1、磁共振波谱成像的基本原理、序列设计与临床应用磁共振波谱(MR Spectroscopy， MRS)是医学影像学近年来发展的新的检查手段，作为一种无创伤性研究活体器官组织代谢、生化变化及化合物定量分析的方法，随着 MRI、MRS 装置不断改进，软件开发及临床研究的不断深入，人们通过 MRS对各种疾病的生化代谢的认识将不断提高，为临床的诊断、鉴别、分期、治疗和预后提供更多有重要价值的信息。1H MRS 可对神经元的丢失、神经胶质增生进行定量分析，31P 磁共振波谱可对心肌梗塞能量代谢变化进行评价。MRS 以分子水平了解人体生理上的变化，从而对疾病的早期诊断、预后及鉴别诊断、疗效追踪等方面，做出更明
2、确的结论。本文从MRS波谱成像的基本原理和序列设计方面简要作一介绍。一 磁共振波谱的基本原理在理想均匀的磁场中，同一种质子(如 1H)理论上应具有相同的共振频率。事实上，当频率测量精度非常高时会发现，即使同一种核处在相同磁场中，它们的共振频率也不完全相同，而是在一个有限的频率范围内。这是由于原子核外的电子对原子核有磁屏蔽作用，它使作用于原子核的磁场强度小于外加磁场的强度，其屏蔽作用大小用屏蔽系数 s来表示，被这种屏蔽作用削弱掉的磁场为sB，与外加磁场方向相反。外加磁场越强 sB越大，原子核实际感受到的磁场强度与外加磁场强度之差越大。此外，s 还与核的特性和化学环境有关。核的化学环境指核所在的分
3、子结构，同一种核处在不同的分子中，甚至在同一分子的不同位置或不同的原子基团中，它周围的电子数和电子的分布将有所不同。因而，受到电子的磁屏蔽作用的程度不同，如图 1所示。考虑到电子的磁屏蔽作用，决定共振频率的拉莫方程应表示为:w=gBeff=gB0(1-s)由上式可知，在相同外加磁场作用下，样品中有不同化学环境的同一种核，由于它们受磁屏蔽的程度(s 的大小)不同，它们将具有不同的共振频率。如在 MRS中，水、NAA(N-乙酰天门冬氨酸)、Cr(肌酸)、Cho(胆碱)、脂肪的共振峰位置不同，这种现象就称为化学位移(Chemical Shift)。即因质子所处的化学环境不同，也就是核外电子云密度不同
4、和所受屏蔽作用的不同，而引起相同质子在磁共振波谱中吸收信号位置的不同，如图 2所示。实际上，研究某种样品物质的磁共振频谱时，常选用一种物质做参考基准，以它的共振频率作为频谱图横坐标的原点。并且，将不同种原子基团中的核的共振频率相对于坐标原点的频率之差作为该基团的化学位移。显然，这种用频率之差表示的化学位移的大小与磁场强度高低有关。在正常组织中，代谢物在物质中以特定的浓度存在，当组织发生病变时，代谢物浓度会发生改变。磁共振成像主要是对水和脂肪中的氢质子共振峰进行测量和脂肪中的氢质子共振峰进行测量，在 1.5T场强下水和脂肪共振频率相差 220Hz (化学位移)，但是在这两个峰之间还有多种浓度较低
5、代谢物所形成的共振峰，如 NAA、Cr、Cho 等，这些代谢物的浓度与水和脂肪相比非常低。MRS 需要通过匀场抑制水和脂肪的共振峰，才能使这些微弱的共振峰群得以显示。下面是研究 MRS谱线时常用到的参数:(1)共振峰的共振频率的中心峰的位置 V: 化学位移决定磁共振波谱中共振峰的位置。(2)共振峰的分裂。(3)共振峰下的面积和共振峰的高度: 在磁共振波谱中，吸收峰占有的面积与产生信号的质子数目成正比。在研究波谱时，共振峰下的面积比峰的高度更有价值，因为它不受磁场均匀度的影响，对噪音相对不敏感。(4)半高宽: 半高宽是指吸收峰高度一半时吸收峰的宽度，它代表了波谱的分辨率。原子核自旋磁矩之间的相互
6、作用称为自旋自旋耦合。高分辨率磁共振频谱可以观察到自旋自旋耦合引起的共振谱线的裂分，裂分的数目和幅度是相互耦合的核的自旋和核的数目的指征。在一个氢核和一个氢核发生自旋耦合的情况下，由于一个氢核的磁矩有顺磁场和逆磁场两种可能的取向，因此它对受耦合作用的氢核可能产生两个不同的附加磁场的作用，这引起受耦合的氢核的共振由一个单峰分裂为二重峰。如此类推，在两个氢核和一个氢核发生耦合的情况下，共振谱由一个分裂为三个。磁共振波谱仪不仅可以描绘频谱，还可以描绘频谱的积分曲线，积分曲线对应共振峰的面积。峰的面积反映一个原子基团中参与磁共振的核的数量。比较频谱中各个峰的面积能确定出不同分子或原子基团中产生共振的核
7、的相对数量。将各共振峰的相对面积与参考标准进行比较可以推算样品分子或化学基团中共振核的绝对数目。众所周知，磁共振研究的核首先必须具有磁矩。这就排除了有偶数质子和偶数中子的核如 16O和 12C等。另外，有两个自旋状态的核最便于研究，满足这个条件的核有 1H、31P、19F 和 13C。其中，19F 和 13C在人体中含量很小，大多数研究必须在接纳用 19F或 13C增浓的物质条件下进行，1H在人体内的含量最高，但人体组织极强的水信号往往导致频谱中水共振频率两侧其他生化物质的微弱信号被淹没。由于这种原因，31P 频谱研究得到最早应用，并在活体频谱研究中占居首要地位。MRI尽量去除化学位移的作用，
8、并突出反映组织间 T1、T2 的差异，而 MRS恰恰要利用化学位移的作用来确定代谢物的种类和含量。MRS 的敏感性较低，因为代谢物的浓度较低，产生的信号几乎是正常 MR成像中水信号的万分之一，需要重复多次采集才能得到信号，所以需要更多的扫描时间，限制了 MRS测定代谢物浓度变化的时间分辨率。由于活体中组织水浓度比代谢物的质子浓度大几个量级，所产生的信号也大很多，并且由于MRI的接收机增益动态范围有限，必须抑制水峰，才有可能观察到微弱的代谢信号，常用 CHESS (CHEmical Shift Selective suppression)方法抑制水峰，大部分 CHESS技术是使用一种窄带频率选择
9、性 90?RF脉冲激发水峰，之后可激发测量代谢物的质子 MR谱，也可以躲开水的频率，使激发频谱中不包含水的频率成分，只激发代谢物的质子进行谱测量。另外一种有效的抑制水的方法为WET(Water suppression Enhanced through T1 effects)，该方法利用 180度脉冲反转 VOI内水磁化强度，当水磁化强度穿越零点时，用 90度脉冲激发 VOI内样品，进行质子 MRS测量，这时水将不贡献信号。另外匀场技术(Shimming)在 MRS技术中也占有很重要的位置，波谱的信噪比和分辨率部分决定于谱线线宽，谱线线宽受原子核自然线宽及磁场均匀度的影响，内磁场的均匀度越高，线
10、宽越小，基线越平滑。1H 谱用水峰的半高宽来检测磁场的均匀性，由于磷的代谢产物化学位移范围较宽，故对匀场的要求不如氢谱高。首先在病人进入磁场之前对较大范围进行匀场，但确定 VOI后再进一步对 VOI匀场。方法是通过逐步调整 X、Y、Z 三个轴方向上的梯度线圈内电流使产生的自由感应衰减(Free Induced Decay，FID)达到最慢来实现。二 MRS 的定位技术和脉冲序列设计在实际临床工作中，我们需要获得的是一个组织器官特定部位的正常或是异常组织的波谱信息。这一特定的部位可以是一个层面、层面中的条块、或是一个立方体。根据选择这一区域的方式不同，磁共振波谱的采集方式可以分为三种: 第一种是
11、利用表面线圈的射频场非均匀的获得局域波谱，这种技术简单，但它局限于采集靠近体表的解剖区域的波谱，也不能灵活的控制区域形状和大小; 第二种方法是通过 MR图像确定感兴趣区，然后利用磁场梯度和射频脉冲结合进行选择激励; 第三种是化学位移成像，也是一种需要利用磁场梯度的定位技术。1. 射频梯度定域频谱技术(FID 方法)表面线圈的射频场在与表面线圈平面垂直的方向存在梯度。这可以利用来建立信号的等效相位编码，将表面线圈设置到所要研究的组织区域附近，用非选择性射频脉冲进行激励，所采集的 FID信号将包含整个表面线圈的灵敏区域的信号。灵敏区域的尺寸决定于线圈的半径。由于表面线圈的射频场存在梯度的原因，自旋
12、磁矩的翻转角便同它们沿梯度方向的位置有关。这使沿射频场梯度方向不同位置的自旋的 MR信号具有不同的相位。改变射频脉冲的长度反复进行射频激励和信号采集，每次采集的信号是与不同的位置对应的不同相位的信号的总和。这些信号经过数据处理可以得到信号相位和信号位置唯一对应关系的一组数据。这组数据经两维傅立叶变换便产生一组与表面线圈平面平行的层面的频谱。其中，每个层面的频谱对应于一个由射频场的等高(强度)面划定边界的解剖区域。这个方法不是仅获取一个层面区域的频谱，而是从包括一组层面的整个体积范围获取一组频谱。这个方法不用梯度磁场，因此不存在涡流磁场的影响。2. 单体素 MRS的序列设计a. 点分辨自旋回波波
13、谱(Point-Resolved Echo Spin Spectroscopy，PRESS)点分辨自旋回波波谱由 90度180 度 180 度脉冲和三个正交梯度组成，入图 4所示，采集第二个回波，并且只采集回波的后半部分。第一个 RF脉冲配合层面选择梯度，激发了选定层面内的所有核磁子; 第二个 RF脉冲配合在一个垂直于选定层面选择梯度共同作用，结果只有位于这两个垂直平面相交部分的一列核磁子激发并由于 180度脉冲的作用而重新聚集； 第三个 RF脉冲，并配合一个与前两个层面都相垂直的层面选择梯度，最后只有 3个垂直平面相交叉的体素能够被激发并得到回波。与快速自旋回波的形成过程不同，为了避免 18
14、0度脉冲的不标准情况，在 PRESS中是在 180度RF的周围施加矫正梯度，以去除因为 180度不标准而引起的信号丢失。b. 受激回波采集方式(STimulated-Echo Acquisition Mode，STEAM)STEAM由三个 90度选层脉冲构成，如图 5所示，各个脉冲都是在正交梯度存在情况下相继加到样品上，于是在三个层面相交处一个体元内(VOI)产生受激回波(STimulated-Echo，STE)信号。第一个 90度激励脉冲配合层面选择梯度，激发选定层面内的所有核质子； 第二个 90度 RF脉冲的作用下，位于 XY平面的磁化矢量被翻转并位于 XZ平面内; 第三个选择性 90度脉
15、冲激励使所有的核质子翻转到 XY平面内，并再次经过 TE/2时间重聚相位形成回波，其信号的强度是 PRESS方法的一半。其选择性很强，可以达到单数据采集，因其 TE时间短，通常为 2030ms，适用于观察短 T2的代谢产物。3. 化学位移成像的序列设计化学位移成像(Chemical Shift Imaging，CSI)也称频谱成像(Spectros-copy Imaging，SI)，是着眼于特定化学位移采集频谱的技术，反映代谢物在层面内分布的图像。化学位移成像是多体素成像技术，它利用磁场梯度只对信号进行相位编码，在没有任何梯度场的条件下采集信号，如图 6所示。检测到的频率偏移只反映不同化学位移
16、的频率差和场的非均匀性的影响，从而将化学位移信息与空间位置信息分开。采集的数据经过傅立叶变换重建产生一个三维数据组，由两维空间信息加上化学位移信息组成。MRSI 方法的特点有: 在同一个时间段内可以获得多个数据，其效率大大增加。数据以图像和波谱的形式在一幅图中表现出来，而且感兴趣区不用在扫描前就确定。在 CSI方法中，相位编码可以采用三种方式，如图 7。图 7a、7b 分别就 CSI序列中相位编码方式以及与扫描时间、SNR 之间的关系示意。三 磁共振波谱的临床应用临床波谱学的一个重要方面是可以对代谢产物进行定量分析。利用波谱峰的高度和峰的宽度计算峰下面积，代谢物的峰下面积与所测的代谢产物的含量
17、成正比。主要有三种定量方法: 绝对定量、半定量和相对定量。绝对定量的方法为: 将已知含量的化合物作为外标准，内标准用内生水来计算代谢物的浓度，用其峰下面积来校正代谢产物的峰下面积，计算出代谢产物含量的绝对值; 半定量是直接测峰下面积; 相对定量是代谢物峰下面积的比值。活体定域脑组织的 MRS检查可显示脑组织代谢和生物化学改变。其中 1HMRS能检测脂肪、氨基酸、酮体和乳酸等生物重要代谢物质，31PMRS 用于能量代谢的检查，并可测定组织的 pH值。此外，13CMRS可检测葡萄糖无氧酵解过程，而 23Na和 39K的 MRS则可观察钾、钠离子动力学变化。作为一种研究工具 MRS已经成熟，正进入临
18、床应用阶段，敏感度较低为其主要缺点。MRS在海马硬化的诊断中有极其重要的应用。虽然 MRI通过对海马容积的测定可有效诊断海马硬化，但对于轻微海马硬化或病理改变严重但体积变化不明显的病人以及海马神经元缺失后胶质细胞增生导致海马体积变化不大的情况，则不能有效确诊。研究证明，几乎所有 NAA均存在于神经元内，成熟的胶质细胞中不含 NAA，而 Cr和胆碱 Cho主要位于胶质细胞内。只要存在神经元缺失的病理改变，就会表现为 NAA/(Cr+Cho)的减少。MRS 可以探测出以上物质的含量，通过计算即可早期发现海马硬化。MRS 和 MRI分别从不用角度反映海马硬化的特点，互相补充，提高海马硬化的诊断敏感性。
