铁蛋白的研究现状与展望【文献综述】.doc

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1、毕业论文文献综述食品质量与安全铁蛋白的研究现状与展望摘要本文概括了一些关于铁蛋白的研究现状,发现铁蛋白在生物体内具有去除二价铁的毒性以及调节机体铁代谢平衡的活性。在以往对铁蛋白研究取得的进展上对该领域的研究前景做了一些展望。关键词铁蛋白;活性;研究现状;展望铁蛋白FERRITIN于1937年由LAUFBERGE从脊椎动物马的脾脏中纯化分离出来1,具有耐稀酸PH21、耐稀碱PH121和耐较高温度7O75不变性等特性。它主要分布于肝、脾、骨髓组织中,是细胞用于储存铁离子的最重要的蛋白质。铁蛋白由蛋白质外壳和铁核两部分组成,外形结构呈球形。蛋白壳由24个亚基组成高度对称性的结构,厚度约225NM,外

2、径1113NM,内径89NM,铁核位于蛋白壳中心,由数千氢氧化铁分子和数百磷酸盐分子组成非均匀的结构,直径约78NM。哺乳动物铁蛋白由H和L两种亚基以不同比例组成,植物、原核生物铁蛋白由相同亚基组成【2】。铁蛋白的分子量因含铁量不同而异,大约为460000,体内铁蛋白含铁总量占机体含铁总量的1530。因此,对纽虫进行基因克隆得到的重组铁蛋白的活性、功能和作用机理研究具有重要意义。1有关铁蛋白和重组铁蛋白的研究现状和成果自1991年国外报道了大豆铁蛋白基因的完整CDNA序列以来,国外又陆续报道了国外陆续报道了豌豆、玉米、油菜、马铃薯、烟草、紫花苜蓿、羽扇豆等铁蛋白基因的CDNA序列。我国在这方面

3、的工作起步较晚,目前报道的主要有黄花苜蓿铁蛋白CDNA的克隆与序列分析、细粒棘球蚴铁蛋白基因的重组、表达、纯化及免疫学特性鉴定和可口革囊星虫铁结合蛋白基因的研究等。转基因研究已证明大豆铁结合蛋白基因能提高水稻种子中铁结合蛋白的含量【3】。11调节铁代谢平衡的研究铁在细胞内的浓度需要严格控制,一方面,机体缺铁会引起很多生理上的变化,也会引发某些疾病,最常见的是缺铁性贫血;另一方面,铁又不可过量,否则可发生铁中毒,引起胃肠道出血,大量铁积聚在肝脏等重要脏器,引起肝功能损害等疾病。铁蛋白主要在释放和储存上对铁代谢进行调控。当体内铁含量过高时铁以FE2的形式贮存于铁蛋白中,铁蛋白贮存铁的过程包括二价铁

4、氧化、铁离子移动和矿质铁心的形成和生长。在出血或其他需要铁的情况下,贮存的铁可以释放,参与造血或其他含铁化合物的合成【4】。杜莉利等【5】在实验中从可口革囊星虫体液中获得铁结合蛋白基因的全长序列,当过量的“游离铁”入侵时,可口革囊星虫能启动防御机制,避免机体受损。白霞等【6】在对微小牛蜱铁蛋白编码基因的克隆和分析中从微小牛蜱克隆到1个新的铁蛋白编码基因,研究认为蜱铁蛋白很可能存在于细胞溶质中,当外界大量的铁和血红蛋白被蜱消化吸收后,到达各组织器官的细胞中,铁蛋白对过多的铁进行贮存和调控,使其维持在生理水平,起到解毒作用。12铁蛋白基因研究由于植物性食物的铁含量低,且存在吸收率低的问题,使得人类

5、铁营养主要依耐于动物食品。在以谷物等食物为主要来源的人们中,尤其是发展中国家存在严重的缺铁问题。近年来铁蛋白基因作为提高植物铁含量的候选基因而倍受关注,原因是(1)铁蛋白贮存铁的能力高于其它蛋白;(2)铁蛋白由特殊酶亚基形成,无需导入任何其它基因诱导产生翻译产物;(3)铁蛋白在单、双子叶植物中都存在;(4)铁蛋白中铁以生物可以利用形式存在。克隆其基因并导人经济作物,实现稳定而高效的表达,将会提高植物的铁营养成分【7】。植物中有关铁结合蛋白基因的分离和克隆已涉及大豆、豌豆、豇豆、苜蓿、玉米、油莱、拟南芥、马铃薯、兰花等植物。迄今,运用转基因技术将外源铁蛋白基因导人经济作物中已有许多成功报道。GO

6、TO等将由35S启动子驱动的大豆铁蛋白基通过农杆菌转入莴苣后发现含铁量明显提高【8】。动物转基因技术相对于植物转基因技术而言转化效率低、操作困难,目前动物铁蛋白的研究主要集中在基因的分离和克隆上。王敏等【9】筛选日本血吸虫铁蛋白CDNA文库获得日本血吸虫铁蛋白基因并对其进行克隆表达及其免疫诊断的研究。目前国内有关微生物铁蛋白基因的研究很少,国外相对多一些。细菌中已经发现三种特征铁蛋白(1)典型铁蛋白(FTNA),在真核生物(H链)中也有发现;(2)血包含细菌铁蛋白(BFR)广泛存在于细菌中;(3)DNA结合铁蛋白(DPS)存在于细菌和古细菌中【10】。13重组铁蛋白的研究刘巧泉等【11】尝试利

7、用水稻胚乳中表达铁结合蛋白来方法提高稻米铁含量。董阔、徐杰等【12】在此基础上采用基因枪和农杆菌转化法,将水稻胚乳特异表达的谷蛋白基因启子GLUB1驱动下的大豆铁结合蛋白基因转入2个优良早稻品种“旱稻297”和“早稻277”。利用PCR、SOUTHERN杂交分析方法验证转化结果。发现转基因植株T1T3代的RTPCR证明,外源基因在种子中特异表达。T1T3代的PCR检测证明铁结合蛋白基因已经稳定遗传。多数转基因植株T0T3代种子中铁含量高于未转化植株,最高达到未转化对照的2倍以上。由此得出结论利用基因枪和农杆菌转化法可将大豆铁结合蛋白基因导入旱稻基因组中,并使转基因稻米铁含量增高。徐晓晖【13】

8、,程志强【14】等采用农杆菌介导法,以35S启动子,将豌豆铁结合蛋白基因转化到水稻秀水11品种中,转基因水稻FT4植株种子中铁含量比非转基因植株提高了22倍,而FT66植株叶片中铁含量提高了23倍。同时转铁蛋白基因的水稻呈现出对百草枯的抗性,并提高了抗水稻稻瘟病能力。王彩芬【15】等采用冻融法将含有大豆铁结合基因的质粒转入农杆菌菌株LBA4404中,以宁夏4个水稻主栽品种为受体材料,通过农杆菌介导法转化水稻愈伤组织,经2轮次除草剂筛选获得了再生植株。经过对转化植株的PC扩增检测,证明外源大豆铁结合基因已经转入宁夏水稻植株中。大豆铁结合蛋白基因在水稻种子中特异表达,转基因植株种子中的铁含量未转化

9、植株的1722倍。2小结铁结合蛋白在生物体内铁的代谢方面起着关键作用,不仅可以贮存铁,还能对铁给予调节【1619】。而且乳铁蛋白铁蛋白的一种还具有广谱抗菌、抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能【2022】,被认为是一种新型的抗菌、抗癌药物和极具开发潜力的食品和饲料添加剂【2325】。此外,铁蛋白可以通过红细胞膜,为血红素提供铁,同时还参与细胞RNA代谢的调节,有研究认为该蛋白是解决动物和人类全球饮食缺铁有效的方法。3展望纽虫【2627】是一类生活在浅海潮间带的无脊椎动物,在世界各地都有分布,它具有柔软、能伸展、无分节的身体,以及一个极具特征性的捕食器能够翻转的吻。目前国内外对纽虫的研究较少

10、,尽管有关吻的结构、毒素的性质、胚胎发育、以及再生现象已有部分报道,但是大多数的研究主要在形态解剖学或生理生化上,很少在分子水平上对它的这些生理现象进行深入地分析。因此,从分子水平上对纽虫铁结合蛋白进行分析,为研究铁结合蛋白在纽虫中的表达特征,功能和作用机理奠定基础,具有重要意义。参考文献1袁小红,杨星勇,罗小英等豌豆铁蛋白的纯化及其抗血清的制备J中国生物化学与分子生物学学报,200256146182王群力,孔波,黄河清铁蛋白纳米蛋白壳结构与功能研究新进展J化学进展,2004,1645165193GOTOF,YOSHIHARAT,SHIGEMOTON,TOKIS,TAKAIWAFIRONFOR

11、TIFICATIONOFRICESEEDBYTHESOYBEANFERRITINGENEJNATUREBIOTECHNOLOGY,1999,172822864朱王飞,钱胜峰铁与人体健康J膳食指南,2004347495杜莉利,李太武,等可口革囊星虫PHASCOLOMAESCULENTA铁结合蛋白基因的研究J海洋与湖沼,2008,3932522556白霞,周金林,等微小牛蜱铁蛋白编码基因的克隆和分析J畜牧兽医学报,2005,36166697王永斌,郭长虹,郭东林大豆铁蛋白CDNA的克隆及植物表达载体的构建大豆科学,2006,2544544578GOTOF,YOSHIHARAT,SAIKIHIRON

12、ACCUMULATIONANDENHANCEDGROWTHINTRANSGENICLETTUCEPLANTSEXPRESSINGTHEIRONBINDINGPROTEINFERRITINJTHEORETICALANDAPPLIEDGENETICS,2000,1006586649王敏,易新元,曾宪芳,等日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究J中国免疫学杂志,2004,201069669910JYOTIVELAYUDHAN,MARGARETCASTOR,ANTHONYRICHHARDSON,ETALTHEROLEOFFERRITINSINTHEPHYSIOLOGYOFSALMONELL

13、AENTERICSVTYPHIMURIUMAUNIQUEROLEFORFERRITINBINIRONSULPHURCLUSTERREPAIRANDVIRULENCEJMOLECULARMICROBIOLOGY,2007,6351495150711刘巧泉,姚泉洪,王红梅,等转基因水稻胚乳中表达铁结合蛋白提高稻米铁含量遗传学报,2004,3151852412董阔,徐杰,等大豆铁结合蛋白基因在旱稻中的表达及铁含量分析J中国农业科学,2006,39112362236713徐晓辉,郭泽建,程志强,等铁蛋白基因的水稻转化及其功能初步分析J浙江大学学报,2003,291495414程志强,郭泽建,徐晓辉,等

14、转铁蛋白基因增强水稻对氧化胁迫与稻瘟病菌的抗性J中国水稻科学,2003,171858815王彩芬,付永彩,安永平,等转大豆铁结合蛋白基因水稻的初步研究J西北农业学报,2008,176848716丁聃,王娅娜,等细粒棘球蚴铁蛋白基因的重组、表达、纯化及免疫学特性鉴定J宁夏医科大学学报,2009,310214614817曹阳,高华颖,于黎,等人乳铁蛋白基因克隆及细胞表达研究J遗传,2002,24191418张蓉,刁其玉乳铁蛋白在犊牛生产中的应用及其生物信息学分析J乳业科学与技术,2007,1394219张述,王革非等重组人乳铁蛋白基因克隆及表达J中国生物制品学杂志,2005,18021171192

15、0高海燕,郭荣富乳铁蛋白肽的研究现状及进展J中国饲料添加剂,2007,6107151921单体中,汪以真乳铁蛋白的生物学功能及其基因工程研究J中国饲料,200510101222康萍,印遇龙乳铁蛋白的抑菌机制J中国饲料,200615293123邢芳芳,等乳铁蛋白肽的生物学活性及应用前景J中国饲料添加剂,2006101524黄海青,汪以真乳铁蛋白肽的研究进展J中国兽药杂志,2004,386151825唐传核,曹劲松,彭志英乳铁蛋白最新研究进展活性多肽及生理功能()中国乳品工业,2000,285444726吕慈仙,李太武,等浙江沿海最新发现一种枝吻类纽虫J水产科学,20071265265427王孟前,李太武,等浙江沿海一新纽虫的18RDNA序列研究J科技通报,2010,2616771

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