1、基因工程(三)九、目的基因的高效表达(一)、基因表达的基础知识(二)、原核生物基因表达的基本特点(三)、提高目的基因高效表达的途径(四)、目的基因高效表达规律(一)、基因表达的基础知识1 概念:1-1 以 mRNA为模板的蛋白质合成过程称为翻译或转译1-2 mRNA: 从 DNA到蛋白质的信息传递载体1-3 遗传密码 :3个碱基编码一个氨基酸,这三个碱基被称为三联体密码或密码子2 核糖体:合成蛋白质的 “工厂 ”核糖体由两个亚基构成,一个较大,一个较小原核生物原核生物核糖体30S亚基 50S亚基21种蛋白质 16SrRNA 34种蛋白 5SrRNA 23SRNA真核生物核糖体40S亚基 60S
2、亚基30多种蛋白质 18SrRNA 50多种种蛋白 5SrRNA 28SRNA3.蛋白质的合成机理(以原核生物为例)肽链延伸的方向: N末端 C 末端mRNA的翻译方向: 53 方向tRNA识别密码子,并转运氨基酸合成的起始:大肠杆菌中被翻译的第一个密码子往往是 5端的第 25个核苷酸以后,起始密码子: AUG,偶有 GUG,在上游约 10个 bp的地方往往有一段富含嘌呤的序列( SD序列),它与 16SrRNA3端互补。合成的步骤:新进入的酰胺 -tRNA结合到核糖体上 肽链的形成 移位合成的终止:识别终止信号: UAG, UAA,UGA4-1 信号肽:在真核生物中,当某一种多肽的 N末端刚开始合成不久,这种多肽的取向就被决定,这是因为受这个 N末端的信号肽的控制。在细菌中,也存在类似情况,新生肽的 N末端也有一段信号肽结构,有时也叫引导肽4 多肽合成后的定向加工与转译后加工4-2 多肽的修饰: N末端信号肽的切除 二硫键的形成 线性多肽呈现出一定空间结构 多肽链的糖基化等