1、毕业论文开题报告食品质量与安全组胺降解菌PSYCHROBACTERSP的生理生化与分子鉴定一、选题的背景与意义在水产品的加工保藏过程中，组胺一经形成，高温、冷冻等加工手段都不能将其分解，因此其控制技术研究主要集中于加工前、加工中及加工后的各种物理、化学及生物保鲜和保藏手段，尽量减少游离氨基酸的生成、抑制腐败微生物的繁殖和蔓延、并规避氨基酸脱羧酶的最适作用条件。在捕捞和运输过程中，应确保酮体尽可能免受机械损伤并保持适宜的冷藏条件。在加工过程中，除常见保鲜措施外，可采用多种手段控制原材料和加工环境的卫生条件，如添加茶多酚可与鱼肉中的相关辅酶金属离子螯合、抑制蛋白酶的分解速度；添加溶菌酶制剂可抑制腐
2、败微生物的生长繁殖；添加葡萄糖氧化酶制剂可通过除氧抑制部分好氧腐败微生物的生长等等。另外，高盐环境可抑制大部分细菌的脱羧反应，而其它常规手段如真空包装、罐装过程的消毒措施等对组胺的抑制或消除并无明显作用。除上述组胺的间接控制技术外，还可开发组胺的微生物降解技术并应用于水产制品的生产过程。应用微生物控制降解技术，可有效的去除水产品中的组胺，具有生物反应的种种优点，如作用条件温和、反应迅速、节约能源、安全可靠等。但是目前对于水产品中组胺的微生物降解技术的研究，仍处于探索阶段。开展微生物组胺降解机制和控制技术的研究，不仅能避免因食用含高组胺水产品而引起的中毒，确保水产品的食用安全，还能促进水产品进出
3、口贸易的发展，是水产品加工行业亟待解决的问题。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题1鉴定组胺降解菌的生理生化特征配制生理生化鉴定的培养基，然后按各个鉴定原理对其进行VP试验、组胺降解试验等。2对该组胺降解菌进行分子鉴定将该组胺降解菌的DNA经离心、洗脱等步骤提取出来，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA，然后将目的基因进行PCR扩增，之后将DNA片段回收，最后将回收的DNA进行克隆和测序。3确定该组胺降解菌的属以及可能的种三、研究的方法与技术路线1依据微生物学实验（第4版）教材，对该组胺降解菌的生理生化研究。生理生化特性试验结果糖酵解试验淀粉水解试验甲基乙酞甲醇（VP）试验甲基红（METHYLRED）
4、试验靛基质（IMDOLE）试验硝酸盐（NITRATE）还原试验明胶（GELATIN）液化试验尿素酶（UREASE）试验2按照细菌基因组DNA提取试剂盒说明书提取目的菌株的基因组DNA，进行PCR扩增，随后采用16SRRNA测序技术将,获得的16SRRNA序列在NCBI上用BLAST软件与GENBANK数据库序列进行对比与同源性比较。四、研究的总体安排与进度2010年11月12月查阅资料，确定试验方案，写开题报告与文献综述。2011年1月2月仪器、实验材料的准备，并翻译两篇外文文献。2011年3月4月对菌株做生理生化以及分子鉴定。2011年5月分析讨论实验结果，整理总结手中资料，完成本科毕业论文
5、。五、主要参考文献1陶志华,佐藤实海水中组胺菌的分离及其理化性质分析J生物技术,2009,19142442沈萍,陈向东微生物学实验（第4版）M高等教育出版社,20073王震,杨媚,杨迎青等广东省柑橘炭疽病病原菌的形态与分子鉴定J菌物学报,2010,2944904924RE布坎南NE吉本斯伯杰细菌鉴定手册（第8版）M北京科学出版社,19847607905龙雯,陈存社16SRRNA测序在细菌菌种鉴定中的应用J北京工商大学学报（自然科学版）,2006,24510126李鹏,马艳娇,赵云16SRRNA、23SRRNA及16S23SRRNA基因在细菌分离与鉴定中的应用J现代畜牧兽医,2008,74951
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8、939039118潘峰,王平,胡正嘉等利用16S23SRDNARFLP及16SRRNA基因序列分析方法对湖北省饭豆VIGNAUMBELLANTAL根瘤菌系统发育的研究J应用于环境生物学报,2007,131788219苏乾莲,黄维义,张为宇等奶牛温氏支原体16SRRNA基因的PCR扩增、克隆及分析J中国兽医寄生虫病,2008,16601520XIAOYANGZHI,LINGLINGYANG,YUNWANG,ECTGENUSSPECIFICPCRFORMOLECULARIDENTIFICATIONOFNOVELISOLATESOFTHEGENUSNESTERENKONIAJACTAMICROBIO
9、LOGICASINICA,2008,48564464521何亮,熊礼宽,曾忠铭乳杆菌的分类与分子鉴定方法研究进展J中国微生态学杂志,2007,19331231322JOSELB,IGNACIOB,IMANOLRZ,ETALSEQUENCINGOFVARIABLEREGIONSOFTHE16SRRNAGENEFORIDENTIFICATIONOFLACTICACIDBACTERIAISOLATEDFROMTHEINTESTINALMICROBIOTAOFHEALTHYSALMONIDSCOMPIMMUNMICROBIOLINFECTDIS2007,3011111823焦振泉,刘秀梅细菌分类与鉴定的新热点16S23SRDNA间区J微生物学通报,2001,281868824李红,周友兵,陈炳耀等分子生物学技术在微生物多样性研究中的应用J河北大学学报（自然科学版）,2003,23445145225董慧明,张颖,张德民等DNA指纹图谱技术在土壤微生物多样性研究中的应用J微生物学杂志,2007,271454826卢莉琼,徐亚同,梁俊分子生物方法在微生物多样性及微生物生态研究中的应用J应用于环境生物学报,2004,106826830
