1、一、名词解释1凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。2絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程3过滤：是在某一支撑物上放过滤介质，注入含固体颗粒的溶液，使液体通过，固体颗粒留下，是固液分离的常用方法之一。4离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离5离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高6助滤剂：助滤剂是一种具
2、有特殊性能的细粉或纤维，它能使某些难以过滤的物料变得容易过滤7沉降：是指当悬浮液静置时，密度较大的固体颗粒在重力的作用下逐渐下沉，这一过程成为沉降8化学渗透破壁法：某些化学试剂，如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等，可以改变细胞壁或细胞膜的通透性，从而使胞内物质有选择地渗透出来。1分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。2萃取过程：利用在两个互不相溶的液相中各种组分（包括目的产物）溶解度的不同，从而达到分离的目的3超临界流体：超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点临界点后的流体。4
3、临界胶团浓度：将表面活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团的最小浓度称为临界胶团浓度，它与表面活性剂种类有关。5胶团：两性表面活性剂在非极性有机溶剂中亲水性基团自发地向内聚集而成的，内含微小水滴的，空间尺度仅为纳米级的集合型胶体。1反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。2膜分离：利用膜的选择性（孔径大小） ，以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。3膜的浓差极化：是指但溶剂透过膜，而溶质留在膜上，因而使膜面浓度增大，并高于主体中浓度。4乳化液膜系统：乳化液膜系统由膜相、外相和内相三相组成，膜相由烷烃
4、物质组成，最常见的外相是水相，内相一般是微水滴。5超滤：凡是能截留相对分子量在 500 以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。2CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。3吸附：是利用吸附剂对液体或气体中某一组分具有选择性吸附的能力，使其富集在吸附剂表面的过程。4离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。5树脂工作交换容量：单位质量干树脂或单位体积湿树脂所能吸附的一价离子的毫摩尔数
5、称为树脂交换容量，在充填柱上操作达到漏出点时，树脂所吸附的量称为树脂工作交换容量。1色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸） ，达到分离的目的。2色谱阻滞因数：溶质在色谱柱（纸、板）中的移动速率与流动相移动速率之比称为阻滞因数，以 Rf 表示。3凝胶：是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构的物质，凝胶的每个颗粒的细微结构就如一个筛子，小的分子可以进入凝胶网孔，而大的分子则排阻于凝胶颗粒之外，因而具分子筛的性质。4疏水层析：是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基
6、）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。5高效液相色谱：是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相，并配有实时在线检测器，实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。1生物制品:从微生物、动物或人体材料直接制备的或用现代生物技术、化学方法制成的用于预防、治疗、诊断特定传染病或其他疾病的制剂，统称为生物制品。2蒸发浓缩：通过加热或减压的方法使溶液沸腾部分溶剂汽化蒸发，溶液得以浓缩的过程。3结晶：是从液相或气相生成形状一定分子(或原子、离子)有规则排列的晶体的现象，结晶是新相生成的过程，是利用溶质之间溶解度的差别进行分离纯
7、化的一种扩散分离操作。二、单项选择1真空转鼓过滤机工作一个循环经过（A） 。A、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区 B、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区C、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区 D、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区2以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力（ B ）A.重力 B. 压力 C.浮力 D. 阻力3以下哪项不是颗粒在离心力场中受到的力（ C ）A.离心力 B. 向心力 C.重力 D. 阻力4颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（ A ）A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定5工业上常用的过滤介质不包括（ D ）A.织物介质 B.堆积介质 C.多孔固体介质 D.
8、真空介质6下列物质属于絮凝剂的有（A） 。A、明矾 B、石灰 C、聚丙烯类 D、硫酸亚铁7适合小量细胞破碎的方法是（ B ）A.高压匀浆法 B.超声破碎法 C.高速珠磨法 D.高压挤压法8丝状（团状）真菌适合采用（A）破碎。A、珠磨法 B、高压匀浆法 C、A 与 B 联合 D、A 与 B 均不行1在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法（C） 。A、双水相萃取 B、超临界流体萃取 C、有机溶剂萃取 D、反胶团萃取2用来提取产物的溶剂称（C） 。A、料液 B、萃取液 C、萃取剂 D、萃余液。3关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（A）项是正确的叙述。A、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合
9、后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。B、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。C、氢键形成是能量释放的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。D、氢键形成是能量吸收的过程，若溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。1基因工程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（ C ）A盐析 B.超声波 C.膜过滤 D.层析2非对称膜的支撑层（C） 。A、与分离层材料不同 B、影响膜的分离性能C、只起支撑作用 D、与分离层孔径相同3乳化液膜的制备中强烈搅拌（C） 。A、是为了让浓缩分离充分 B、应用在被萃取相与 W/O 的混合中C、
10、使内相的尺寸变小 D、应用在膜相与萃取相的乳化中4在液膜分离的操作过程中， （B）主要起到稳定液膜的作用。A、载体 B、表面活性剂 C、增强剂 D、膜溶剂5乳化液膜的制备中强烈搅拌（B） 。A、是为了让浓缩分离充分 B、应用在被萃取相与 W/O 的混合中C、使内水相的尺寸变小 D、应用在膜相与反萃取相的乳化中1适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ） 。A活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙2离子交换剂不适用于提取（ D ）物质。A抗生素 B.氨基酸 C.有机酸 D.蛋白质3工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（B） 。A、钠型和磺酸型
11、 B、钠型和氯型C、铵型和磺酸型 D、铵型和氯型4依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（A） 。A、Fe3+Ca2+Na+ B、Na+Ca2+Fe3+C、Na+Rb+Cs+ D、Rb+Cs+Na+5离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。A、静电作用 B、疏水作用 C、氢键作用 D、范德华力6阴离子交换剂（C） 。A、可交换的为阴、阳离子 B、可交换的为蛋白质 C、可交换的为阴离子 D、可交换的为阳离子7工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将
12、其转变为（B） 。A、钠型和磺酸型 B、钠型和氯型C、铵型和磺酸型 D、铵型和氯型8依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。树脂对下列离子亲和力排列顺序正确的有（A） 。 A、Fe3+Ca2+Na+ B、Na+ Ca2+ Fe3+C、硫酸根柠檬酸根硝酸根 D、硝酸根硫酸根柠檬酸根1气相色谱柱主要有（C ） 。A 填充柱 B 毛细管柱 C A 或 B D A 或 B 及其他2高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，基本上由（D ）组成。A 高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分B 进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工
13、作站四大部分C 高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分D 高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分3关于分配柱层析的基本操作错误(D )。A 装柱分干法和湿法两种 B 分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和C 用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平 D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。4气相色谱分析中,择固定相是气相色谱分析的关键,固定相可大致分成 (C )A 固体一类 B 固体和合成固定相二类 C 固体、液体及合成固定相三类 D 固体、液体固定相二类5关
14、于疏水柱层析的操作错误( D )A 疏水层析柱装柱完毕后，通常要用含有高盐浓度的缓冲液进行平衡 B 疏水层析是利用蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术 C 洗脱后的层析柱再生处理，可用 8mol/L 尿素溶液或含 8mol/L 尿素的缓冲溶液洗涤，然后用平衡缓冲液平衡D 疏水柱层析分辨率很高、流速慢、加样量小6HPLC 是哪种色谱的简称（ C ） 。A离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱7针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ） 。A.凝胶过滤 B.离子交换层析C.亲和层析 D.纸层析8用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色
15、谱是（ C ）A离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱9蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。A离子交换层析 B.亲和层析 C.凝胶层析 D.聚酰胺层析10凝胶色谱分离的依据是（B） 。A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同11如果要将复杂原料中分子量大于 5000 的物质与 5000 分子量以下的物质分开选用（D） 。A、Sephadex G-200 B、Sephadex G-150 C、Sephadex G-100 D、Sephadex G-5012分配层析中的载体（C） 。A
16、、对分离有影响 B、是固定相 C、能吸附溶剂构成固定相 D、是流动相13凝胶色谱分离的依据是（B） 。A、固定相对各物质的吸附力不同 B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同 D、各物质与专一分子的亲和力不同14洗脱体积是（C） 。A、凝胶颗粒之间空隙的总体积 B、溶质进入凝胶内部的体积C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积 D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积15下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ） 。A. 亲和层析 B. 凝胶层析 C. 离子交换层析 D. 盐析16分子筛层析纯化酶是根据（ C ）进行纯化。A.根据酶分子电荷性质的纯化方法 B.调节酶
17、溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法 D.根据酶分子专一性结合的纯化方法1氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（ A ）性质。溶解度和等电点 B.分子量 C.酸碱性 D.生产方式2关于精馏回流比控制，对于一定的分离任务，以下正确的两项是（A） A、若回流比变大，则精馏能耗增大；B、若回流比变大，则精馏能耗减小；C、若回流比变大，则所需理论塔板数变大；D、若回流比变小，则所需理论塔板数变小。3结晶过程中，溶质过饱和度大小（ A ）A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D、
18、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度4下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（ D ） 。A、凯氏定氮法 B.双缩脲法 C.福林-酚法 D.核磁共振5供生产生物药物的生物资源不包括（D）A.动物 B 植物 C.微生物 D.矿物质三、判断对错1助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。 （） 2通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。 （）3在生物制剂制备中，常用的缓冲系统有磷酸盐缓冲液；碳酸盐缓冲液；盐酸盐缓冲液；醋酸盐缓冲液等。 （ ）4珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。 （ ）5高级醇能被细胞壁中的类脂吸收，使胞壁膜溶胀，导致细胞破碎。 （） 1极性溶剂与非极性溶剂互溶
19、。 （）2溶剂萃取中的乳化现象一定存在。 （）3临界压力是液化气体所需的压力。 （）4用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。 （ ）5用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。 （ ）6应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行。 （ ）7溶剂的极性从小到大为丙醇乙醇水乙酸。 （ ）8溶剂的极性从小到大为丙醇乙醇水乙酸。 （ ）1进料的温度和 pH 会影响膜的寿命。 （）2液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。 （）1酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸（ ）2 活性氧化铝可分三种类型：碱性氧化铝、中性和酸性氧化铝。 （ ）3
20、离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。 （ ）4采用氧化铝为吸附剂时，用洗脱剂应从高极性开始，逐渐减低，洗脱剂的极性。 （ ）四、简答及论述一、生物分离技术的基本路线？原料的选取、预处理、细胞破碎、固液分离、初步纯化、静制和成品加工。二、主要生物分离技术的分离原理？依据离心力、分子大小、浓度差、压力差、电荷效应、吸附作用、静电作用、亲和作用、疏水作用、溶解度、平衡分离等原理。三、生物分离技术的特点？1目标产物的快速分离纯化2原料液高度浓缩3借助新型分离技术4除去有害人类健康的物质5采用利于保持目标产物产品质量的操作条件四、生产中怎样选取生物分离技术手段？1分离效率及其选择性
21、2产品质量3产品安全4生产工艺5生产成本1试比较凝聚和絮凝两过程的异同？答：凝聚和絮凝在电介质作用下，破坏溶质胶体颗粒表面的双电层，破坏胶体系统的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。凝聚：简单电解质降低胶体间的排斥力。从而范德华引力起主导作用，聚合成较大的胶粒，粒子的密度越大，越易分离。絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程1溶剂萃取过程的机理是什么？答：1、简单分子萃取：简单的物理分配过程，被萃取组分以一种简单分子的形式在两相间屋里分配。以中型分子存在，不发生化学反应。2、中型溶剂络合萃取：被萃取物是中型分子，萃取剂也是中型分子，萃取剂与被萃取
22、物结合成为络合物进入有机相。3、酸性阳离子交换萃取：萃取剂为弱酸性有机酸或酸性鳌合剂。金属离子在水相中以阳离子或能解离为阳离子的络离子的形式存在，金属离子与萃取剂反应生成中性鳌合物。4、离子络合萃取：金属离子在水相中形成络合阴离子，萃取剂与氢离子结合形成阳离子，二者构成离子缔合体系进入有机相；金属阳离子与中性鳌合剂结合成鳌合阳离子，再与水相中的阴离子构成离子缔合体系而进入有机相。2.何谓超临界流体萃取，并简述其特点答：超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。其特点是安全、无毒、产品分离简单，但设备
23、投资较大。3.超临界萃取的原理及 SC-CO2 萃取的优点。答:原理：溶质在超临界流体中的溶解度，与其密度有关，密度越大，溶解度越大。在临界点附近，微小的压力增加或温度下降，则溶剂的密度大幅度增加，对溶质的溶解度将大幅度增加，有利于溶质的萃取。而在临界点附近，微小的压力下降或温度上升，则溶剂的密度大幅度减少，对溶质的溶解度将大幅减少，有利于溶质的分离和溶剂的回收。优点：无毒无腐蚀性，不可燃烧，价格低廉，传质好萃取快，临界温度和临界压力较低适合于热敏生物制品，可获萃取物或萃余物4.何谓反微团，反微团萃取？其特点有哪些？答：胶束是表面活性剂在非极性有机溶剂中形成的一种聚集体当表面活性剂浓度超过临界
24、微团浓度时，表面活性剂会在水溶液中形成聚集体微团和反微团1、微团：表面活性剂的极性头朝外，疏水的尾部朝内，中间形成非极性的“核”2、反微团：表面活性剂的极性头朝内，疏水的尾部向外，中间形成极性的“核”3、反微团的优点（1）极性“水核”具有较强的溶解能力。（2）生物大分子由于具有较强的极性，可溶解于极性水核中，防止与外界有机溶剂接触，减少变性作用。（3）由于“水核”的尺度效应，可以稳定蛋白质的立体结构，增加其结构的刚性，提高其反应性能。1区分渗透与反渗透。答：渗透是由于存在化学势存在梯度而引起的自发扩散现象。因此，通常情况下， o其结果是水从纯水一侧透过半透膜向溶液侧渗透，使后者的液位抬高。如果
25、在溶液一侧施加压力 1P，外界力做功使溶液中水的化学势升高，则纯水通过膜的渗透就会逐渐减小，并最终停止（条件？） ，此时的压力差就是溶液的渗透压 。当 01时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。2.膜分离过程中，有那些原因会造成膜污染，如何处理？答：（1）膜污染主要有两种情况：一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面；另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。（2）膜污染是可以预防或减轻的，措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。（3）膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的，只能通过清洗的处理方式消除，包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。
26、3. 膜分离技术的类型和定义？答：膜分离过程的实质是物质透过或被截留于膜的过程，近似于筛分过程，依据滤膜孔径大小而达到物质分离的目的，故而可以按分离粒子大小进行分类：（1）微滤：以多孔细小薄膜为过滤介质，压力为推动力，使不溶性物质得以分离的操作，孔径分布范围在 0.02514m 之间；（2）超滤：分离介质同上，但孔径更小，为 0.0010.02 m，分离推动力仍为压力差，适合于分离酶、蛋白质等生物大分子物质；（3）反渗透：是一种以压力差为推动力，从溶液中分离出溶剂的膜分离操作，孔径范围在 0.00010.001 m 之间；（由于分离的溶剂分子往往很小，不能忽略渗透压的作用，故而成为反渗透） ；
27、（4）纳滤：以压力差为推动力，从溶液中分离 3001000 小分子量的膜分离过程，孔径分布在平均 2nm；（5）电渗析：以电位差为推动力，利用离子交换膜的选择透过性，从溶液中脱除或富集电解质的膜分离操作；1以羧酸吸附蛋白质为例，简要说明离子交换树脂的洗脱方法及其原理。答：1、加碱：主要是调节蛋白质到达等电点，是蛋白质带电量减少，吸附力下降从而被洗脱下来。2、加酸：主要是抑制羧酸的电离，使活性基团带电量下降，吸附力下降从而蛋白质被洗脱下来。3、加盐：依照质量作用定律，把蛋白质洗脱下来。2简述软水和无盐水的制备方法。答：软水的制备：利用钠型磺酸树脂除去水中的钙离子和镁离子等碱金属后即可制得软水。无
28、盐水的制备：将原水通过氢型强酸性阳离子交换树脂和羟型强碱或弱碱性阴离子交换树脂的组合，经过离子交换反应，将水中所有的阴、阳离子除去，从而制得纯度很高的无盐纯水。3在离子交换色谱操作中，怎样选择离子交换树脂？答：1、对阴阳离子交换树脂的选择：正电荷选择阳离子交换树脂，负电荷选择阴离子交换树脂。2、对离子交换树脂强弱的选择：较强的酸性或碱性，选择选用弱酸性或弱碱性树脂。3、对离子交换树脂离子型的选择：根据分离的目的，弱酸或弱碱性树脂不使用 H 或 OH 型。4.简述吸附色谱分离技术的原理。答: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离5.在运
29、用离子交换技术提取蛋白质时，为什么要使用多糖基离子交换剂？答:因为离子交换树脂孔径小,大分子蛋白质难以进入。同时，树脂内部主要为疏水性，对亲水性的蛋白质会产生影响。而多糖基离子交换剂没有上述问题。 6.怎样进行离子交换树脂的预处理及转型。答：物理处理：水洗、过筛，去杂，以获得粒度均匀的树脂颗粒；化学处理：转型（氢型或钠型）阳离子树脂 酸碱酸阴离子树脂 碱酸碱最后以去离子水或缓冲液平衡1简述气相色谱法与高效液相色谱法应用范围广特点上的不同含义答：气相色谱法应用范围广特点是指，气相色谱法不仅可以分析气体，也可以分析液体、固体及包含在固体中的气体。气相色谱分离不适用于大部分沸点高的和热不稳定的化合物
30、，对于那些腐蚀性能和反应性能较强的物质，更是难于分析。用气相色谱法进行定量分析时，往往需要纯样或已知浓度的标准样品进行定量校正，而标样的获得有时比较困难。高效液相色谱法应用范围广特点是指，高效液相色谱法通常在室温下工作，对于无法用气相色谱分离的高沸点或不能气化的物质，热不稳定或加热后容易裂解、变质的物质，生物活性物质或相对分子质量在 400 以下的有机物质，都可采用高效液相色谱法进行分离分析。与气相色谱法不同，高效液相色谱法更适合于热稳定性差、不易挥发（相对分子质量较大）的许多物质的分离和分析，因而应用更为广泛。可用气相色谱分析的约占 20%，而 80%则需用高效液相色谱进行分析。高效液相色谱
31、法不仅可分析组成简单的样品，若采用梯度洗脱操作技术，还能对许多组成复杂、极性宽泛的样品进行分析。2试述凝胶色谱的原理。答：将混合原料加在柱上并用流动相洗脱，则无法进入孔隙内部的大分子直接被洗脱下来，小分子因为可以进入孔隙内部而受到很大的阻滞，最晚被洗脱下来，而中等大小的分子，虽然可以进入孔隙内部但并不深入，受到的阻滞作用不强，因而在两者之间被洗脱下来。3在色谱操作过程中为什么要进行平衡？答：1、流速平衡：流速是柱层析操作当中的主要影响因素，流速的快慢直接影响着分离的效果，流速过快，混合物得不到完全的分离，流速过慢，整体分离的时间要延长，因此在分离前首先要确定留宿。2、液体环境：为了保持被分离物
32、质运动的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙内部和外部液体环境的一致，所以进行液体环境的平衡。4.简述亲和免疫层析介质的制备过程?答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱分离集成产生的一种高效色谱分离技术，其分离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用，从而实现高效的分离。层析介质的制备过程包括：抗体的制备、抗体提取、载体活化，手臂链的连接、抗体的连接等步骤。5.何谓亲和吸附，有何特点？答：亲和吸附是吸附单元操作的一种，它是利用亲和吸附剂与目标物之间的特殊的化学作用实现的高效分离手段。亲和吸附剂的组成包括：惰性载体、手臂链、特异性亲和配基。亲和吸附的特点是高效、简便、适用范围广、分离速度快、条件温和，但载体制备难度大，通用性差，成本较高。6试述柱层析的基本操作过程。答：1、装柱：干法装柱湿法装柱注意：湿法装柱中柱内预留一部分水，防止气泡的产生，装柱过程要连贯。平衡。2、加样：干法加样湿法加样注意：加样过程中，要防止产生飞溅，量要适中。
