1、本科毕业论文系列开题报告水产养殖细角螺雄性生殖系统的研究一、选题的背景与意义细角螺HEMIFUSUSTERNATANUSGMELIN为海洋单壳类,属新腹足目NEOGASTROPODA,盔螺科GALEODIDAE,主要分布在我国东南沿海和日本海域。细角螺是一种生长在潮下带深水区的海珍品,成螺体大肉肥,味道鲜美独特,具有滋补功效,在市场上的价格一向居高不下,一般为120200元/KG，属于名贵海鲜,具有很高的经济价值和市场开发潜力。细角螺通常生活在潮下带水深1070M泥质沙海底,需采用拖网才能捕获,同时天然野生的种群密度低,成螺的生长周期长,捕获不易。加之近年来由于过度采捕和近海环境的污染,导致了
2、我国沿海细角螺资源日益枯竭,因此，用显微和亚显微水平上对其进行精巢及精子发生的研究，为该种的人工育苗、增养殖、资源保护以及开发利用，提供基础繁殖生物学方面的参考数据和理论依据，对渔业的持续发展有着重要意义。目前国内外对细角螺的研究报道较少。其中包括细角螺体内神经鞘脂类的组成和结构（MISHIMAY，1997HAYASHIA，1997KISHINEH，1995KISHINEH，2001），另外对细角螺早期的生长和取食情况（HAMADAS，1974、砷在细角螺体内分布及含量（PHILLIPSDJH，1986也有报道。此外，在海水贝类体内凝集素的研究中，提到细角螺体内没有凝集素（SEERC，1986
3、）。与细角螺同一属的管角螺的报道同样较少，MORTONB（1985）研究了管角螺的摄食喜好。翌年，MORTONB（1986）又研究了管角螺的繁殖、幼体生长、摄食及饥饿对其幼体的影响，同年，PHILLIPSDJH（1986）做了管角螺呼吸和循环方面的动力学研究。之后，MORTON又报道了管角螺幼体的生长及幼体间残杀对幼体生长的意义。国内对细角螺的研究报道更少,从1994至今，只有寥寥数篇。许章程研究了细角螺的繁殖习性和生态条件对幼螺生长的影响（2006，2009）。梁海鹰报道了细角螺体内不同组织的同工酶类型（2007）。曹伏君把细角螺与管角螺的核型进行了对比（2008）。有关软体动物在生殖系统方
4、面的研究比较多，种类也较丰富。包括海湾扇贝性腺的发育（沈决奋等，1996）,虾夷扇贝雄性生殖系统的研究（陈立江等，1999）,贻贝生殖系统的研究（陈立江等，1999；李太武等，1999）,香螺雄性生殖系统的研究（高岩等，2004）,毛嵌线螺生殖系统的研究（周永灿等，2000）,泥螺生殖系统及精子发生的研究（应雪萍等，2002）,等。迄今为止，未见国内学者关于细角螺雄性生殖系统研究的详尽报道。因此，本文在显微和亚显微水平上对其进行进行研究，为该种的人工育苗、增养殖、资源保护以及开发利用，提供基础繁殖生物学方面的参考数据和理论依据。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题（一）研究的主要内容1细角螺雄
5、性生殖系统的解剖学观察与描述，并绘制雄性生生殖系统模式图。2细角螺雄性生殖系统殖组织学观察与描述。3细角螺精巢发育的组织学观察，总结其周期性的变化规律。（二）拟解决的问题了解细角螺雄性生殖系统的主要结构，精巢的发育情况，判断繁殖的时间和条件，为人工育苗提供理论依据。三、研究的方法与技术路线（一）研究方法1解剖学研究细角螺雄生殖系统解剖，活体解剖，用镊子从壳中取出完整的标本，置于解剖镜下，观察分离整个生殖系统，观察其形态，并绘制生殖系统的结构模式图。2组织学研究常规石蜡切片技术研究细角螺雄生殖系统的组织学，分析生殖系统各部分的结构、性腺的发育分期等。对于样品螺，进行周期性的性腺采样，测量标本后，
6、将壳打碎，取出生殖系统，分段取新鲜组织，用BOUINS液固定24H，进行梯度酒精脱水，石蜡包埋，连续切片，用苏木精和伊红进行常规HE染色，在显微镜下观察拍照，最后对图片的分析处理。（二）技术路线四、研究的总体安排与进度200912200912毕业论文选题200912201003进行文献查阅和资料收集,制定具体研究计划和实施方案,实验器材的准备及熟悉基本的实验操作细角螺雄性生殖系统的研究文献资料的查阅试验器材的准备解剖学观察研究组织学观察研究雄性生殖系统的组成观察、分离整个生殖系统性腺的周期采样分段取新鲜组织观察形态组成并拍照分析用BOUINS液固定常规HE染色梯度酒精脱水石蜡包埋连续切片显微观
7、察、拍照数据分析统计，论文的撰写201003201004撰写综述、开题报告201004201005开题答辩201005201012具体实验，包括取样、解剖学观察研究、组织学观察研究等201012201103数据和材料整理、分析，完成两篇外文翻译及论文撰写201103201105论文提交并答辩五、主要参考文献1曹伏君,李长玲,罗杰,等管角螺、细角螺的核型研究J广东海洋大学学报,2008,280115182陈立江,宁淑香,李春茂,等虾夷扇贝雄性生殖系统的组织学研究J水产科学,1999,1827113邓道贵,谈奇坤褶纹冠蚌精子发生的研究J水生生物学报,2000,24163664高岩,侯林香螺雄性生殖
8、系统的显微结构研究J水产科学,2004,23110135李太武,苏秀榕,李春茂,等贻贝雄性生殖系统的组织学和超微结构J动物学研究,1999,2031681716梁海鹰,曹伏君,张亮珠,等细角螺几种组织的同工酶分析J吉首大学学报自然科学版,2007,280587917李芳远,冯永勤,吴洪流,等塔形马蹄螺雄性生殖系统的组织学研究J海南大学学报自然科学版,2008,2621531568任素莲,王德秀,绳秀珍,等栉孔扇贝精子形成中的核变化与顶体形成J青岛海洋大学学报,1999,2945915949任素莲,王德秀,绳秀珍等栉孔扇贝受精过程的细胞学观察J海洋湖沼通报,2000,1242910沈决奋,杨爱国
9、,燕敬平海湾扇贝性腺发育的初步研究J海洋与湖沼,1996,27663263611许章程,王初升,张玉生细角螺的繁殖生态条件及繁殖习性J水产学报,2006,300684885112许章程,金亮,宋普庆,等温度和盐度与细角螺幼体生存生长及发育的关系J台湾海峡,2009,280226627113应雪萍,陈鸟,华恩宠,等泥螺生殖系统的组织学研究J东海海洋,2002,203243114严云志,谈奇坤,陈士超,等中国圆田螺典型精子及其发生的超微结构研究J水生生物学报,2004,281455115周永灿,陈国华,苏永毛嵌线螺生殖系统的解剖学和组织学研究J水产学报,2000,24539339816CHUNGS
10、R,KIMJH,YOUNGAS,ETALSTUDIESONLECTIONFROMMARINESHELLASCREENINGOFLECTINLIKEAGGLUTININSFROMMARINESHELLSJARCHPHARMRES,1986,9420120317ERKANM,SOUSAMFINESTRUCTURALSTUDYOFTHESPERMATOGENICCYCLEINPITARRUDISANDCHAMELEAGALLINAMOLLUSCA,BIVALVIA,VENERIDAEJSPERMATOGENICINVENERIDAE,2002,34226227218HAMADASGROWTHANDF
11、EEDINGOFHEMIFUSUSTERNATANUSINEARLYCRAWLINGSTAGEJTHEJAPANESEJOURNALOFMALACOLOGY,1974,332757919HAYASHIA,KISHINEHCOMPARATIVEBIOCHEMICALSTUDIESONLIPIDSOFFIVEGASTROPODSMOLLUSCASTRUCTURESANDCOMPOSITIONSOFLONGCHAINBASESOFSPHINGOLIPIDSJTHEJAPANESEJOURNALOFMALACOLOGY,1997,56215716720KISHINEH,MISHIMAY,HAYASHI
12、ASTRUCTURALDETERMINATIONOFLONGCHAINBASESOFCERAMIDEAMINOETHYLPHOSPHONATE,HEMIFUSUSTERNATANUSJYUKAGAKU,1995,441197798421KISHINEH,HAYASHIA,MORITAMSPHINGOLIPIDSOFHEMIFUSUSTERNATANUSIVJNIHONYUKAGAKKAINENKAIKOENYOSHISHU,2001,4016922MORTONBREPRODUCTION,JUVENILEGROWTH,CONSUMPTIONANDTHEEFFECTSOFSTARVATIONUPO
13、NTHESOUTHCHINASEAWHELKHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1986,10225728023MORTONBJUVENILEGROWTHOFTHESOUTHCHINASEAWHELKHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEANDTHEIMPORTANCEOFSIBLINGCANNIBALISMINESTIMATESOFCONSUMPTIONJJOURNALOFEXPERIMENTALMA
14、RINEBIOLOGYANDECOLOGY,1987,10911424MISHIMAY,KISHINEH,HAYASHIASPHINGOLIPIDSOFHEMIFUSUSTERNATANUSCERAMIDEMONOHEXOSIDESANDCERAMIDEAMINOETHYLPHOSPHONATEOFTHEVISCERJYUKAGAKU,1997,461394925PHILLIPSDJH,EPLEDGEMHDDSTRIBUTIONOFINORGANICANDTOTALARSENICINTISSUESOFTHEMARINEGASTROPODHEMIFUSUSTERNATANUSJMARINEECO
15、LOGYPROGRESSSERIES,1986,3426126626PHILLIPSDJH,DEPLEDGEMHCIRCULATION,RESPIRATIONANDFLUIDDYNAMICSINTHEGASTROPODMOLLUSC,HEMIFUSUSTUBAGMELINJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1986,951113毕业论文文献综述水产养殖细角螺的研究概述摘要细角螺，主要分布在我国东南沿海和日本海域。细角螺是一种生长在潮下带深水区的海珍品，成螺体大肉肥，味道鲜美独特，具有滋补功效，有很高的经济价值，在市场上的价格一向居高不下，
16、具有很大的市场开发潜力。细角螺为雌雄异体，四月份便进入繁殖盛期，一直到5月底结束。细角螺繁殖能力较低。目前国内外对于细角螺的精巢和精子的发生的研究少之又少。关键词管角螺；生物学特征；繁殖习性；生殖系统的研究；经济价值细角螺HEMIFUSUSTERNATANUSGMELIN俗称角螺（蔡英亚，1979），是浅海较大型经济螺类。细角螺是一种生长在潮下带深水区的海珍品，成螺体大肉肥,味道鲜美独特，具有滋补功效，在肌肉中糖蛋白有显著的抗癌活性（傅余强等，2000），有很高的经济价值，在市场上的价格一向居高不下，具有很大的市场开发潜力。细角螺通常生活在潮下带水深1070M泥质沙海底,需采用拖网才能捕获，同
17、时天然野生的种群密度低，成螺的生长周期长，捕获不易。加之近年来的过度采捕和近海环境的污染，导致了我国沿海细角螺资源日益枯竭，因此加强细角螺种质资源的保护，开展人工繁殖育苗和养殖的实验研究有着重要意义。1生物学特征11分布、栖息细角螺为海洋单壳类，属新腹足目NEOGASTROPODA，盔螺科GALEODIDAE，主要分布在我国东南沿海和日本海域，属暖水性种类，生活在潮下带近海1070M的软泥和泥沙质的海底。细角螺的生活方式为底栖型，喜欢潜沙生活。12形态特征细角螺壳质坚厚，壳表有被有黄褐色或淡棕色细密而短的茸毛壳皮（曹伏君等，2008）。成体壳高为97227CM，壳宽63146CM，螺体一般有7
18、8个体螺层（潘英等，2008），螺魇厚而实，具有较强的闭合能力，可保存水分时间较长，因此具有较强的耐干露能力。2繁殖习性21繁殖季节在浙江海域，每年5月中旬，水温达到2026，细角螺开始进入繁殖期，到6月份水温上升达到2628，产卵结束，一年仅繁殖一次，繁殖期是56月份，水温为2428。北部湾沿海地处亚热带气候，3月底的水温就能达到20。22交配产卵细角螺为雌雄异体，仅通过外壳难以分辨，但在繁殖季节可根据软体部交接器形态、腹足口等特征加以区分，自然条件下的群体，雌性的个体远远多于雄性，约为101，从象山、玉环捕捞上来的野生螺证实了这一点。细角螺交配时，雄性个体主动，趋近雌体时阴茎屡次伸缩，触到
19、雌性后便将足的部分搭在雌体贝壳上，头部伸长，将阴茎插入阴道口，交配时间持续较长，达数小时至几十小时，雌性细角螺通过交配，把精子储存于生殖管道内，待卵子排出后完成受精（许章程等，2006）。雌螺一般在交配后，部分个体便可产卵，有些个体在数小时后进行，多数个体在夜间或者黎明产卵。产卵时，亲螺通过一系列肌肉的收缩、舒张紧缩，将卵囊从腹足口挤出成形（柯才焕等，1991），并附着于基质上。不同雌螺常集中产卵，形成卵囊群。每个亲螺产卵时间较长，可达几个至十几个小时，每个卵囊产出的间隔时间可达几十分钟，在产卵过程中，亲螺如受到惊动，则停止产卵，恢复时间几小时到几天不等（梁海鹰等，2007）。产完卵的亲螺摄食
20、欲望强，需要多投饵料。3软体动物生殖系统的研究31生殖系统的研究有关软体动物在生殖系统方面的研究比较多，种类也丰富。主要有海湾扇贝性腺的发育（沈决奋等，1996）,虾夷扇贝雄性生殖系统的研究（陈立江等，1999）,贻贝生殖系统的研究（陈立江等，1999；李太武等，1999）,香螺雄性生殖系统的研究（高岩等，2004）,毛嵌线螺生殖系统的研究（周永灿等，2000）,泥螺生殖系统及精子发生的研究（应雪萍等，2002）等。然而在细角螺精巢方面的研究却是空白。研究生殖系统的主要方法为首先采样，在分为解剖学观察和组织学观察。解剖学观察主要是对活体的解剖，分析精巢的组成，并绘制出精巢结构模式图。组织学观察
21、常用石蜡切片技术研究精巢的各部分结构和发育情况。32细角螺雄性生殖系统的组成雄性的生殖系统主要由精巢和生殖导管两部分组成，生殖导管由贮精囊、输精管和阴茎构成。精巢位于肝脏表面，螺旋状，与肝脏伴行，位于第12个螺层。贮精囊是贮存精子的组织，位于精巢下一螺旋内侧。输精管上连贮精囊，末端与阴茎相连，是精子的输出通道。阴茎即雄性交配器，肌肉质，可伸缩，位于足的右侧。4经济价值细角螺的经济价值主要体现为营养价值和药用价值。细角螺软体部分多粗脂肪中脂肪酸含量齐全，多不饱和脂肪酸比例高，对人体具有明显的降血脂、降血压、提高生物膜液态性、抗肿瘤和免疫调节作用，能明显的降低心血管疾病的发生几率（航晓敏，2001
22、；JAMESMJETAL，2000；BELLUUZZIAL，1996；STOLLAL，1999）。此外DJHPHILLIPS（1986）关于细角螺组织中的无机盐与总砷的含量分析也证实了这一点。许多科学家关于细角螺同属的管角螺的研究也证实了角螺的营养价值和药用价值。朱爱意等对东极海区野生管角螺软体部营养成分进行了分析，表明管角螺软体部干品DS的粗蛋白含量达8077（朱爱意等，2008），蛋白质中检出含有17种氨基酸，氨基酸含量达软体部干重的512。其必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/WHO模式（竺俊全等，2005）；角螺赖氨酸含量为342MGG1DS，对于以谷物为主食的人来说摄入赖氨酸有利于提
23、高食物营养的利用率。管角螺的厣具燥湿收敛、清热解毒作用，螺壳可作为观赏物品，傅余强等对管角螺肌肉中性糖蛋白研究发现其对小鼠的S180肿瘤有明显的抑制作用，作用效果与环磷酰胺相似（傅余强等，2002）。分析结论为细角螺是一种高蛋白低脂肪、具有优良保健和营养价值的食品。5展望综上所述，目前国内外对于细角螺的研究还很少，而关于细角螺的生殖系统的研究更是没有。国内对细角螺的研究报道从1994至今，只有4篇。许章程研究了细角螺的繁殖习性和生态条件对幼螺生长的影响（2006，2009）。梁海鹰报道了细角螺体内不同组织的同工酶类型（2007）。曹伏君把细角螺与管角螺的核型进行了对比（2008）。相比其他腹足
24、类如管角螺、波部东风螺、方斑东风螺个方面的研究已经比较全面，细角螺的研究工作才刚刚起步，随着自然环境的污染加剧，生存环境的持续恶化和人们过度捕捞，野生的细角螺数量急剧下降，远远无法满足人们的日常需要，因此人工育苗是必然的趋势，这就需要更多关于细角螺育种方面的研究，本课题是在显微和亚显微水平上对细角螺的精巢及精子进行研究，为该种的人工育苗、增养殖、资源保护以及开发利用，提供基础繁殖生物学方面的参考数据和理论依据。参考文献1包振民,胡景杰,姜明,等皱纹盘鲍精子的超微结构青岛海洋大学学报,1998,2822832872曹伏君,李长玲,罗杰,等管角螺、细角螺的核型研究J广东海洋大学学报,2008,28
25、0115183陈寅山,饶小珍沟纹巴非蛤精子发生过程的超微结构观察海洋科学,2006,30828334陈立江,宁淑香,李春茂等虾夷扇贝雄性生殖系统的组织学研究J水产科学,1999,1827115邓道贵,谈奇坤褶纹冠蚌精子发生的研究J水生生物学报,2000,24163666高岩,侯林香螺雄性生殖系统的显微结构研究J水产科学,2004,23110137代培芳,饶小珍,陈寅山菲律宾蛤仔的精子发生和精子超微结构J动物学志,2004,39226328李太武贻贝雄性生殖系统的组织学和超微结构J动物学研究,1999,2031681719梁海鹰,曹伏君,张亮珠,等细角螺几种组织的同工酶分析J吉首大学学报自然科学
26、版,2007,2805879110李芳远,冯永勤,吴洪流,等塔形马蹄螺雄性生殖系统的组织学研究J海南大学学报自然科学版,2008,26215315611任素莲,王德秀,绳秀珍,等栉孔扇贝精子形成中的核变化与顶体形成J青岛海洋大学学报,1999,29459159412任素莲,王德秀,绳秀珍等栉孔扇贝受精过程的细胞学观察J海洋湖沼通报,2000,1242913任素莲,王如才,王德秀太平洋牡蛎精子形成的研究J青岛海洋大学学报,2001,31450150514沈决奋,杨爱国,燕敬平海湾扇贝性腺发育的初步研究J海洋与湖沼,1996,27663263615孙慧玲,方见光,王清印等泥蚶精子的超微结构J水产学
27、报,2000,24429730116王运涛,吴长功,谢嘉琳栉孔扇贝精子形成过程的超微结构研究J海洋科学,1999,6454717许章程,王初升,张玉生细角螺的繁殖生态条件及繁殖习性J水产学报,2006,300684885118许章程,金亮,宋普庆,等温度和盐度与细角螺幼体生存、生长及发育的关系J台湾海峡,2009,280226627119严云志中国圆田螺成熟精子和精子发生的超微结构研究D安徽师范大学,200220应雪萍,陈鸟,华恩宠,等泥螺生殖系统的组织学研究J东海海洋,2002,203243121应雪萍,姜乃澄,杨万喜泥螺精子发生的超微结构研究J动物学研究,2002,23540040422袁
28、秀堂,周兵,杨大佐墨西哥湾扇贝精子的超微结构J动物学杂志,2003,384161923严云志,谈奇坤,陈士超,等中国圆田螺典型精子及其发生的超微结构研究J水生生物学报,2004,281455124周永灿,陈国华,苏永毛嵌线螺生殖系统的解剖学和组织学研究J水产学报,2000,24539339825竺俊全,杨万喜,焦海峰疣荔枝螺精子的超微结构J水产学报,2005,29564364826竺俊全,杨万喜角蝾螺精子的超微结构J浙江大学学报理学版,2005,32668569127CHUNGSR,KIMJH,YOUNGAS,ETALSTUDIESONLECTIONFROMMARINESHELLASCREEN
29、INGOFLECTINLIKEAGGLUTININSFROMMARINESHELLSJARCHPHARMRES,1986,9420120328ERKANM,SOUSAMFINESTRUCTURALSTUDYOFTHESPERMATOGENICCYCLEINPITARRUDISANDCHAMELEAGALLINAMOLLUSCA,BIVALVIA,VENERIDAEJSPERMATOGENICINVENERIDAE,2002,34226227229HAMADASGROWTHANDFEEDINGOFHEMIFUSUSTERNATANUSINEARLYCRAWLINGSTAGEJTHEJAPANES
30、EJOURNALOFMALACOLOGY,1974,332757931KISHINEH,MISHIMAY,HAYASHIASTRUCTURALDETERMINATIONOFLONGCHAINBASESOFCERAMIDEAMINOETHYLPHOSPHONATE,HEMIFUSUSTERNATANUSJYUKAGAKU,1995,441197798432KISHINEH,HAYASHIA,MORITAMSPHINGOLIPIDSOFHEMIFUSUSTERNATANUSIVJNIHONYUKAGAKKAINENKAIKOENYOSHISHU,2001,4016933MORTONBJUVENIL
31、EGROWTHOFTHESOUTHCHINASEAWHELKHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEANDTHEIMPORTANCEOFSIBLINGCANNIBALISMINESTIMATESOFCONSUMPTIONJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1987,10911434PHILLIPSDJH,EPLEDGEMHDDSTRIBUTIONOFINORGANICANDTOTALARSENICINTISSUESOFTHEMARINEGASTROPODHEMIFUSUSTERNATANUS
32、JMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1986,3426126635PHILLIPSDJH,DEPLEDGEMHCIRCULATION,RESPIRATIONANDFLUIDDYNAMICSINTHEGASTROPODMOLLUSC,HEMIFUSUSTUBAGMELINJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1986,951113本科毕业设计（20_届）细角螺雄性生殖系统的研究目录1引言142材料和方法1421材料1422方法14221解剖学观察14222组织学观察14223透射电镜观察15224扫描电镜观察153结果1
33、531雄性生殖系统15311精巢15312输精集合管16313储精囊16314输精管16315阴精囊16316交接器1732精巢的发育及分期17321增殖期精巢17322生长期精巢17323成熟前期精巢17324成熟期精巢17325排放期精巢17326休止期精巢1833细角螺精子发生18331初级精原细胞18332次级精原细胞18333次级精母细胞18334次级精母细胞19335精子细胞19336成熟精子204讨论2041雄性生殖系统2042精巢的类型及分期2143精子发生215小结23致谢错误未定义书签。参考文献24图版说明25摘要本文采用了解剖、组织切片、电镜等多种技术对细角螺的雄性生殖系
34、统的组成和显微结构、精巢发育的规律、精子发生过程各级细胞的结构特点及精子超微结构进行了系统的研究。得出的主要结果如下细角螺雄性生殖系统由精巢、输精管、输精集合管、储精囊、阴茎囊、交接器组成。精巢则由不同大小和形状的精小叶组成。精巢位于螺层的第46层，和肝脏紧紧贴在一起，近螺壳一侧，呈螺旋状。精巢的外壁结构由薄层平滑肌、薄层结缔组织、单层柱状上皮组成。精巢发育可分为6个时期增殖期、生长期、接近成熟期、成熟期、排放期、休止期，依据是精巢的形态及生殖细胞的变化特点。根据各级生殖细胞的细胞形态和细胞核的变化、细胞器的变化，可将精子发生过程划分为6个阶段初级精原细胞、次级精原细胞、初级精母细胞、次级精母
35、细胞、精细胞和成熟精子。根据细胞核及染色质的变化、线粒体的变化、顶体的形成、中心粒及轴丝的形成，精细胞分可为、4个时期。细角螺精子属于修饰型精子，由头部和尾部构成。精子头部由顶体和细胞核组成。精子尾部可分为中段、主段及末段三部分，中段是轴丝被线粒体鞘包围所形成，主段又名糖原颗粒段，糖原颗粒段的出现和长度上的增加可作为细角螺精子进化的体现。关键词细角螺；雄性生殖系统；精子发生ABSTRACTTHEMETHODSOFANATOMY,HISTOLOGYANDTRANSMISSIONELECTRONMICROSCOPYTEMWEREUSEDTOSTUDYONREPRODUCTIVEBIOLOGYOFH
36、EMIFUSUSTERMATAMUSTHISRESEARCHWASHOPEDTOENRICHTHECONTENTOFTHEKNOWLEDGEABOUTREPRODUCTIVEBIOLOGYOFGASTROPODA,ANDTHEPROVIDEBASEDATAONGASTROPODACLASSIFICATIONANDCULTIVATIONOFTHEHEMIFUSUSTERMATAMUSTHESTRUCTUREOFTHEREPRODUCTIVESYSTEMOFHEMIFUSUSTERMATAMUSWASDESCRIBED,ASWELLASTHEREGULARITYINTDEVELOPMENTOFSE
37、XGLANDNOTONLYTHECHARACTERISTICINTHESPERMATOGENESISOFHEMIFUSUSTERMATAMUSWASDESCRIBED,BUTALSOTHEULTRASTRUCTUREOFTHESPERMANDTHETRANSFORMATIONOFORGANELLEINTHEVITELLOGENESISOFHEMIFUSUSTERMATAMUSWEREINVESTIGATEDSOMEPROJECTINGCHARACTERISTICSWERERESEARCHEDTHEMALEREPRODUCTIVESYSTEMWASCOMPOSEDOFSPERMARY,COLLE
38、CTINGTUBESOFSEMINALVESICLE,VASDEFERENSFRONT,MIDDLE,BOTTOM,CIRRUSPOUCHANDCOPULATORYORGANTHEEXINESTRUCTUREOFSPERMARYANDOVARYWASSIMILAR,THATWASMADEUPOFSIMPLECOLUMNAREPITHELIUM,THINSMOOTHMUSCLE,THINCONNECTIVETISSUEACCORDINGTOMORPHOLOGYOFSPERMARYANDTHECHANGEOFGERMCELLS,THESPERMARYDEVELOPMENTCOULDBEDIVIDE
39、DINTOSIXSTAGESPROLIFERATIVEPHASE,GROWTHPHASE,THEEARLYSTAGEOFMATURITY,MATURITYSTAGE,EMISSIONSTAGEANDRESTINGSTAGEDETAILEDOBSERVATIONSANDDESCRIPTIONSOFMORPHOLOGICALANDSTRUCTURALCHANGESOFCELLSASWELLASTRANSFORMATIONOFCELLORGANELLSWEREMADEBYSUBMICROSCOPICALLYFROMSPERMATOGONIATOSPERMATOZOATHEDEVELOPMENTOFS
40、PERMATOGENESISWASDIVIDEDBYSIXPHAGESPRIMARYSPERMATOGONIA,SECONDARYSPERMATOGONIA,PRIMARYSPERMATOCYTES,SECONDARYSPERMATOCYTES,SPERMATID,ANDTHESPERMACCORDINGTOTHETHESTRUCTURALCHANGESOFNUCLEUSANDCHROMATIN,THECHANGESOFMITOCHONDRION,THEFORMATIONOFACROSOME,THEFORMATIONOFCENTRIOLEANDAXONEME,SPERMATIDWASDIVID
41、EDINTO、FOURPHAGESTHESPERMOFHEMIFUSUSTERMATAMUSWASBELONGEDTOTHEMODIFIEDSPERM,THATWASMADEUPOFHEADANDTAILTHEHEADWASCOMPOSEDOFACROSOMESANDNUCLEARSTHETAILDIVIDEDINTOTHEMIDPIECE,CHIEFPIECEANDTERMINALPIECETHEAXONEMEWASCIRCLEDBYMITOCHONDRIALSHEATHINTHEMIDPIECE,THEAXONEMEWASCIRCLEDBYGLYCOGENOSOMEINTHECHIEFPI
42、ECETHEREAXONEMEPRESENTITSELFALONEINTHETERMINALPIECEKEYWORDSHEMIFUSUSTERMATAMUMALEREPRODUCTIVESYSTEMSPERMATOGENESIS1引言细角螺HEMIFUSUSTERNATANUS（GMELIN）俗称角螺，是一种生长在潮下带深水区的大型经济螺类，个体大螺肉肥嫩，味道鲜美独特,而且具有滋补功效，具有很高的经济价值。近年来由于市场需求量的增大，加之过度的采捕和环境污染加剧，导致了细角螺资源的日益枯竭。细角螺分布区域比较狭窄，资源比较珍惜，国内外对细角螺的研究报道相对较少。国外曾经研究过细角螺体内神经鞘
43、脂类的组成和结构（MISHIMAY，1997；HAYASHIA，1997；KISHINEH，1995、2001）。日本学者（HAMADAS，1974）研究了细角螺稚螺生长过程中的生态习性和形态的变化。细角螺体内砷的分布及含量（PHILLIPSDJH，1986）也曾有研究。国内对细角螺的研究报道相对较少。许章程（2006）研究了细角螺繁殖习性和繁殖条件，之后许章程（2009）研究并报道了生态条件及对细角螺幼螺生长的影响。曹伏君（2008）细角螺与管角螺的核型特征进行了对比，梁海鹰（2007）研究报道了细角螺体内不同组织内的同工酶的类型。关于细角螺繁殖生物学方面的研究较少，相应的研究成果和这方面的
44、知识比较匮乏。本文运用解剖学、组织学和电镜技术对细角螺的繁殖生物学进行了研究，希望能为细角螺的资源保护、人工育养及增养殖提供基础繁殖生物学方面的一些参考数据和参考理论，对渔业的持续发展和对生态的保护有着重要意义。2材料和方法21材料本实验于2010年5月2010年12月进行，实验材料采自舟山和象山港海域，由底拖网所捕捞。实验解剖所用细角螺为健康无损个体，体重1184368023G，壳高19582861CM。共计解剖细角螺个体36只。22方法221解剖学观察先对材料进行外形测量（长、宽、重），用铁锤敲碎外壳，使整个生殖系统裸露，记录整个生殖系统不同构造的形态、位置、色泽以及发育程度等变化并拍照。
45、222组织学观察活体取样，剪取细角螺雄性生殖系统各器官组织，用波恩氏液固定1024H，系列梯度酒精脱水，二甲苯或松油醇透明，石蜡包埋，切片（厚度810M），HE染色，用OLYMPUSBX60荧光显微镜观察，显微拍照。223透射电镜观察将试验样本螺置于冰盘上活体解剖，迅速准确的取出完整精巢，切下约1MM3的精巢组织块，先固定，用01MOL/L、的磷酸缓冲液（PH74）配制的25戊二醛4固定，再用1锇酸4后固定12H。用乙醇进行梯度浓度脱水，然后用采用EPON812环氧树脂渗透并包埋，接着用POWERTOMEXL型超薄切片机进行切片，再用醋酸铀及柠檬酸铅双重染色，最后用H7650型透射电镜观察并拍
46、照记录。224扫描电镜观察对实验细角螺进行活体解剖，取出精液，迅速用01MOL/L的磷酸缓冲液（PH74）配制成的25戊二醛（4）和1的锇酸进行双固定，再经过脱水、干燥、真空离子溅射仪喷金，最后使用KYKY1000B型扫描电镜观察并拍照记录。3结果31雄性生殖系统细角螺为雌雄异体，从外形上难以区别。敲开外壳后观察生殖腺，有交接器的为雄性，繁殖季节可见雄性交接器裸露在外。细角螺雄性生殖系统的器官包括精巢、输精集合管、储精囊、输精管（前、中、后段）、阴茎囊、交接器（见图1）。精巢与肝脏紧紧贴在一起，位于46螺层，精巢在靠近螺壳一侧。精巢与肝脏被同一层结缔组织薄膜包裹，随肝脏螺旋部的旋转而旋转，呈螺
47、旋状。前输精管自精巢发出后经围心腔进入外套腔中的储精囊中。储精囊明显膨大起来呈椭圆状，随后是粗大的输精管，与直肠平行贴在外套腔的内壁上，直至外套边缘与颈部相连处向左前方倾斜伸展进入颈部，在跨越外套膜和颈部时，输精管变为螺旋状，最后输精管经过右触角的右后方连接阴茎囊和交接器。图1雄性生殖系统FIG1THEMALEREPRODUCTIVESYSTEMOFHEMIFUSUSTERNATANUS311精巢在非繁殖季节细角螺的精巢为薄薄一层，颜色为淡黄色（图版1）；繁殖季节细角螺的精巢迅速增厚，有些与肝脏同厚，颜色变为淡黄色（图版2）。组织学观察发现细角螺精巢由许多树枝状的生殖管及生殖泡囊组成。生殖管反
48、复分枝，分枝末端膨大形成泡囊，生殖管及泡囊均可产生精子。精巢的外壁由单层柱状上皮、薄层平滑肌、薄层结缔组织组成（图版3）。精巢外壁向精巢内部延伸并逐渐变薄而成为了生殖管和生殖泡囊的外壁。生殖管和生殖泡囊的结构相似，外壁由生殖上皮组成，内部有精原细胞、精母细胞及精细胞。每个生殖管中的各个时期的生殖细胞分布相对较集中，这表明精子发生的区域同步化。精巢横切面观察，发现生殖管呈辐射状发散，生殖管在紧贴肝脏面汇合，形成输精集合管。312输精集合管输精集合管又叫输出集合管，是生殖管的集合体。外形上观察为土灰色微透明小管，宽约005CM，长约25CM，接通储精囊。组织学观察发现，其内部由输精小管和间质组织构
49、成，根据结构和功能的不同又可分为两部分。靠近精巢的输精小管内部结构和精巢内部相似（图版46），在繁殖期可观察到其内部成团的精子细胞。研究推断认为其不仅有输送精子的功能还具有自身产生精子的能力。靠近储精囊的输精小管已经逐渐融合成为一个大型的输精管道，内部结构发生了变化，其表现为第一，管壁出现松散的肌肉组织；第二，分化出具有纤毛上皮的内壁；第三，管壁向腔面形成6个花瓣状突起褶皱（图版7）。最接近储精囊段，输精管道的6个花瓣状突起褶皱突然消失，具有纤毛上皮的内壁依然存在（图版8）。313储精囊储精囊为一膨大的椭圆型结构，其颜色为土灰色，长约054CM，宽约039CM，紧贴于肝脏的内侧，附着于外套膜上。组织学研究观察发现整个储精囊可分为两部分，前半部分是一些管状结构，来回折叠在一起（图版910），由单层纤毛细胞构成，嗜碱性，染后显浅蓝色；后半部分组织强嗜酸性，染后显鲜红色（图版11，图版1）。储精囊由里向外依次分为分泌上皮、网状组织、上皮组织。分泌上皮褶皱较多，有密集的微绒毛（图版2）。上皮组织较薄，是单层柱状上皮，繁殖期管腔内有大量成团的精子出现（图版3）。314输精管输精管跨越了外套腔壁及颈部。依据输精管的附着部位、弯曲程度和外观颜色的不同，可把输精管分为3段，分别为输精管前段、输精管中段和输精管后段。输精管
