1、 本科 毕业论文 (设计 ) 题 目： 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 学 院： 学生姓名： 专 业： 水产养殖 班 级： 指导教师： 起 止 日期： 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 1 目 录 中文摘要 . 1 英文摘要 . 2 1. 前言 . 3 2. 材料和方法 . 6 2.1.实验鱼及驯养 . 6 2.2 实验设计和养殖管理 . 6 2.3 实验饲料 . 7 2.3.1 实验饲料配方 . 7 2.3.2 实验饲料的制作 . 7 2.4 样品采集 . 8 2.5 成分分析 . 8 2.
2、5.1 水分测定 . 8 2.5.2 粗蛋白的测定 . 8 2.5.3 粗脂肪测定 . 9 2.5.4 灰分测定 . 9 2.6 数据分析 . 9 3. 结果 . 9 3.1 生长表现和饲料利用 . 9 3.2 生物学数据 . 10 3.3 饲料中不同糖类、脂肪水平对日本黄姑鱼鱼体、肌肉和肝脏成分的影响. 11 4.讨论 . 11 5.小结 . 12 致谢 . 12 参考文献 . 14 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 1 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 摘要 ： 以鱼粉为蛋白源， 玉米淀粉为
3、糖源，配制等蛋白质 ( 含量为 39.65 0.22%) 等能（ 14.32 0.17kJ/g），糖脂比分别为 2.80、 1.73、 0.91、 0.42 ( 标号分别为 C1、 C2、 C3、C4) 的 4 组配合饲料，每组作 3 个平行，每个平行 18 尾 (Nibea japonica)，投喂 63d， 研究了饲料中糖脂比变化对体重为 2.02 0.03g 的日本黄姑鱼生长、体成分和生物学指标的影响 。结果显示， C4 组实验鱼的终末鱼重（ FBW）、增重率 (WG)、特定生长率 (SGR)和蛋白质效率 (PER)最高，分别是 24.96、 1121.91%、 3.29%和 2.12，
4、并且拥有最小的饲料系数 (FCR) 和日饲料摄入量（ DFI），为 1.20 和 3.23；不同饲料处理显著影响着脏体比（ VI）、肠脂比（ IPF）和丰满度（ CF），但对肝体比（ HSI）基本没有影响；不同饲料处理对日本黄姑鱼全鱼水分、蛋白、脂肪和灰分均有显著性影响（ P麦芽糖 蔗糖 =糊精 =玉米淀粉 半乳糖 =果糖 =纤维素，白鲟对分子构型越简单的糖类利用能力越强 27。 Anderson 等 ( 1984)发现，当葡萄糖、糊精、 -淀粉在饲料中含量分别为 10 %、 25 %、 40%时，罗非鱼生长均随饲料糖水平升高而加快；在 10 %水平，葡萄糖组节约蛋白质的效果好，优于 40 %
5、水平，也就是说，当饲料糖水平较低时，罗非鱼对小分子糖利用能力较强，而当饲料糖含量高时，罗非鱼利用大分子糖效果好 28。 大量研究表明，饲料中添加适当糖类可以促进鱼类的生长及对饲料的利用效率，发挥其“蛋白质节约效应” 29。研究还发现，肉食性鱼类比草食性和杂食性鱼类的蛋白质节约效果差 30。可是当肉食性鱼类得饲料蛋白质保持 在一定水平的基础上时，添加低水平可消化糖也能促进其生长 31。一般认为，蛋白质节约效应与葡萄糖是神经组织和血细胞的优先氧化底物有关，同时饲料中可消化糖的存在可抑制鱼类的葡萄糖异生作用，由此减少了氨基酸的氧化分解。虽然糖类可以在一定程度上起到节约蛋白质的作用，但饲料糖含量应保持
6、在适宜范围内，过量的糖会对鱼体产生代谢负荷，危害鱼体免疫和健康，不利于其生长和对饲料的利用。鱼类饲料糖的最适水平应以鱼体摄入的可消化糖能够被完全氧化供能，产生蛋白质节约效应为宜，而对糖类的耐受水平应以不损害鱼体生长状况或增加死亡率为宜 32。在实际生产中，对于不同的养殖品种，饲料中加入合适的糖，最终的目的就是为了使糖尽可能的代替蛋质成为能量物质，降低蛋白质转化为能量的比率，从而降低饲料成本，以利于鱼类的健康和取得更好的经济效益。 目前，鱼饲料中主要的蛋白源是鱼粉，但是随着全球养殖业的不断发展，全世界的鱼粉产量却并没有增加，结果是鱼粉需求和竞争的增加，鱼粉的价格升高，导致养殖成本不断提高。很显然
7、，节约饲料中蛋白质的用量将大大节省饲料成本，提高养殖效益。所以，鱼类营养学中 非蛋白能量饲料原料对 鱼类饲料蛋白节约效应的研究将依然会是一个重要的研 究方向。 日本黄姑鱼 Nibea japonica(Temminck et Schlegel)俗称黑毛鲿，属鲈形目，石首鱼科，白姑鱼亚科，黄姑鱼属。主要分布于中国东海及日本南海，往北不超过北纬 36。日本黄姑鱼体形酷似鮸状黄姑鱼。体延长侧扁，背腹部浅弧形；头中等大，侧扁尖突。体背部黑褐色，腹部银白色，胸鳍腋部具 1 黑斑，眼后头长明显短。日本黄姑鱼常栖息于水深 100m 以内的沿非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长
8、及体组成的影响 6 岸浅海区的中下层，生活在砂泥质海区，对盐度的适应范围较广，但对低水温耐受力较差，当水温小于 7时，将对日本黄姑鱼有生命威胁。日本黄姑鱼 为肉食性鱼类，摄食能力很强。仔鱼期浮游生活在表层，主要以轮虫等微小浮游动物为食；稚、幼鱼期向下层活动，主要以桡足类、糠虾、鳞虾等为食；成鱼以小鱼、甲壳类和其它动物为食。日本黄姑鱼雄性性成熟需 3 年，雌性性成熟需 4 年，雌雄鱼性别特征不明显。 日本黄姑鱼的首次人工育苗是在 1985 年由日本由宫崎栽培渔业中心岩田一夫进行的。国内如国家海洋局第一海洋研究所、浙江省海洋水产研究所、福建闽东水产研究所、河北水产研究所等先后报道过日本黄姑鱼亲鱼选
9、育、人工繁殖及苗种培育等研究结果，并发表了相应论文。楼宝等（ 2002） 33对 日本黄姑鱼进行了养殖试验，结果显示：经 5.5 个月的池塘养殖，个体平均体长达 31.1cm、体重 515.0g，养殖成活率为 82.85；经 5.5 个月的网箱养殖，个体平均体长达 31.1cm、体重 438.8g，养殖成活率 81.66；经 25 个月的池塘养殖，平均体长达54.0cm、体重 2700.0g。柴学军等 34研究了日本黄姑鱼适宜育苗条件，日本黄姑鱼的孵化时间受水温、盐度等条件影响，其中水温是最重要的影响因子。在水温 16.8、盐度 29.9 的条件下，受精卵经 53h 后孵化出膜；在水温 222
10、3.5、盐度 3033 的条件下，受精卵孵化时间则大大缩短，仅需 29 h。配合饲料相比鲜活饲料具有健康环保、来源稳定和营养全面的优势。HaeYoung Moon Lee 等 35研究得到日本黄姑鱼饲料中最适蛋白比例 45%，而低于 40%时不利于鱼体生长。柴学军等 36更是已经将配合饲料成功应用于日本黄姑鱼大规模人工育苗中，效果显著。 目前，我国海水鱼类养殖业不断发展，特别是深水抗风浪网箱养殖，养殖鱼种也不断增多，但只有少数鱼类品种获得了良好的养殖结果。因此，开发生长快、病害少、养殖成本低、养殖周期短、特别适合目前发展的深水网 箱养殖的大型优质鱼类势在必行。日本黄姑鱼为大型食用鱼类，最大的个
11、体可以达到 1.5 米以上，其肉味鲜美，营养丰富，适应不良环境和抵御疾病能力强，饵料系数低，生长迅速，易于养殖，养殖周期短、一年即可养成 1 公斤商品鱼，大大降低了养殖风险。所以日本黄姑鱼深受广大养殖户欢迎，有望成为我国重要的新养殖品种之一，并已经逐渐形成了产业化趋势。有关日本黄姑鱼的生物学特性、人工育苗、养殖等方面的研究已有不少，但对其饲料蛋白质节约效应的研究尚未见相关报道。本文主要研究了日本黄姑鱼饲料中不同糖脂比对蛋白质的节约效应，以期为研发更加合 适的日本黄姑鱼人工配合饲料提供科学依据。 2. 材料和方法 2.1.实验鱼及驯养 实验地点位于浙江海洋学院西校区海水养殖实验室。实验用的日本黄
12、姑鱼幼鱼来自西轩岛浙江省海水增养殖基地。实验开始前两星期将获得的日本黄姑鱼幼鱼放入特定的养殖桶中，养殖桶为半径 60cm 深 100cm 的蓝色圆形塑料桶，用实验用基础饲料暂养，以使其适应养殖环境和养殖饲料，尽量消除实验鱼的应激性。 2.2 实验设计和养殖管理 待实验鱼适应养殖环境与摄食稳定之后，挑选健康且规格相似的日本黄姑鱼幼鱼，随机分配到 12个养殖实验桶（水体体积为 1m3）中，每桶 18尾幼鱼，幼鱼的初始体重为 2.01 0.03g/尾。实验开始前实验鱼饥饿处理 24h。 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 7 实验运用室内水循环系统，采
13、用流水养殖模式， 24 小时连续充气，养殖用的海水来自浙江省舟山市水产研究所，经过滤池，暗沉淀池，沙滤池过滤。实验期间人工控制光照，早上 6点开灯，晚上 6 点关灯。养殖用水的生化条件分别为： 水温 30.8 0.4、溶解氧大于 7mg /L、pH 7.7 0.2、总氨氮在适宜范围内、盐度 27.8 0.2。 每次投饵量以饱食为准，每天投喂 2次（上午 8： 00 和下午 16： 00）。记录死亡鱼的数量和体重。 实 验从 2011年 7月 25 号到 2011年 9 月 25 号，历时 63 天。 2.3 实验饲料 2.3.1 实验饲料配方 实验饲料配方如表 2-1 所示，实验设置了四个处理
14、组，每组三个平行，每组之间等蛋白等能，实验基础饲料使用鱼粉作为完整蛋白源，鱼油和玉米淀粉用来调节饲料脂肪和糖类的含量。其中 C1、 C2、 C3 和 C4 分别表示含有不同糖脂比（ 2.80、 1.73、 0.91、 0.42）的饲料组。 2.3.2 实验饲料的制作 将各种干饲料原料粉碎，过 60目筛，按配方表中的比例将粉料称重预混合，称料顺序为先称小料后称大料，以保证混合均匀，然后放 入搅拌机中搅拌，加入所需的鱼油和大豆磷脂，继续搅拌，接着加入适当的水使原料成团，在此过程中，用 6mol/L的 NaOH调节饲料的 PH，使PH为 7。然后用 双螺杆挤压式制粒机（ CD4 1TS）制粒，制成直
15、径 1.2毫米和 2.0毫米的实验饲料，用电热恒温鼓风干燥箱 (DGG-9123A) 烘 至水分含量低于 10%，温度为 50 ，最后用密封袋储存于 -20的冰柜中备用。每批每组必须取若干克样料做分析，以确定其实际成分。 表 1 实验饲料组成成分分析 Table.1 Composition and proximate analyses of the experimental diets (as fed basis) (g/100g dry diets) 组号 C1 C2 C3 C4 糖脂比 2.80 1.73 0.91 0.42 鱼粉 64 64 64 64 大豆磷脂 1 1 1 1 鱼油 0
16、 1.59 3.59 5.59 玉米淀粉 15.15 12.15 8.36 4.61 VC 1 1 1 1 胆碱 0.5 0.5 0.5 0.5 维生素预混料 2 2 2 2 矿物预混料 3 3 3 3 CMC 2 2 2 2 微晶纤维素 11.15 12.56 14.35 16.1 牛磺酸 0.2 0.2 0.2 0.2 营养组成 Wt 蛋白质含量 39.51 39.78 39.42 39.89 脂肪含量 5.41 7.03 9.14 11.05 糖含量 15.15 12.15 8.36 4.61 非蛋白能量饲料原料对日本黄姑鱼 (Nibea japonica)生长及体组成的影响 8 能量
17、14.13 14.24 14.38 14.52 灰分 13.38 13.19 13.22 13.31 复合维生素 -g/kg 混合物 :硫胺素 5.0； 核黄素 5.0； 吡哆醛 4.0； 尼克酸 20.0； 泛酸钙 10.0； 生物素 0.6； 叶酸 1.5； 肌醇 200.0； 维生素 E 40.0； VA 5.0； B1 20.0； VK3 4.0； VD3 4.8； 纤维素 700.1。 复合矿物盐 g/kg 混 合物： 磷酸二氢钙 122.87； 乳酸钙 474.22； 磷酸二氢钠 42.03； 硫酸钾 163.83；硫酸亚铁 10.78； 柠檬酸铁 38.26； 硫酸镁 44.19
18、； 硫酸锌 4.74； 硫酸锰 0.33； 硫酸铜 0.22； 氯化钴 0.43； 碘酸钾 0.02； 氯化钠 32.33； 氯化钾 65.75。 2.4样品采 集 在实验开始前一天，随机选取 30条幼鱼作为初始样，随机分为三组，测定幼鱼全鱼的初始成分。实验结束前，对实验鱼进行饥饿处理 24h，以桶为单位进行计数和称重，获得相应的生长数据。从每桶实验鱼中随机取出 6尾在 -76下 储藏留作全鱼分析。再取 6尾实验鱼进行解剖处理，取内脏、肝脏、背肌和体脂，以获得相应的生物学指标。最后将肝脏和背肌样品储藏于 -76的超低温冰箱中， 用于成分分析。 2.5成分分析 首先测定所有样的水分，然后对实验饲
19、料原料、实验饲料和样品进行干物质粗蛋白质、粗脂肪和灰分的分析，为了使实验更加标准， 遵循 AOAC(1995)的标准方法， 均。 2.5.1 水分测定 取饲料或样品，置于已称重的恒重称量瓶中，称得样品与称量瓶总的重量，记录称量瓶的重量和样品与称量瓶总的重量，将样品与称量瓶放在烘箱中干燥至恒重为止，温度设为110。接着取出称量瓶和干燥后的样品置于干燥器皿中，待其冷却至室温后，称重并记录。记入完后马上粉碎，装入密封袋中放置于 -77的超低温冰箱中保存待用。 计算公式： 水分（ %） =100*（ W1-W2） /(W1-W0) 其中： W0 称量瓶重量（ g） W1 称量瓶重量 +样品重量（ g）
20、 W2 干燥至恒重后瓶 +样品的重量（ g） 2.5.2 粗蛋白的测定 依照 Micro Kjeldahl（ AOAC）方法进行，称取样品约 0.5g，然后加入 3g 硫酸钾、 0.5g硫酸铜及 10ml 的浓硫酸于消化管中，将消化管置于已经预热的消化仪器（ BUCHI Distillation Unit K 355）中，盖上抽气头，打开水流并加热（约 420）消化液至消化管内澄清碧绿后，提升消化管停止加热冷却至室温，然后将每支试管依次装入蒸馏仪器（ Digest Automat K438）中，按照预先设定好的程序先加入适量蒸 馏水进行稀释，然后加入适量 40%NaOH，接着以含有溴甲酚绿和甲基红指示剂的 4%硼酸 50ml 收集 5min 氨气，最后用标定过的 Hcl 滴定至溶液呈微红时达滴定终点，记录滴定量。 计算公式： 蛋白质含量（ %） =100*（ B-A） *14.00*6.25*N/(M*1000)
