1、课程内容,第一单元 微生物学基础知识,第三单元 培养基及器皿准备,第二单元 消毒、灭菌方式,第四单元 微生物检验基本方法,1,第一单元 微生物学基础知识,2,生物分类系统,病毒界,原核生物界,真菌界(真核),真核原生界,动物界,植物界,病毒,细菌,酵母菌,霉菌,藻类,原生动物,微生物,微生物并非生物分类学上的名词， 所有个体微小的低等生物通称,微生物在生物界地位,3,地位最低,微生物,小,简,低,微生物定义及特点,个体,结构,进化,4,微生物定义及特点,微生物,分布广、种类多,代谢强、繁殖快,体积小、面积大,适应强、易变异,5,1974年第8版：2000种,1994年第9版4500种,分类单位
2、：界、门、纲、目、科、属、种,伯杰氏细菌鉴定手册,微生物分类,6,微生物,非细胞形态,细胞形态,病毒,原核生物,真核生物,蓝细菌,藻类,原生动物,微生物分类,7,细 菌,1、细菌特点,2、细菌分类,3、细菌形态,4、细菌结构-染色,5、菌落形态,9、细菌繁殖,6、影响菌落因素,8、细菌芽孢,7、细菌结构,10、细菌生长周期,原核生物：呈单细胞无核膜二分裂方式繁殖,9,细菌特点,细菌,呼吸类型分,代谢类型分,细胞结构（染色）分,形态分,球状、杆状、螺旋状,自养型 、异养型,需氧、厌氧、兼性厌氧,G+、G-,革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法,细菌分类,10,11,球状,弧形或螺旋形,杆状,细菌形
3、态,11,G+,G-,细菌结构（染色）,12,单个细菌 显微镜观察,细菌,菌落,单个细胞繁殖肉眼可见,细菌与菌落,13,a.大小：b.形态：c.隆起度：d.菌落边缘：e.表面性状：f.表面光泽：g.颜色透明度：,细菌的菌落形态,14,同种菌落特征相似生长环境邻近菌落细胞空间位置不同,影响菌落特征的因素：,影响菌落形态因素,15,基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质,特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢,细菌结构,16,芽 孢,原因,条件恶劣营养损失,过程,17,一个细菌 一个芽孢 一个芽孢 一个营养体芽孢特点：壁厚密，折光强，不易着色，耐热，耐杀菌剂，不易杀灭，在高酸中不易萌发,芽 孢,18,小
4、测试,灭菌是否彻底判定标准？化验室灭菌条件？,芽孢是否被杀灭,湿热 121 、20-30分干热 160 、 2小时,19,20,Nt = N0 x 2n,n = 繁殖代数t = 培养时间N0 = 细菌起始数Nt = 细菌生长 t时间后数量,细菌繁殖,个细菌分钟繁殖代，小时后有几个？,20,微生物数量,时间,衰亡期,稳定期,对数生长期,延缓期,细菌生长周期,细菌能否无限繁殖下去？,21,2、霉菌菌体结构,3、 霉菌生长繁殖,4、霉菌菌落形态,霉菌,1、霉菌个体形态,霉菌,霉菌个体形态、结构,丝状真菌，一般多细胞，由营养体与繁殖体构成,结构：,个体形态：,23,细胞质,24,无性繁殖 （为主） 有
5、性繁殖,厚垣孢子,分生孢子,胞囊孢子,接合孢子,子囊孢子,担孢子,TM-00027:36,霉菌繁殖,24,霉菌菌落,菌落形态：大，疏松，绒毛状，絮状，蜘蛛网状，初期无色，后期产生孢子有颜色,25,2、酵母菌菌体结构,3、酵母菌生长繁殖,4、酵母菌菌落形态,酵母菌,1、酵母菌个体形态,酵母菌,个体形态：多数单细胞，卵圆、球形、椭圆形,酵母菌个体形态、结构,27,有性繁殖：产生子囊和子囊孢子,无性繁殖（为主）,酵母菌繁殖,生长周期同细菌,芽殖（普遍）,裂殖,28,酵母菌菌落,菌落：大而厚，湿润、粘稠、易被挑起，多呈乳白色，少数为红色（如红酵母）,29,小结,定义,特点,分类,细菌,微生物,形态,结
6、构,繁殖,30,因素,营养,温度,pH,渗透压,其他,水份,影响微生物生长繁殖的因素,31,营养元素,碳源,生长因子,氮源,无机盐,营 养,32,aw:,不腐败,霉菌和酵母,球菌,G-,G+,干燥食品,火腿等熟奶酪酱,牛奶、饮料,浓缩奶蕃茄酱,甜炼乳蕃茄酱,水 份,aw0.9，大部分细菌受到抑制霉菌、酵母菌的孢子和芽孢菌强G+ G- cb,33,34,aw,用来衡量有多少水分可以用来生长,水 份,34,种类 最低 最佳 最高嗜热菌 4045 5575 6090嗜温菌 515 3045 3547低温菌 -55 2530 3035 嗜冷菌 -55 1215 1520,对温度适应能力分,温 度,35
7、,36,酸度(pH值),4.6,pH,0 2 4 6 7 9 14,原料奶、纯牛奶,细菌,霉菌,酵母,TM-00027:54,PH4.6 高酸产品,PH4.6 低酸产品,酸性乳饮料,36,厌氧菌,好氧菌,兼性厌氧菌,微氧菌,气 体,37,渗透压,等渗压,高渗压,代谢活动正常进行,代谢活动呈抑制状态甚至死亡,低渗压,细胞吸水过分膨大破裂,38,原奶微生物,39,控制,产品无微生物,细菌总数：,耐热芽孢,嗜冷菌,实际需要控制的微生物,细菌总数,主要：G+球菌（微球菌、链球菌）危害：加快产酸；蛋白不稳定；货架缩短来源：牛体、挤奶用具、盛乳容器,耐热芽孢,主要：G+杆菌 （蜡状、枯草、梭状、棒状）危害
8、：质量缺陷；有致病性；食物中毒来源：土壤、水、尘埃、饲料,嗜冷菌,42,主要： G-杆菌 （假单胞菌占50%）危害：释放蛋白酶、脂肪酶；产生苦味；变质来源：挤奶、储奶设备；运输、加工、储藏污染；巴氏杀菌后污染,控制措施,奶站车间卫生好，清洗消毒要做到,巴氏杀菌不能少，超高温处要有效,净化处理很主要，过滤能够除芽孢,巴氏消毒：杀灭90细菌、全部病原菌高压蒸汽灭菌：杀灭全部微生物,管路严密无死角，产品质量绝对高,回顾,微生物学基本知识,微生物定义,微生物特点,微生物分类,联系实际,影响因素,44,一,二,第二单元 消毒、灭菌方式,45,消毒、灭菌概念,概念,杀死所有微生物包括芽孢和繁殖体,杀死病原
9、微生物,阻止或抑制微生物生长繁殖,无活的微生物,灭菌,消毒,防腐,无菌,46,灭菌和消毒前提条件：清洗干净!,消毒、灭菌清洗,47,热力灭菌,48,微生物,蛋白变性,代谢故障,死亡,高温,热力灭菌原理,49,湿热灭菌优点,水蒸汽穿透力强,蒸汽凝结成水，放出潜热，提高物体温度,湿热灭菌比干热效果好,菌体蛋白质吸收水分易凝固,50,化学消毒,51,病原微生物,蛋白,酶类,细胞破裂溶解,变性沉淀,系统破坏,破坏细胞膜,杀死,对非病原微生物不能全部杀死,消毒防腐剂作用原理,52,紫外线消毒原理,菌体,吸收紫外线,损坏核酸中DNA,致死,空气,紫外线照射,产生臭氧,杀死菌体,53,回顾,消毒、灭菌方式,
10、概念,种类,选用,54,玻璃器皿清洗、包扎,培养基分类及制备,一,二,第三单元 培养基及器皿准备,55,新器皿,未污染,已污染,有油圬,用过的载玻片,玻璃器皿清洗、包扎,清洗,包扎,56,培养基,化学成分,用途,物理状态,半固体,液体,固体,增殖,鉴别,选择,半合成,合成,天然,基础,加富,厌氧,特殊,培养基分类及制备,57,容器选择状态观察pH验证灭菌存放,注意事项,培养基制备,58,回顾,玻璃器皿清洗,培养基分类及制备,培养基及器皿准备,59,第四单元 微生物检验基本方法,60,一个亲代细胞 一个菌落,检样 培养基,接种和培养,接种,纯培养,分离培养,纯培养过程,61,获得单个菌落,倾注,涂布,划线,1.斜线法 2.曲线法 3.方格法 4.放射法 5.四格法,62,染色、制片、镜检,染色方法,单染法,复染法,苯胺黑,美兰染色,革兰氏染色,63,染色原理,革兰氏染色,色差增大，轮廓清晰，便于识别,菌体细胞壁结构不同,固定结构，能够着色，不被水冲掉,染色目的,固定目的,64,革兰氏染色,结晶紫,初染,65,镜检结果,G+,G-,66,显微镜,67,微生物检验基本方法,回顾,接种、培养,制片、染色、观察,68,
