1、安全血液和血液制品Safe Blood and Blood Products,第三册 血型血清学（考试辅导）长沙血液中心 王赤林,学习目的,掌握血液主要成分的功能及其在输血中的意义。掌握ABO抗原抗体反应及其影响因素。掌握ABO正反定型，对献血者和患者鉴定。掌握Rh血型系统，正确输注RhD阳性或阴性血液，何时需要DU型的检测。掌握配血试验重要性，建立和维持在常规和急诊情况下安全申请、选择和发血的程序和记录。掌握血型鉴定和配血试验原理，并进行安全和准确的操作。,第二章 血液成分与功能,血液的组成与基本功能（1）,全血：血细胞悬浮于血浆中的复合液体；血细胞由红细胞、白细胞、血小板组合而成；血浆含有
2、各种蛋白、无机盐、凝血因子、新成代谢物质及水分。,血液的组成与基本功能（2）,红细胞： 扁盘状，无细胞核，是血细胞中数量最多的一种细胞； 内含红色的血红蛋白，主要功能是运送氧至机体组织；红细胞在骨髓中生成，成熟红细胞进入血液，其寿命约120天。,血液的组成与基本功能（3） 白细胞：,白细胞是有核细胞，包括粒细胞、淋巴细胞、单核细胞，参考值：4-10109/L；粒细胞是在胞浆中含有噬中、噬酸、噬碱性颗粒的一组白细胞，骨髓产生，功能是抵御感染；淋巴细胞是由淋巴组织、胸腺和骨髓产生，T淋巴细胞参与细胞免疫，B淋巴细胞参与体液免疫；单核细胞是一种大的白细胞，可吞噬细菌及其它外来物质。,血液的组成与基本
3、功能（4）,血小板：血细胞中体积最小，血流中依层流作用沿毛细血管壁排列，维持内皮细胞完整性，机体损伤时释放凝血因子，在血液凝固机制中起重要作用，参考值：100-300109/L。血浆：全血去除血细胞后的液体部分，抗凝血的上清液。血清：血液凝固后析出的液体部分，凝固血液的上清液，不含纤维蛋白原。,循环血平均生存期 120天,主要功能运输O2、CO2参与代谢,循环血平均生存期 10 小时；主要功能：免疫、防御,循环血平均生存期 9-11天,主要功能止血,血红蛋白的机能、正常值,血红蛋白是存在于红细胞内的红色液体，由含铁血红素和珠蛋白组成；能可逆性结合氧及二氧化碳；正常值：男120-160g/L、女
4、110-150g/L我国献血者标准：男 120g/L 女 110g/L 硫酸铜密度：男：1.0520、女：1.0500,纤维蛋白与凝血,纤维蛋白原：是血浆中存在的、参与血液凝固过程的一种物质。纤维蛋白：在血液凝固过程中，可溶性纤维蛋白原经血栓激活形成的一种纤细的线状蛋白。 凝血机制：机体损伤会激发内源性与外源性凝血途径，可溶性纤维蛋白原转变为纤维蛋白，形成稳定的血凝快，防止进一步出血。,血浆不同蛋白质生存期不同主要功能：参与代谢免疫与止血,输血的原因：,纠正贫血。补充在手术或意外中流失的血液。补充其它血液成分。,模拟测试题,临床红细胞输注的主要原因是：（C ）A、提高免疫力 B、提高血液聚集粘
5、附能力C、维持机体的携氧能力及血液循环量D、补充血容量,模拟测试题,我国用于男、女性献血者筛选的硫酸铜溶液密度及血红蛋白最低标准分别为：（ C）A、1.053、135g/L；1.051、125g/L B、1.055、140g/L；1.053、130g/LC、1.052、120g/L；1.050、110g/LD、1.054、140g/L；1.053、130g/L,模拟测试题,血细胞中数量最多的是：（A ）A、红细胞B、粒细胞C、淋巴细胞D、血小板,模拟测试题,血细胞中在血液凝固中起重要作用的是：（ D）A、红细胞B、粒细胞C、淋巴细胞D、血小板,模拟测试题,输血的主要原因不包括：（ B）A、纠正
6、贫血B、支持疗法C、补充手术或意外失血D、补充其它血液成分,第三章,血型免疫学基础,抗原、抗体的概念,抗原：进入人体后被机体识别为外来物质，并能刺激免疫系统对其产生反应，可与相应抗体结合。抗体：体液免疫应答的产物，经抗原刺激后产生的一种免疫球蛋白，可与相应抗原形成免疫反应。,抗体的种类,IgG：免疫产生，血清中含量最多，分子量小，可通过胎盘，与红细胞在盐水介质中大多数不能发生凝集反应，只能致敏或包被红细胞，最适反应温度37。IgM：自然形成，分子量大，不能通过胎盘，与红细胞在盐水介质中可发生凝集反应，最适反应温度4IgA、 IgE、 IgD,天然抗体与免疫性抗体,天然抗体：未经任何可察觉抗原的
7、刺激而产生的抗体，通常是IgM ，如：抗A、抗B。免疫性抗体：经抗原刺激而产生，血型免疫性抗体是接触了外源性红细胞而产生的， 通常是IgG ，如：抗D。,两种免疫应答,初次免疫应答：第一次接触外来抗原而产生，进程缓慢，往往需几个月才能出现抗体，主要产生少量的IgM。再次免疫应答：再次接受同样的抗原刺激，反应剧烈，短时间有大量抗体产生，主要产生IgG。,红细胞抗原抗体反应（1）,红细胞凝集试验的两个阶段：第一阶段：抗体结合红细胞上的抗原。第二阶段：形成网络发生凝集。,红细胞抗原抗体反应（2）,细胞致敏与凝集反应的原理IgM抗体分子量大，有十个抗原结合点，可直接致敏和凝集红细胞。IgG抗体分子量小
8、，不能直接凝集红细胞，但可包被、致敏。,IgM抗体凝集红细胞示意图,IgM抗体在盐水介质中产生凝集,IgG凝集红细胞示意图,IgG 在盐水介质中一般不产生凝集,红细胞抗原抗体反应（3）,间接技术证实抗原抗体反应应用白蛋白或其它带电荷的多聚物应用蛋白水解酶应用抗球蛋白试剂,红细胞间的距离缩短， IgG产生凝集,酶处理、凝聚胺,抗球蛋白试验 抗球蛋白,红细胞抗原抗体反应（4） 抗原抗体反应的影响因素：,红细胞离子电荷：红细胞表面带负电荷，生理状态下红细胞之间不会相互接触。温度：不同的抗体有不同的最适反应温度。pH：大多数抗体的最适pH是6.5-7.5。血清和红细胞的新鲜度：要反应结果良好，应使用新
9、鲜的血清和红细胞。抗体与抗原比例：抗体与抗原比例适当。离子强度：配制红细胞悬液的介质离子强度越低，抗原抗体反应越充分。抗体包被红细胞的凝集：应用间接技术。,红细胞抗原抗体反应（5）,补体系统：存在血浆中的具有酶活性的一组球蛋白，对热不稳定。抗原抗体反应激活了复杂的补体系统，可致溶血反应，或被C3致敏，表面包被有C3的细胞也可用抗球蛋白试验检出。补体成分不稳定且易变性。补体激活途径：经典途径、旁路途径。,红细胞抗原抗体反应（6）,抗球蛋白试验： 用抗球蛋白试剂（抗-抗体），检测致敏红细胞上的球蛋白（抗体）的试验，分直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验。溶血反应： 红细胞与相应抗体反应，在补体参与下
10、，发生红细胞膜破裂，释放出血红蛋白。,模拟测试题,以下哪项不属于证实抗原抗体反应的间接技术：（C ）A、应用白蛋白 B、应用抗球蛋白试剂C、应用盐水凝集试验 D、应用蛋白水解酶,模拟测试题,关于免疫应答的特点正确的是：（ D）A、初次免疫应答反应速度快，产生抗体以IgM为主B、初次免疫应答反应速度快，产生抗体以IgG为主C、再次免疫应答反应速度慢，产生抗体以IgM为主D、再次免疫应答反应速度快，产生抗体以IgG为主,模拟测试题,在正常生理状态下红细胞之间不会相互接触，是因为红细胞表面都带有下列哪种物质：（ D ）A、蛋白质 B、抗凝血因子C、正电荷 D、负电荷,模拟测试题,IgM与IgG描述不
11、正确的是（C ）A、IgG易通过胎盘，可致新生儿溶血病B、IgM不能通过胎盘，最适反应温度4C、IgG在盐水介质中能凝集红细胞D、IgG最适反应温度37 ,模拟测试题,红细胞凝集的两个阶段依次是：（A ）A、致敏、形成网络凝集B、致敏、溶血C、形成网络凝集、溶血D、形成网络凝集、致敏,第四章,ABO血型系统, ABO血型的遗传基础,所有的形状与特征都是由活性细胞核中的基因控制，基因在染色体上，每人有23对染色体，我们从双亲的染色体各获得一半的遗传基因。遗传细胞（精子和卵子）只有单条染色体，当受精时，这些结合的一对活性细胞形成胚胎。在我们的遗传特性中有一个决定ABO血型的基因，我们遗传的是二个血
12、型基因，一个来自父亲，一个来自母亲。,basic material H antigen A antigen B antigen,=N-乙酰半乳糖苷 =D-半乳糖=N-乙酰葡萄糖胺 =L-岩藻糖,基因型和表型,基因型：从双亲染色体上遗传的基因。表型：所观察到的遗传性状即血型本身。,父 母基因型 AO BO基因型 AB AO BO OO 表 型 AB A B O,ABO血型,ABO血型鉴定,分型原则： 用已知抗A、抗B定型血清作正定型； 用已知A、B、O试剂红细胞作反定型； 正、反定型相互复检。O细胞在反定型中的作用： 检测受试者血清中是否有不规则抗体的存在。,A和B红细胞抗原的发育,在胚胎早期A
13、抗原和B抗原开始产生，到出生时比成人的要弱，与抗A、抗B的反应也比成人弱。正常的抗A和抗B在新生儿较弱，到三个月时反应基本与成人一样，这是新生儿血样只作红细胞正定型的原因。, A抗原的亚型,抗AB和抗A的血清学特点,抗AB与弱A、弱B抗原亲和力强，常用抗AB来确定弱A、弱B抗原，抗AB在患者红细胞鉴定中不需要，但建议用于献血者鉴定。抗A由两种抗体混合而成，抗A与A2细胞混合后留在吸收血清中的为抗A1。A2和A2B型人血清中可能存在抗A1，通常很弱，在献血者筛选和输血中意义不大。,分泌型,具有显性分泌基因的人在一些体液中产生特异性血型物质。约80%个体具有产生这些可溶性抗原的遗传基因。分泌型人群
14、中，A与B抗原不仅存在于红细胞上，也以溶解物（血型物质）形式存在于体液中，但脑脊液中无。,IgM与IgG抗A、抗B,除AB型的人外，所有个体都产生IgM抗A和/或抗B；有一些同时也产生IgG型抗体，特别是O型人；当血清中含有IgG抗AB，通常其IgM抗AB含量也会很高，这种抗血清按术语可称为高效价抗AB血清或O血清，反定型时常常使A和/或B型红细胞溶血。,高效价抗体在临床与输血中的作用,高效价抗体（ IgM与IgG抗A、抗B）在以下两种情况中起重要作用： 1、将O型全血或血浆输给非O型人。 2、妊娠期间，O型的母亲怀了A型或B型的胎儿时。,抗球蛋白试验,直接抗球蛋白试验（DAT）的用途： 检测
15、红细胞是否被IgG抗体致敏。间接抗球蛋白试验（IAT）的用途： 称为Coombs试验，显示已致敏在红细胞上但未引起直接凝集反应的IgG抗体，常用于检测血清中游离的红细胞抗体。,模拟测试题,表型是指以下哪一种：（ ）A、从双亲染色体遗传的基因 B、观察到的遗传形状C、两者均是 D、两者均不是,模拟测试题,用O型红细胞作反定型是为了检测血清中哪种抗体：（ D ）A、抗A抗体 B、抗B抗体C、不规则抗体 D、抗AB抗体,模拟测试题,弱A和弱B抗原与以下哪种抗体亲和力最强：（ ）A、抗A抗体 B、抗B抗体C、不规则抗体 D、抗AB抗体,模拟测试题,间接抗球蛋白试验的目的是：（ ） A、检测血清中的游离
16、IgG抗体 B、检测红细胞是否已被抗体致敏C、检测血清中的游离红细胞D、检测红细胞上的抗原,模拟测试题,少部分A2亚型血清中存在：（ ）A、抗AB、抗ABC、抗A1D、抗A2,模拟测试题,一患者作血型鉴定，患者的红细胞与抗A血清不凝集，与抗B、抗AB血清凝集；患者血清与A型红细胞未见凝集但有溶血，与B型、O型红细胞不凝集，将其血清在56水浴保温30分钟后与A型红细胞凝集，该患者血型为：（A ）A、A型 B、B型C、O型 D、AB型,模拟测试题,案例同上例，该患者血清中存在哪种成分影响血型鉴定结果判断：（ ）A、抗体 B、可溶性抗原C、蛋白质 D、补体,第五章,Rh血型系统, Rh血型的临床重要
17、性,RhD阴性患者输入RhD阳性血可刺激机体产生免疫性抗体，再次输入RhD阳性血可引起溶血性输血反应。RhD阴性母亲曾输过RhD阳性血或怀过RhD阳性胎儿，可致新生儿溶血病。,Rh血型系统的遗传基础（1）,Rh基因位于第1号染色体上； Rh存在两个高度同源和紧密连锁的RhD和RhCE基因；RhD基因编码D抗原；RhCE基因编码C/c、E/e抗原，RhCE基因编码一个产物，两种抗原表达在同一种蛋白质上。,Rh血型系统的遗传基础（2）,一个人遗传到了D基因，其红细胞与抗-D反应呈阳性，被称为RhD阳性；当一个人没有遗传到D基因，其红细胞与抗-D反应呈阴性，被称为RhD阴性。,纯合子与杂合子的概念,
18、纯合子：同源染色体中含有两个相同等位基因。杂合子：同源染色体中含有不同等位基因。,RhD抗原的发育,RhD抗原在胎儿早期就得到了充分的发育；并在整个成年期都维持了这种状态；脐带或新生儿红细胞与抗-D的反应和成人一样强。, RhD阳性的频率,不同人群中RhD阳性的比例有很大不同；北欧约85%，西非约95%；中国汉族人RhD阴性仅0.4%左右。, RhD阴性在临床输血与新生儿溶血病诊断方面的意义,RhD阴性患者输血应输入RhD阴性红细胞，如RhD阴性患者输入了RhD阳性红细胞可刺激机体产生免疫性抗体，再次输入RhD阳性红细胞会引起溶血性输血反应。RhD阴性的女性患者输过RhD阳性血，或有过RhD阳
19、性妊娠史，会刺激机体产生抗-D抗体，在以后的RhD阳性妊娠时，可造成新生儿溶血病。,Du抗原的特点,红细胞在与某些抗-D血清反应时表现为RhD阳性，而与另一些抗-D血清反应时表现为RhD阴性，表现为此类反应的红细胞称为Du型细胞。Du作为一个术语表示一种弱的D抗原表型，即单个细胞上的D抗原数量低于正常值，这是一种可遗传的特性；由于抗-D试剂之间有少许不同，使Du细胞与不同的抗-D试剂有不同强度的反应。,Du型鉴定及在输血中的意义,Du型的鉴定方法是用抗-D试剂进行间接抗球蛋白试验 。作为献血者，Du型应作为RhD阳性看待。作为受血者，Du型应作为RhD阴性看待。,不完全D-D变异型,一组罕见的
20、个体，鉴定时为RhD阳性，但又能产生抗-D抗体；红细胞上正常的D抗原部分缺失，因而能产生针对缺失部分D抗原的抗-D抗体；该抗-D可和所有个体RhD阳性红细胞反应，除了他自己以及相同的不完全D型个体的红细胞；常规及Du型检查无法检出D变异型，当其产生抗D时才能被确认。,模拟测试题,目前认为Rh血型抗原是下列哪组基因编码的产物：（ C ）A、RhC、RhD和RhE基因 B、RhD、RhCc和RhEe基因C、RhD和RhCE基因 D、RhDd、RhCc和RhEe基因,模拟测试题,O型RhD阳性血型的母亲怀了O型RhD阴性血型的胎儿， RhD新生儿溶血病发生的几率是： （ ）A、0B、50%C、75%
21、D、100%,模拟测试题,纯合子是指以下哪种情况：（ D ）A、不同源染色体中含有两个相同的等位基因B、同源染色体中含有两个不相同的等位基因C、不同源染色体中含有两个不相同的等位基因D、同源染色体中含有两个相同等位基因,模拟测试题,Du型的确认用以下哪种方法：（ ）A、使用相同的抗D血清作间接抗球蛋白试验B、使用不同的抗D血清作直接抗球蛋白试验C、使用不同的抗D血清作间接抗球蛋白试验D、使用相同的抗D血清作直接抗球蛋白试验,模拟测试题,Du型受血者应接收以下哪种血型的血液：（ D ）A、ABO同型Rh阳性 B、ABO不同型Rh阴性C、ABO不同型Rh阳性 D、ABO同型Rh阴性,模拟测试题,R
22、h血型系统最重要的抗原为：（ C）A、C抗原B、c抗原C、D抗原D、E抗原,模拟测试题,一新生儿出生4天，全身皮肤黄染，血清总胆红素升高，患儿血型A型，Rh（D）阳性，直接抗球蛋白试验阳性；其母亲血型为O型、Rh（D）阳性，血清中IgG抗A效价1：256，应考虑该患儿为：（ ）A、ABO新生儿溶血病 B、Rh新生儿溶血病C、自身免疫性溶血 D、D、蚕豆病,第六章,配合性试验和发血,配合性试验,定义：为了发出配合型的血液而进行的一系列操作。目的：尽可能确保每一位患者在输了献血者的血以后，不会发生有害反应，并且红细胞在输注后能保持最长存活时间。,配合性试验的主要内容,核对患者记录：以往血型记录、存
23、在任何抗体、继往输血史及输血原因。对患者血样进行ABO、Rh血型鉴定，核实与以往记录是否相符。如有可能，进行抗体筛选。交叉配血。,血液的申请,普管（不加抗凝剂）采患者血样510ml；血样管须清楚标明患者姓名、住院号、床号；用血申请单：提供患者详细资料； 核对血样管和用血申请单，相符才能接受。,用血申请单主要血型血清学内容,患者血型（如已知）存在的任何抗体全部输血史全部输血反应史女性的妊娠次数患者血清是否需要鉴定和留样,患者用血选择-适合性输血,根据患者输血的原因选择最合适的血进行配合性试验；一般原则：先进先出；特殊情况：大量输血、本身血容量小又接受了大量的血、接受定期输血的患者、搭配不同的失效
24、期；为带有特异性抗体的患者选血，需选血液中不含与患者抗体反应的抗原的血液 。,为大量输血患者选血及输注,大量输血是指患者在24小时内输了超过自身血容量的血；在输了12单位血后，可以输注未经交配的ABO、Rh同型的血液；3天后如仍需输血，需采集新鲜血样进行交叉配血。,给婴儿或新生儿选择血液输注（1）,新生儿或婴儿需要输血或换血，一般应选择不超过7天的血液；血型的选择应根据不同的输血原因；当输血的原因很简单，如为提高血红蛋白，可选用与母婴配合Rh血型合适的血，交配时用母亲的血清。,给婴儿或新生儿选择血液输注（2）,RhD新生儿溶血病患儿换血，可选与母婴配合的RhD阴性血，一般是O型红细胞加AB型血
25、浆，用母亲血清作筛血和配血。ABO新生儿溶血病患儿换血，选择低效价O型，Rh血型同婴儿的血，可用母亲的血清进行筛血和配血。其它任何新生儿黄疸患儿换血，可选择ABO、Rh与婴儿同型，或者Rh同型的低效价O型血输注，用母亲的血清配血。,给婴儿或新生儿选择血液输注（3）,由于Rh 系统的其它抗体或非Rh系统的抗体等原因换血，必须选择不含特异性抗体的相应抗原，ABO与婴儿同型的血液输注。紧急情况下，可选用配血中与母亲血清反应呈阴性的血输注。,给婴儿或新生儿选择血液输注（4）,为Rh或ABO新生儿溶血病的患儿选择用于换血的血时，最简单的解决办法是：当母婴均为RhD阳性时，无论ABO血型如何均选用O型Rh
26、D阳性血液。当母婴一方或双方为RhD阴性时，无论ABO血型如何均选用O型RhD阴性血液。,不规则抗体的筛选,不规则抗体产生的原因：输血、或妊娠过程中胎儿的红细胞进入母亲的血循环，使患者产生针对这些红细胞的抗体。输血前抗体筛选的目的：一旦患者携有不规则抗体，可以有时间去寻找配合的血液。,不规则抗体筛选的方法,试验应在37下操作，使用经选择的、含有所有主要血型抗原的红细胞做间接抗球蛋白试验。因所有抗原不可能在同一个细胞上出现，可选择2-3个细胞混合组成。双细胞组合常常是一个为O型R1R1（CDe/CDe），另一个为O型R2R2（cDE/cDE）。三细胞组合增加一个O型rr（cde/cde）。,配血
27、（配合）试验的重要作用,尽管患者的ABO和Rh血型与献血者相同，但其血清中仍有可能存在其它抗体，两者的血液仍有不配合而发生严重输血反应的可能；配血试验所得正确结果可使我们确认输血后患者的血清不会和献血者的红细胞发生反应。,配血标签 （1）,配血标签的作用：当一袋血经配血试验显示这袋血与患者配合，则应该有一种标志；最好是使用配血标签贴在这袋血上，表示该袋血与该患者是配合的；如这袋血没给患者使用，下次可另贴新标签。,配血标签 （2）,配血标签的内容：三项最重要的内容是：这袋血的血型、患者姓名、患者住院号；其它还包括：患者床号、效期、配血日期、配血负责人签字。,血型及保证系统,建立血型及保证系统的重
28、要性及意义： 保证临床急救用血的需要；遇到急救用血，如临时进行鉴定和配血所延误的时间，有危及患者生命的潜在危险。,紧急情况下选血和发血（1）,首先必须告知输血者必须对输血的后果负责，如不能等待可按以下程序操作：用快速法检测血样的ABO及Rh血型，选择ABO及Rh配合型血。在标签上注明有关患者的所有细节，并注明“未经配血”。从辫子血中留取血样，以便以后核对血型和配合性试验。象通常一样发血。,紧急情况下选血和发血（2）,血液申请者必须在血液申请单上签名，表示对输注未经配合血的后果负责；血样快速鉴定：ABO及Rh血型；如没有血样或没有时间作快速鉴定，尽可能发O型Rh阴性血。,常规情况对血和血浆的选择
29、、发放程序 （1）,检查取血者是否带来了能确定患者的取血单；核查取血单上患者的姓名、住院号、床号及血型，并与用血申请表、配血标签及配血登记簿进行核对；核查是否进行了所有项目的检测并确定是检测合格的 ；,常规情况对血和血浆的选择、发放程序 （2）,核对用血申请单上的血型与血袋以及配血记录上的血型是否一致；核对血袋上的效期，确认在有效期内；观察血液有无变质现象；在配血记录中填写发血时间；取血者签字。,血和血浆发给患者的操作规程,核实患者记录中的姓名、住院号、床号、配血标签与用血申请单上的是否一致，询问患者情况与记录核对；核实血袋上配血标签中的血型与用血申请单及患者记录是否一致；核实血袋上效期确认血
30、是在有效期使用；在患者记录中记下输血日期和时间、输血单位数、血的编号；在患者记录中签名。,输血反应,反应分类：（1）发热反应（2）过敏反应（3）溶血反应,输血反应-机理与主要症状（1）,发热反应：机理：由致热源、免疫反应引起，症状：头痛、阵发畏寒、寒战和体温升高。,输血反应-机理与主要症状（2）,过敏反应：机理：（1）由于献血者血浆中含有可溶性抗原而患者体内存在针对该抗原的相应抗体；（2）患者输入含大量抗体的血浆后再次输入另外的血浆，并正好含有针对该抗体的特异性抗原；症状：荨麻疹、轻度支气管痉挛，并可能有喉头水肿等。,输血反应-机理与主要症状（3）,溶血反应：患者血清中的抗体与献血者红细胞上的
31、相应抗原反应；或献血者血清中的抗体与患者红细胞上的相应抗原反应所致；血管内溶血： IgM抗体引起，起病急，伴有黄疸和血红蛋白血症，有致命危险；血管外溶血： IgG抗体引起，数天后发病，黄疸、贫血、肝睥肿大。,溶血的免疫机制,血管内溶血,血管外溶血,c,c,c,c,c,c,C3b,C3b,C3b,C3b,输血反应-实验室检查（1）,完整的记录包括反应类型、开始输血到开始反应的时间及已输入的血量；检查患者输血前后血浆中的胆红素和/或血红蛋白；对输血前后红细胞作直接抗球蛋白试验；用输血前后血样重复交叉配血试验以及患者和献血者的ABO、Rh血型鉴定；,输血反应-实验室检查（2）,用间接抗球蛋白试验检查
32、献血者血浆与患者红细胞的试验；检查患者输血后尿中血红蛋白与红细胞；核查所有记录，是否有登记、样本混淆差错；有条件还应检测HLA抗体、血小板抗体、血清蛋白抗体、输血前后血清胆红素、正铁血红蛋白、血色原和细菌等。,建立和保持一个有效的记录、保存系统 （1）,记录档案从献血者招募、血样检测与处理到血液输注或报废全过程记录；保证试验可靠性，两人操作好，一人操作一人核对，然后换位核对；正确记录结果，否则无法核对；每个试验结果须核对，包括血样转移；实验室至少要有：用血申请单、配血标签、正规的试验记录。,建立和保持一个有效的记录、保存系统 （2）,实验室资料献血者记录患者记录 分别保存两部分记录记录必须完整
33、精确和及时保密,建立和保持一个有效的记录、 保存系统 （3）献血者定型记录,时间血袋编号献血者的ABO、Rh血型血或血液成分的类型有效期,鉴定操作者签名因配血或作废而出库的日期血的去向，无论输注或作废与之配血的患者姓名预定的配血日期,建立和保持一个有效的记录、 保存系统 （4）配合性试验记录,日期患者姓名、住院号、出生日期、床号患者主治医生姓名需输血的诊断/原因患者ABO、Rh血型不规则抗体筛选结果,献血者血液相关信息配合性试验结果配血日期与时间、配血者签名发血日期与时间、取血人签名血的去向,医院备血管理（1）医院用血和血浆的备血数量计算,计算过去一年，至少是六个月内，每周用血和血浆的量；分A
34、BO、Rh血型列出每周用血量表格；去掉每个血型最高的周用量；将各个血型用血总量相加；总数除以总周数（减去用量最高的一周）。根据现有库存数与每周平均用血量的比较估算下一周的备血量。,医院备血管理（2） 血库收发血数量的记录,采血或进血的单位数输血的单位数受血患者的数量过期率因缺血而取消的手术或输血次数,模拟测试题,以下哪一项不是配合性试验的必须内容：（ ）A、核对患者记录 B、患者血型鉴定C、抗体筛选 D、交叉配血,模拟测试题,大量输血患者在输入了12单位血后，可输以下哪种血液：（ ）A、未经交配的ABO、Rh同型血 B、已经交配的ABO、Rh同型血C、两者均可 D、两者均不可,模拟测试题,在为
35、RhD新生儿溶血病患儿换血时最简单的解决方法是：（ ）A、无论ABO血型如何均选用AB型RhD阴性血B、无论ABO血型如何均选用O型RhD阳性血C、无论ABO血型如何均选用AB型RhD阳性血D、无论ABO血型如何均选用O型RhD阴性血,模拟测试题,用于不规则抗体筛选的双细胞组合是：（ ）A、O型R1R1和O型R2R2 B、O型rr和O型R2R2C、O型R1R1和O型rr D、O型R1R2和O型r1r2,模拟测试题,输血反应中最严重的一种是：（ ）A、发热反应 B、溶血反应C、过敏反应 D、输血无效,模拟测试题,血管内溶血主要是由下列哪种抗体引起：（ ）A、IgM B、IgGC、IgA D、Ig
36、E,第七章,血型鉴定和配血试验技术,常用的血型血清学技术 （1）主要技术与器材简介,主要技术：ABO和Rh血型鉴定技术（玻片、试管、微量板）、抗球蛋白（直接、间接）试验、交叉配血试验（LISS技术、白蛋白加入和室温盐水技术）等 器材：图23列出盐水：pH6.5-7.5，使用周期2-3天巴斯德吸管：每滴体积0.02ml,常用的血型血清学技术 （2）三种主要的血型鉴定方法,玻片或白色瓷片法：简便快速、不需特殊设备，但不敏感，仅作为血型初筛。试管法：允许长时间孵育而试管内容物不会脱水，敏感度高，操作较另两法烦琐，适合所有红细胞血型血清学实验。微量板法：V型孔、U型孔及平底孔三类，血型定型通常用U型孔
37、；一个微量板能作96个试管的试验，可节约抗血清，微板可重复使用；适合作大批量血型定型。,常用的血型血清学技术 （3）反应强度的判定,4+：所有细胞完全凝集。3+：大部分细胞凝集，有些游离细胞。2+：用裸眼观察有确切凝集。1+：用裸眼观察有弱阳性，用手提透镜或凹面镜观察是清楚的阳性。阴性：没有凝集。L：红细胞溶解。,常用的血型血清学技术 （4）血型鉴定试剂,过去：血型试剂来自于人或动物中自然产生或免疫产生的多克隆抗体。现代：血型试剂主要通过杂交瘤细胞技术获得单克隆抗体，单克隆抗体的优点是产量高、特异性强；必须按制造商的说明使用和贮存，因它们是用标准化稀释剂精心制备，对pH等改变非常敏感。化学修饰
38、鉴定试剂：如一种IgG抗体经化学修饰，成为如同IgM凝集性质的抗体。,常用的血型血清学技术 （5）用于鉴定试验的红细胞,应从新鲜标本中制备，并取两个个体细胞混合 ；需要用盐水洗涤，以除去血浆或血清和小的凝块，还可除去溶血细胞；洗涤红细胞用盐水悬浮，悬液细胞浓度通常为2-4%。,常用的血型血清学技术 （6）抗血清和红细胞的保存、质控,抗血清通常贮存在4，如冰冻保存不能反复冻融，解冻后混匀使用；投入常规使用之前，每批抗血清应作一套质控对照，投入使用后，每批试验或至少每天一次进行质控对照。反定型用的红细胞最好每天制备，在4保存可用两天，如有溶血和变色应废弃；试剂红细胞在使用前也应作一套质控对照，同样
39、每批实验也应作质控对照。,ABO和RhD鉴定 （1）, ABO血型的正反定型：正定型：用已知抗A、抗B定型血清鉴定未知的红细胞上抗原。反定型：用已知A、B、O试剂红细胞鉴定未知的血清中抗体。,ABO和RhD鉴定 （2）,献血者的鉴定：每次献血都应用抗A、抗B和抗AB作细胞鉴定；用A、B和O试剂红细胞作反定型；至少用一种抗D血清作RhD定型；阴性者须作DU型鉴定。,ABO和RhD鉴定 （3）,患者的鉴定：患者的红细胞应用抗A和抗B测定；血清或血浆用A、B、O细胞测定；应用一种抗D血清作RhD测定；阴性者不必作DU型鉴定。,ABO和RhD鉴定 （4）,DU型鉴定技术：3-5种不同批号或不同厂家的抗
40、D试剂（适合作间接抗球蛋白实验）；作间接抗球蛋白实验。,血型鉴定遇到错误的主要原因,标化和储存不佳的抗血清；钱串形成：是一种假凝集；血样本的污染：应抽取新鲜样本作血型鉴定。华通胶（脐带胶样组织）；自身抗体和冷反应抗体；不良技术：血型鉴定错误主要是由于不良技术所致。,间接抗球蛋白试验 （1）,原理：抗体与红细胞上相应抗原结合但未产生可见凝集时，加入抗球蛋白血清显示该抗体和其红细胞受体的结合；用途：是抗体测定最敏感的技术，可用于血清中游离的IgG抗体检测、 RhD鉴定、不完全抗体交叉合血等。操作步骤：致敏或包被和孵育、洗涤、抗球蛋白试剂的加入。,间接抗球蛋白试验 （2）,间接抗球蛋白试验假阳性的原
41、因：（1）试管中灰尘和微粒的存在。（2）从一个管到另一个管的交叉污染。（3）离心试管速度太快或时间太长。,间接抗球蛋白试验 （3）,间接抗球蛋白试验假阴性的原因：（1）没有彻底洗涤红细胞。（2）没有加入抗人球蛋白试剂（AHG）。（3）脏的试管。（4）在血清或细胞中存在小凝块。（4）使用pH错误的盐水。（5）以错误的速度离心试管。（6）洗涤后到加抗球蛋白试剂之前，时间间隔过长。（7）加AHG后读结果前中断了试验。,直接抗球蛋白实验,用途：检测患者红细胞表面结合的抗体（IgG)。导致直接抗球蛋白试验阳性的条件：（1）自身免疫溶血性贫血，患者体内抗体与自身红细胞反应。（2）溶血性输血反应，患者体内抗
42、体破坏输入的红细胞。（3）新生儿溶血病，母亲的IgG抗体经过胎盘在婴儿体内破坏婴儿的红细胞。,白蛋白加入试验（分层法）,用途：当获得AHG试剂困难，或是某些RhD鉴定可用此法替代间接抗球蛋白试验。操作步骤可分为两步：（1）血清和细胞在37孵育，红细胞将被存在的抗体包被（IgG或IgM）；（2）沿试管壁加入白蛋白不要激起细胞，再孵育10-15分钟，如红细胞已被抗体包被，白蛋白会引起包被红细胞的凝集。,配血试验（1）,配血试验的要求：配血试验的技术程序应尽可能简单而又不影响其准确性；如患者体内无免疫性抗体存在，室温盐水技术可测定ABO不相溶的情况；抗球蛋白试验具有高敏感性能测定所有抗体，应将该试验
43、用于每一个配血试验，如不能做到可使用白蛋白（分层）技术；配血试验不能使用玻片法 。,配血试验（2）,配血试验的主要内容：（1）检查患者血样（2）使用可靠的试剂（3）配血试验使用间接抗球蛋白技术，或室温盐水试验与37进行白蛋白加入试验。（4）在配血中如未发现凝集和溶血，则血液是配合的，如有凝集或溶血，该血液不配合。（5）不配合情况下，检查患者和献血者血型鉴定是否有错，如无错应重作配血试验，进一步用多袋血作配血试验，找到配合的血液可发出。,配血试验（3）,交叉配血主要技术：（1）一管法配血，立即离心和IAT法（2）使用LISS的一管法配血（3）白蛋白加入法和室温盐水技术（4）聚凝胺技术,配血试验（
44、4）,紧急配血技术：（1）应用常规方法，立即离心血样后若无凝集被认为是配合的结果；（2）作IAT时使用LISS技术缩短孵育时间。（3）白蛋白滴加室温盐水技术，盐水相可立即离心，在37孵育30分钟后低速离心，加白蛋白后再孵育10分钟读结果。,模拟测试题,直接抗球蛋白试验不需作哪个步骤；（ ）A、洗涤红细胞 B、孵育C、加入抗球蛋白试剂 D、配红细胞悬液,模拟测试题,使用低离子强度盐水的用途是：（ ）A、缩短孵育时间 B、确证抗原抗体反应C、观察红细胞形态 D、激活补体,模拟测试题,间接抗球蛋白试验操作步骤中洗涤的目的是：A、去除已致敏在红细胞上的抗体 B、去除血清中可能存在的游离抗体C、两者均是 D、两者均不是,模拟测试题,引起血型鉴定错误的主要原因是：( )A、标化和储存不佳的抗血清B、钱串形成C、自身抗体和冷反应抗体D、不良技术：,
