1、医学微生物学实验四,主要内容:,录像(肠道杆菌分离与鉴定)肠道杆菌形态、培养特性及生化 反应粪便标本分离与鉴定肥达氏反应,一、肠道杆菌形态、培养特性及生化 反应 1. 形态: 大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌 2. 培养(中国兰平板) 大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆 菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌,3. 生化反应: (示) 双糖铁基培养基 尿素培养基 蛋白胨水培养基,双糖铁基培养基,半固体培养基,固体斜面培养基,成分:硫酸亚铁铵硫代硫酸钠乳糖酚红,H2S试验,乳糖发酵试验,成分:琼脂(0.35%)(动力观察)蛋白胨水葡萄糖酚红,葡萄糖发酵试验,3. 生化反应: (示) 双糖铁基培养基 尿素培养基 蛋白胨
2、水培养基,尿素培养基,成份:20%尿素水溶液 0.6%酚红溶液原理 尿素酶分解尿素产氨气,二、肠道杆菌分离鉴定步骤,镜检( G+球菌)培养( G+球菌)生化反应( G-杆菌)血清学诊断动物实验核酸诊断等快速诊断,细菌检查常用的鉴定方法:,二、肠道杆菌分离鉴定步骤 1.粪便中国兰平板 兰色、较大、不透明菌落- 大肠菌 无色、较小,半透明菌落- 致病菌 2.生化试验: 双糖铁基、尿素、吲哚 3.血清诊断,三、肥达氏反应 1.原理: 根据凝集反应的原理,用已知的标准菌液(伤寒杆菌菌体及鞭毛抗原,甲型副伤寒 杆菌鞭毛抗原及乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原)测定病人血清中有无相应抗体存在,以协助伤寒,副伤寒病的诊
3、断。,2.抗原:伤寒菌“O”、伤寒菌“H”、 副甲“H”、副乙“H” 3.方法,1:2560,O抗原,伤寒H抗原,副甲H抗原,副乙H抗原,4.凝集判断(上清液、沉淀)“”:强,完全凝集,液体澄清,轻摇大片凝 集块。 “”:大部分凝集,液体轻度浑浊,凝集块 小。 “”:中强,部分凝集,液体半澄清,凝集块 颗粒状。 “”:弱,少量凝集,液体浑浊。 “”:不凝集,液体浑浊,和对照相同。,+ +,+ + ,+ ,+ + ,5、凝集效价,能出现明显凝集(+)的血清最高稀释度例:测定某病人O凝集效价结果如下: 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560+ + + + + + -,6.结果分析正常抗体水平O与H抗体在诊断上的意义:,O抗体,H抗体,