但也有供体菌 DNA四、论述1、论述微生物学的发展对人类进步所起到的重要作用。答：微生物与医疗保健：微生物学家发起了六大战役：外科消毒手术的建立、寻找人畜严重传染病的病原体、免疫防治法的发明和广泛应用、磺胺药等化学治疗剂的普及、
17、抗生素的大规模生产与应用、利用工程菌生产多肽类药物，从而使人类的平均寿命有了大幅度提高。在微生物与工业生产：通过食品罐藏防腐，酿造技术的改造，纯种厌氧发酵的建立，液体深层通气搅拌大规模培养技术的创建以及代谢调控发酵技术的发明，使得 古老的酿造技术迅速发展成工业发酵新技术； 微生物与农业生产：以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术；以菌增肥效和以菌促生长的微生物增产技术；以菌做饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术；以及以菌产沼气等生物能源技术。 微生物与环境保护：微生物是元素循环的推动者，是海洋和其他水体中光和生产力的基础，是食物链的重要环节，是污水和有机废物处理的关键角色，是生态农业中最
18、重要的一环；是环境污染和监察的重要指示生物。微生物和生命科学基础研究：微生物有其“五大共性”便于研究，微生物学促进许多重大理论问题的突破，是分子生物学三大来源之一。对遗传学，基因工程等发展发挥了无可争辩的关键作用。2、论述并举例说明微生物之间的相互关系。答：主要 5 种：互生关系、共生关系、寄生关系、拮抗关系、捕食关系互生关系：两种可单独生活的生物，当他们在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的相互关系，称为互生。例：好氧性自生固氮菌与纤维素分解菌，后者分解纤维素的产物有机酸为前者提供固氮时的营养，而前者则向后者提供氮素营养物，共生关系：两种生物共居在一起，相互分工合作、相依为
19、命，甚至形成独特结构、达到难分难解、合二为一的极其紧密的一种相互关系，称为共生。例：地衣：真菌与绿藻的共生。绿藻进行光合作用，为真菌提供有机养料，真菌以产生的有机酸分解岩石，为绿藻提供矿质元素。寄生关系：一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内（包括细胞内）或体表，从中夺取营养并进行生长繁殖，同时使后者蒙受损害甚至被杀死的一种相互关系，称为寄生。例：蛭弧菌的寄生，把宿主的原生质作为自己的营养，待新个体长出鞭毛，破壁而出重新寄生新的宿主细胞。拮抗关系：由某种生物所产生的的特定代谢产物可抑制他种生物的生长发育甚至杀死它们的一种相互关系，称为拮抗。例：制作泡菜和青贮饲料过程中，乳酸细菌等厌氧菌
20、产生的乳酸对其他腐败细菌的拮抗作用。捕食关系：一般指一种大型生物直接捕捉、吞食另一种小型生物以满足其营养需要的相互关系。例：捕食性真菌捕食土壤线虫。3、原核微生物 4 种主要遗传重组形式是什么？请逐一展开论述。答：原核微生物 4 种主要遗传重组形式：转化、转导、接合、原生质体融合转化：受体菌直接吸收供体菌的 DNA 片段而获得供体菌部分遗传性状的现象，称为转化。转化微生物的种类十分普遍。通过转化方式而形成的杂种后代称为转化子。转导：通过缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞中的小片段 DNA 转移到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。转导现象在自然界较为普遍。由转导作
21、用而获得部分新性状的重组细胞为转导子。接合：供体菌通过性菌毛与受体菌直接接触，把 F 质粒或其携带的不同长度的核基因组片段传递给后者，使后者获得若干新遗传性状的现象，称为接合。接合主要在细菌和放线菌中存在。通过接合而获得部分新性状的受体细胞称为接合子。原生质体融合：通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程，称为原生质体融合。原生质体融合在细菌、放线菌和各种真核生物细胞。由此法获得的重组子称为融合子。4、单细胞微生物典型生长曲线可分为哪几个时期？请逐一描述每个时期的特点。答：延滞期、指数期、稳定期、衰亡期延滞期：生长速率常数 R=0，
22、细胞形态变大或增长，细胞内 RNA 尤其是 rRNA 含量增高原生质呈嗜碱性，合成代谢十分活跃对外界不良条件如 NaCl 溶液浓度、温度和抗生素反应敏感。指数期：生长速率常数 R 最大，代时或倍增时间最短；细胞平衡生长，菌体内各部分成分均匀；酶系活跃，代谢旺盛。稳定期：R=0 ，生长与死亡细胞相等(动态平衡)菌体产量达到最高，菌体产量与营养物质消耗呈现规律性关系积累细胞贮存物产生芽孢次生代谢产物合成衰亡期：R0 ，死亡超过生长，活菌数明显下降细胞形态多形化因蛋白水解酶活力增强而自溶进一步合成与释次级代谢产物芽孢开始释放有的 G+出现 G-的特征低温、隔绝空气（对好氧菌）均能延长此时期五、实验题
23、1、土壤是人类最丰富的菌种资源库，请设计实验从其中分离一株具有淀粉水解酶活性的芽孢杆菌，并阐明主要实验思路及关键实验步骤。2、证明核酸是遗传物质基础的 3 个经典实验是什么？请分别描述其实验过程。答：经典转化实验.、噬菌体感染实验、植物病毒重建实验经典转化实验.：得 分噬菌体感染实验：用 35S 和 32P 去分别标记大肠杆菌，然后再用 T2 噬菌体感染，即得到分别含有 32P-DNA 核心的噬菌体或含 35S-蛋白质外壳的噬菌体；把标记噬菌体与其宿主大肠杆菌混合，经短时间（如 10min）保温后，使 T2 完成吸附和侵入过程；在组织捣碎器中剧烈搅拌，以使吸附在菌体外表的 T2 蛋白外壳脱离细胞并均匀分布进行离心沉淀，再分别测定沉淀物和上清液中的同位素标记。植物病毒重建实验：（烟草花叶病毒 TMV 与霍氏车前花叶病毒 HRV）人为的将植物病毒蛋白质与 RNA 分开，把它们重新组合成具感染性的病毒。TMV - RNA 与 HRV - 衣壳重建后的杂合病毒去感染烟草，烟草出现的是典型 TMV的病斑，从中分离出的新病毒是并未带任何 HRV 痕迹的 TMV 病毒。HRV - PNA 与 TMV - 衣壳重建时的杂合病毒去感染烟草，烟草出现的是典型 HRV的病斑，从中分离出的新病毒是并未带任何 TMV 痕迹的 HRV 病毒。
