1、CIK细胞免疫治疗在恶性肿瘤中的应用,生物治疗病区丰恺超2014-3-10,汇报内容：,CIK免疫细胞的概念及抗肿瘤机制CIK免疫细胞的制备CIK细胞免疫治疗在各种恶性肿瘤中的应用生物治疗病区目前的工作及新技术的应用,免疫细胞治疗在肿瘤治疗中的概况,手术,放疗,化疗,免疫生物治疗,长期以来，部分从事肿瘤临床治疗的科学家认为免疫治疗是辅助治疗；但随着肿瘤免疫认识的深入，越来越多的资料提示免疫学因素是肿瘤治疗不可或缺的考虑因素,宿主免疫系统对肿瘤进展具有调控作用，肿瘤内有效免疫细胞的存在与预后直接关联，然而，多数化疗药对免疫细胞具有剿灭作用，从而限制了免疫细胞对肿瘤的对抗反应。,通过激发机体免疫反
2、应的抗肿瘤途径可能更有效与持久,免疫细胞治疗肿瘤的临床评价,30%,550,目前临床开展的免疫细胞种类:树突状细胞：DC细胞细胞毒性T细胞（CTL）GDTC细胞（abT）自然杀伤细胞：NK细胞细胞因子诱导的杀伤细胞：CIK细胞自然杀伤样T细胞:NKT细胞肿瘤浸润淋巴细胞 ：TIL细胞,CIK细胞的概念,细胞因子诱导的杀伤细胞（Cytokine induced killer cells），是一种新型的免疫活性细胞，是将人外周血中的单个核细胞在体外用多种细胞因子如IFN-、IL-1、IL-2、anti-CD3单抗共同培养一段时间后获得的一群异质细胞，主要由CD3+CD56+ 细胞和CD3+CD8+
3、 细胞两种细胞群构成，其中CD3+CD56+其主要的效应细胞，具有T淋巴细胞的强大抗肿瘤活性和非主要组织相容性复合体（MHC）限制性的特点，增殖速度快，杀瘤谱广，杀瘤活性高。,CIK的免疫表性,express both the T-cell marker CD3 and natural killer cell marker CD56 and non-MHC-restricted,CIK cells have intercellular adhesion molecule-l (ICAM-l).,CIK,CIK cells possess cytoplasmic granules, which
4、contain the protein perforin (cytolysin).,CIK cells are effective against FasL-positive malignant cells and cells with multidrug resistance (MDR),CIK cells can themselves secrete many cytokines, such as IL-2, TNF- a, GM-CSF and so on.,CIK cells migrated to tumor sites by the 7th hour after injection
5、 and remained detectable at these sites for an additional 9 days,CIK免疫细胞的抗肿瘤机制,CIK免疫细胞的制备,培养扩增前后淋巴细胞总数及比例变化,CIK细胞免疫治疗联合化疗的临床路径,化疗开始,-1 1 2 3 4 5 12 13 14 15 20 21 22（天）,化疗前1-3天抽血50ml,12-15天内回输CIK细胞,化疗结束,第二次化疗,抽血培养第2疗程CIK,IL-2（100-200万U）皮下注射或静滴7-10天,备注：1、必须于化疗开始前抽血；2、抽血前1周内忌糖皮质激素治疗；,CIK细胞免疫治疗在各种恶性肿瘤中
6、的应用,多次输注CIK在老年恶性血液病临床治疗中的实践,多次输注CIK在老年恶性大B淋巴瘤临床治疗中的实践,DC-CIK/CIK治疗肿瘤的“千人计划”,目前，我科共完成近2000余例，近10000人次,白血病微残非T淋巴瘤，骨髓瘤等肺癌卵巢癌等妇科肿瘤肝癌胃癌/结直肠癌等消化系统肿瘤肾癌、黑色素瘤等其他肿瘤肉瘤（无效）,CIK细胞免疫治疗存在的问题,1、到达肿瘤位置：发生接触效应，体内难以实现2、通过接触激发免疫细胞内的酶系统实际上，输注的免疫细胞到达肿瘤部位的很少，缺乏靶向性。,新技术：嵌合抗原受体T细胞（Chimeric antigen receptor, CART） 在恶性肿瘤中的应用,
7、嵌合抗原受体（CAR）为免疫细胞靶向性治疗提供可能,国外开展的CART细胞的相关临床试验,我科目前已开展的CART细胞治疗,N Normanno, C Bianco, et al. Endocrine-Related Cancer (2003) 10, 1-21,Expression of ErbB Receptor in Human Cancers,EGFR signal transduction in tumour cells,设计原理：EGFR抗体表位绑定在杀伤力强的CD8/CD56阳性(CIK主要成分)T细胞表面,1、靶向性；2、持续的杀伤性；3、酶系统激活,复发或难治性 实体瘤,基线
8、评估,实验室复核EGFR ECOG 2 血常规、IL-6 血生化 肿瘤标记物 胸腹部CT或PET/CT 细胞因子，送免疫室,靶病灶2cm,靶病灶2cm,-d10 -d7 0 d7 .1mon 2mon,采集单个核细胞,化疗,不化疗,回输期间注意事项：1. 持续心电监护2. 回输前30min异丙嗪、苯海拉明抗过敏预处理3. 回输过程中及回输后监测生命变化并记录，4. 详细记录发热、寒战等不良反应开始及持续时间5. 给予碱化、补液治疗，对症治疗,1.血常规2.血生化3.IL-64.细胞因子5.RT-PCR,免疫室,每月复查项目：1. 血常规2. 血生化3. 肿瘤标记物4. IL65. 细胞因子6.
9、 RT-PCR7. CT或PET/CT,CART-EGFR检查治疗流程图,CT或PET/CT复查,CR,PR或SD,PD,每月复查、随访,RT-PCR拷贝数,每月复查、随访,RT-PCR拷贝数,CART-EGFR again,新发肿瘤病灶,原病灶增大,更换方案,靶病灶穿刺活检,富含免疫细胞,无或少量免疫细胞,RT-PCR拷贝数,RT-PCR拷贝数,观察,CART-EGFR again,可CART-EGFR again或更换方案,CART-EGFR检查治疗流程图,PFS,SafetyToxicity,典型病例,患者李XX，女，55岁，2012年12月确诊左肺中低分化腺癌期、多发骨转移、肝转移、左侧胸腔积液，确诊后给予过化疗、放疗及吉非替尼等治疗，病情进展后于我科接受CART-EGFR免疫治疗，病情缓解，PFS：5.7个月，进展后复查病理，EGFR表达强度及比例明显降低，病理切片以EGFR阴性癌细胞为主。,影像学比较,CART前,CART后-1month,CART后-3month,影像学比较,CART前,CART后-1month,CART后-3month,CAR-EGFR T细胞治疗前后肿瘤细胞EGFR抗原表达变化,治疗前,治疗后,
