1、毕业论文文献综述海洋生物资源与环境鱼类T淋巴细胞的研究现状摘要鉴于鱼类所处的进化地位以及水产养殖业的高速发展，鱼类免疫系统日益为人所关注。淋巴细胞是构成免疫系统的主要细胞，是一个复杂不均一的细胞群体，它包括许多形态相似而功能不同的亚群。本文主要介绍了鱼类T淋巴细胞的表面受体标志、亚群及其功能。关键字T淋巴细胞；T细胞抗原受体；CD4；CD8鱼类抗病的免疫功能，很大程度上取决于免疫细胞的作用。鱼类主要的免疫细胞由非特异性的吞噬细胞、特异性的淋巴细胞以及天然杀伤细胞构成。淋巴细胞是构成机体免疫应答功能的重要细胞成分，免疫细胞的共同特点之是功能与形态上的多样性，因此，对免疫细胞进行分类后在体外获得代
2、表性亚群进行研究，是认识各类免疫细胞功能和免疫反应机制的重要条件。T淋巴细胞主要介导细胞性免疫。1T细胞的表面标志T细胞表面标志是指存在于T淋巴细胞表面的膜分子，它们是T细胞识别抗原与其他免疫细胞相互作用以及接受信号刺激，并产生应答的物质基础，亦是鉴别和分离T细胞的重要依据。T细胞表面标志主要包括表面受体、表面抗原和黏附分子12。11T细胞抗原受体T细胞抗原受体TCELLANTIGENRECEPTOR，TCR又称T细胞受体，存在于T细胞表面，能够特异性识别和结合抗原。T细胞受体可以高度特异性地识别外来抗原，同时也象抗体一样能够耐受自身抗原。B细胞可以识别外来的游离抗原，而T细胞受体仅识别自身细
3、胞表面MHC与抗原的复合体3。每个T细胞克隆有完全不同于其他T细胞克隆的T细胞受体，它们分别识别不同的抗原决定簇4。T细胞受体是一种跨膜糖蛋白，具有两种不同的异二聚体或。这两种异二聚体在一级结构、基因组合和重排的方式上与免疫球蛋白非常相似。特殊之处是TCR和TCR固定于膜上，不像免疫球蛋白那样可被分泌。TCR与T细胞表面的CD3分子非共价结合组成TCRCD3复合受体分子56，向细胞内传导信号，激活T细胞，引发一系列免疫反应。哺乳动物的T细胞受体是通过抗个体型抗体鉴定的，每条多肽链（、均由稳定区C和可变区V两个主要部分组成，V区又由VVARIABLE节段区、DDIVERSITY节段区、JJOIN
4、ING节段区组成。V区的多样性7则是由于它们与V区的不同组合或重排时的结合。20世纪90年代，有科学家陆续发现了鱼血液中一些淋巴因子，之后有关于硬骨鱼T淋巴细胞的研究逐渐发展起来。2T细胞的亚群及其功能在哺乳类等高等动物中至少已鉴定出2种表面标记与表达方式各不相同的主要亚群,CD4和CD8T细胞，前者为辅助性T细胞，几乎参与免疫应答的每个过程；后者为细胞毒性T细胞，为细胞免疫的主要效应细胞。两类T细胞的主要区别在于CD4结合MHCII类分子，而CD8结合MHCI类分子11。TH1、TH2为活化CD4T细胞的2个亚群，主导免疫应答的发展方向体液的抗体应答或细胞免疫应答。IL4/10/12与IFN
5、的共同调节使TH0初始CD4T细胞向TH1或TH2的不同转化。TH1主要分泌IL2、IFN、TNF等细胞因子，可调节致炎症细胞介导的免疫应答并产生DTH反应；TH2主要功能为促进B细胞增殖，并分化为浆细胞、分泌特异性抗体介导体液免疫和I型超敏反应，分泌的细胞因子主要有IL4/5/6/10/13等。CD4和CD8都是T细胞抗原受体的协同受体，在T淋巴细胞上起作用，对所有T细胞活化都十分重要。被提呈的外源抗原肽能和组织相容性复合体（MHC）类分子结合并运送到细胞表面。CD4T细胞可以识别到抗原提呈细胞表面的抗原肽MHC类分子复合物，从而激发主要辅助性T细胞免疫反应。辅助性T细胞对于所有免疫细胞都很
6、重要，包括细胞毒T细胞12。哺乳动物的CD4分子是长度为55KDA的膜结合糖蛋白，在胸腺细胞、辅助性T细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞上都有发现13。CD4分子有四个胞外免疫球蛋白结构域（D1D4），一个疏水跨膜区和一个长胞质尾。免疫球蛋白样结构域中D1和D3是V区，D2和D4是C区。经抗原识别，CD4的前两个域D1和D2先与MHC类分子在不同位点结合。CD4分子的胞质尾有一段在所有高等动物中都有的保守序列（CXC），这段保守通过锌扣结构与序列酪氨酸激酶P56LCK结合。酪氨酸激酶P56LCK使基于CD3受体的活化基序酪氨酸免疫受体磷酸化，CD3受体在将来的信号转化是必需的14。淋巴细胞的
7、分类最初是按照哺乳动物依据其分化和发育的场所来分的。在哺乳动物的胸腺中发育的淋巴细胞为T细胞，而在骨髓中发育的淋巴细胞为B细胞。鱼类由于没有骨髓，其淋巴细胞的分类不能依据传统定义，目前鱼类T细胞定义是在哺乳动物T细胞特异性有丝分裂原CONA、PHA刺激下能够增殖的SIG细胞15，即在体外用混合淋巴细胞反应磁珠分离胸腺SIG细胞T细胞丝分裂原的刺激与MLR反应中均能显著提升CD4MRNA的转录水平16、细胞因子的合成、T细胞有丝分裂原的诱导增殖CONA、PHA与体内的移植排斥反应和DTH反应，来证明鱼类T细胞的细胞免疫能力。关于鱼类CD4和CD4L基因已经在一些研究中报道过1819，例如河豚、虹
8、鳟、鲈鱼。在在鱼类中也识别到了参与TCR复合物功能的相关基因，包括CD3，CD8，CD8，TCR的、链。包括其他鱼类的MHCI类和类分子的特征，例如P56LCK也已经被报道过了，另外，有关于特异性介导细胞毒性抗感染鱼类细胞的病毒的报道证明鱼类中的T细胞系统与哺乳动物的十分相似20。3结语与哺乳类等高等生物的免疫系统相比，鱼类的免疫功能较为保守，在形态上存在较大的差异。鱼类演化出自身的免疫特性以便于更好的适应环境。现在的鱼类免疫学体系是建立在哺乳动物研究的基础之上的，就鱼类免疫学本身而言，其研究基础还十分薄弱。鱼类由于其多样化的种类组成、特定的进化地位及其免疫系统的特性如补体系统的多样性、MH连
9、锁群结构、淋巴细胞、NITR受体等，对于人类了解自身免疫系统的演化规律，补充各种免疫效应分子、受体等组成成分有非常重要的意义21。鱼类免疫系统的这些特性，不仅扩充了免疫学的研究范围，其深入研究也必将为更深层次地揭示人类的免疫系统提供科学依据。当然，鱼类免疫学研究对于养殖病害的免疫防治也具有指导意义。因此，人们越来越重视鱼类免疫系统组成与功能的研究。近年来在鱼类免疫基因的克隆方面有不少进展，已经克隆出了包括牙鲆、虹鳟、鲫鱼、斑马鱼等多种鱼类免疫相关基因，如TCR包括、IKAROST细胞早期表达的转录因子、P56LCKT细胞特异性激酶、MHCI/II、CD3、CD4、CD8等22。从这些基因的组成
10、及其表达蛋白的预测的结构中可以推定鱼类具有与哺乳类类似的T细胞组成与功能。近十年鱼类免疫学研究的主要成果大都源自分子克隆技术，但单凭基因克隆技术不能从根本上认识淋巴细胞，在蛋白质水平上适当的开发利用各种淋巴/效应细胞系、单克隆抗体特别是能够明确鉴定对应与哺乳类CD系统免疫细胞的抗体等细胞，成为鱼类免疫研究的当务之急2325。参考文献1VANDERSARAM,APPELMELKBJ,VANDERBROUKEGRAULSCM,BITTERWASTARWITHSTRIPESZEBRAFISHASANINFECTIONMODELTRENDSMICROBIOL200412451E72CROUCHSPM,
11、KOZLOWSKIR,SLATERKJ,FLETCHERJTHEUSEOFATPBIOLUMINESCENCEASAMEASUREOFCELLPROLIFERATIONANDCYTOTOXICITYJIMMUNOLMETH199316081E83CAINKD,LAPATRASE,SHEWMAKERB,JONESJ,BYRNEKM,RISTOWSSIMMUNOGENICITYOFARECOMBINANTINFECTIOUSHEMATOPOIETICNECROSISVIRUSGLYCOPROTEINPRODUCEDININSECTCELLSDISAQUATORGAN19993667E724TAFA
12、LLAC,COLLJ,SECOMBESCJEXPRESSIONOFGENESRELATEDTOTHEEARLYIMMUNERESPONSEINRAINBOWTROUTONCORHYNCHUSMYKISSAFTERVIRALHAEMORRHAGICSEPTICEMIAVIRUSVHSVINFECTIONDEVCOMPIMMUNOL200529615E265BROCKMANMA,KWONDS,TIGHEDP,PAVLIKDF,ROSATOPC,SELAJ,ETALIL10ISUPREGULATEDINMULTIPLECELLTYPESDURINGVIREMICHIVINFECTIONANDREVE
13、RSIBLYINHIBITSVIRUSSPECIFICTCELLSBLOOD2009114346E566TREDENS,LANGENAUDM,TRAVERD,LOOKAT,ZONLITHEUSEOFZEBRAFISHTOUNDERSTANDIMMUNITYIMMUNITY200420367E797DAVISMMNATURE,1988,334395E4028LANGENAUDM,ZONLITHEZEBRAFISHANEWMODELOFTCELLANDTHYMICDEVELOPMENTNATREVIMMUNOL20055307E179SCAPIGLIATIG,ROMANON,ABELLILMONO
14、CLONALANTIBODIESINTELEOSTFISHIMMUNOLOGYIDENTIFICATION,ONTOGENYANDACTIVITYOFTANDBLYMPHOCYTESAQUACULTURE19991723E2810SCAPIGLIATIG,MAZZINIM,MASTROLIAL,ROMANON,ABELLILPRODUCTIONANDCHARACTERISATIONOFAMONOCLONALANTIBODYAGAINSTTHETHYMOCYTESOFTHESEABASSDICENTRARCHUSLABRAXLTELEOSTEA,PERCICTHYDAEFISHSHELLFISH
15、IMMUNOL19955393E40511王卫卫,等硬骨鱼免疫系统的组成与免疫应答机制研究进展海洋科学进展2010282258E6212WALYN,GRUFFYDDJONESTJ,STOKESCR,DAYMJTHEDISTRIBUTIONOFLEUCOCYTESUBSETSINTHESMALLINTESTINEOFHEALTHYCATSJCOMPPATHOL2001124172E8213TISCHENDORFFONTHEEVOLUTIONOFTHESPLEENEXPERIENTIA198541145E5214GRACEMF,MANNINGMJHISTOGENESISOFTHELYMPHOIDO
16、RGANSINRAINBOWTROUT,SALMOGAIRDNERIRICH1836DEVCOMPIMMUNOL19804255E6415ZAPATAAG,CHIBAA,VARASACELLANDTISSUESOFTHEIMMUNESYSTEMOFFISHINIWAMAG,NAKANISHIT,EDITORSTHEFISHIMMUNESYSTEMSANDIEGOACADEMICPRESS1996P1E6216BOEHMT,GONZALEZSARMIENTOR,KENNEDYM,RABBITTSTHASIMPLETECHNIQUEFORGENERATINGPROBESFORRNAINSITUHY
17、BRIDIZATIONANADJUNCTTOGENOMEMAPPINGEXEMPLIFIEDBYTHERAG1/RAG2GENECLUSTERPROCNATLACADSCIUSA1991883927E3117FISHELSONLCYTOLOGICALANDMORPHOLOGICALONTOGENESISANDINVOLUTIONOFTHETHYMUSINCICHLIDFISHESCICHLIDAE,TELEOSTEIJMORPHOL1995223175E9018ROMANON,TAVERNETHIELEAJ,FANELLIM,BALDASSINIMR,ABELLIL,MASTROLIAL,VA
18、NMUISWINKELWB,ROMBOUTJHONTOGENYOFTHETHYMUSINATELEOSTFISH,CYPRINUSCARPIOLDEVELOPINGTHYMOCYTESINTHEEPITHELIALMICROENVIRONMENTDEVCOMPIMMUNOL199923123E3719ZAPATAALYMPHOIDORGANSOFTELEOSTFISHIULTRASTRUCTUREOFTHETHYMUSOFRUTILUSRUTILUSDEVCOMPIMMUNOL19815427E3620LAMSH,CHUAHL,GONGZ,WENZ,LAMTJ,SINYMMORPHOLOGIC
19、TRANSFORMATIONOFTHETHYMUSINDEVELOPINGZEBRAFISHDEVDYN200222587E9421谢海侠,聂品鱼类胸腺研究进展水产学报2003227192E322WESTERFIELDMTHEZEBRAFISHBOOKAGUIDEFORTHELABORATORYUSEOFZEBRAFISH,3EDEUGENE,ORTHEUNIVERSITYOFOREGONPRESS199523LINKBA,GRAYMP,SMITHRS,JOHNSWINTRAOCULARPRESSUREINZEBRASHCOMPARISONOFINBREDSTRAINSANDIDENTICATIONOFAREDUCEDMELANINMUTANTWITHRAISEDIOPINVESTOPHTHALMOLVISSCI2004454415E2224TREDENS,LANGENAUDM,TRAVERD,LOOKAT,ZONLITHEUSEOFZEBRASHTOUNDERSTANDIMMUNITYIMMUNITY200420367E7925VANDERSARAM,APPELMELKBJ,VANDERBROUKEGRAULSCM,BITTERWASTARWITHSTRIPESZEBRASHASANINFECTIONMODELTRENDSMICROBIOL200412451E7
