1、课下综合检测 一、单项选择题 1下列有关细菌培养的叙述，正确的是( ) A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长 D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 解析：选 D 单个菌落中含有一种细菌，培养基中加入青霉素能抑制 细菌生长；破伤风 杆菌是厌氧型生物。 2(2013无锡一中期中)大肠杆菌的代谢产物 (有机酸)能与伊红和美蓝结合，使菌落呈 深紫色，并带有金属光泽。下表为伊红美蓝培养基的配方，下列说法错误的是( ) 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 伊红 美蓝 琼脂 蒸馏水 10 g 1
2、0 g 5 g 2 g 0.4 g 0.065 g 10 g 1 000 mL pH 调 至 7.2 A.从物理性质看，伊红美蓝培养基是固体培养基 B从配制方法上看，伊红 美蓝培养基应先调节 pH 后灭菌 C从用途来看，伊红美蓝培养基是鉴别培养基 D从营养来看，伊红美蓝培养基缺少生长因子 解析：选 D 蛋白胨中含碳源、氮源和生 长因子。 3下列对菌落的表述不正确的是( ) A每个菌落都是由多种细菌大量繁殖而成 B各种霉菌在面包上生长形成的不同颜色的斑块即为菌落 C噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解，菌落变得透明 D细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同 解析：选 A 一个菌落是由单个微生物大量繁
3、殖而成；不同微生物在特定培养基上生长 形成的菌落具有稳定的特征，可以成 为对该类微生物进行分 类、 鉴定的重要依据。 4(2014广州模拟) 消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远 丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无 害。下列适用于消毒处理的是( ) 皮肤 饮用水 牛奶 注射器 培养皿 接种环 培养基 果汁 酱油 手术刀 A B C D以上全部 解析：选 A 消毒指用比较温和的方法杀死物体表面或内部的部分微生物。 题中的皮肤、 饮用水、牛奶、果汁、酱油适用于消毒的方法处理，而注射器、培养皿、接种环、培养基、手术 刀等必须进行灭菌处
4、理。 5有关稀释涂布平板法的叙述错误的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C结果都可在培养基表面形成单个的菌落 D涂布时需在酒精灯火焰旁进行 解析：选 C 稀释涂布平板法，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一 个菌落，因此稀释涂布平板法中的菌液不是都可在培养基表面形成单个的菌落。 6(2013泰州期末)关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是( ) A溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入烧杯 B常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等 C配制固体培养基时加入琼脂，其目的是为微生物生长提供碳源 D用移液
5、管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀 解析：选 D 牛肉膏容易吸潮，将称好的牛肉膏连同称量 纸一同放入烧杯，加入少量的 水，加热，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。灼烧属于灭菌方法，常见 的消毒方式有煮沸、喷洒化学 药剂、酒精擦拭双手等；配制固体培养基时加入琼脂，只起凝固 作用。 7(2014扬州中学考前适应性考试) 下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为 1、2、3、4、5 五个区域依次进行。下列叙述正确的是( ) A在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B划线操作时打开皿盖，划完立即盖上 C接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的 D第
6、1 区和第 5 区的划线最终要相连接起来，以便比较前后的菌落数 解析：选 C 划线前后要对接种环灭菌，培养基在倒平板前已经灭菌，划线操作时在无 菌火焰旁进行；划线操作时培养皿盖不能完全打开；第 1 区和第 5 区的划线最终不能相互连 接。 二、多项选择题 8(2014常州高三质检)苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯 酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中 筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。 下列相关叙述正确的是( ) A图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源 B如果要测定中活细菌数量
7、，常采用稀释涂布平板法 C若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一碳源 D使用平板划线法可以在 上获得单菌落 解析：选 ABD 若为对照实验，则中培养基应含除苯酚外的其他碳源，中以苯酚 作为唯一碳源。 9下列关于微生物培养和利用的叙述，正确的是( ) A利用稀释涂布平板法可对微生物进行计数 B接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落 C在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌 D利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 解析：选 ABD 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基可用来鉴定尿素分解菌。 三、非选择题 10(2014如皋中学段考)回答微生物培养的有关问题
8、。 (1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、_和_ 等条件。 (2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_； 操作者的双手需要进行清洗和_；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫 外线能使蛋白质变性，还能_。 (3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值， 除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_。 (4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的_ 等特征对细菌进行初步 的鉴定( 或分类)。 (5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能 丢弃，以防止培养物的扩散。 解析：(1)培
9、养微生物需要一定的营养和适宜的温度、pH 和渗透压。(2)消毒是指使用较 为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物(不包括芽孢和孢子) 。灭菌是 指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽 孢和孢子。 对培养基和培养皿进 行灭菌；操作者的双手 需要进行清洗和消毒。(3)稀释度数比例合适才能将聚集在一块的微 生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，便于统计原菌种数目。(4) 菌落具 有物种特异性，根据菌落的颜 色、形状、大小判断进行细菌鉴定。(5)使用过的培养基及其培 养物需要经过灭菌处理才能丢弃，以防培养物的 扩散造成 污染。 答案：(1)酸碱度 渗透压 (
10、2)灭菌 消毒 损伤 DNA 的结构 (3) 比例合适 (4)形状、 大小、颜色 (5) 灭菌 11(2014盐城二模)国家饮用水标准规定，每升饮用水中大肠杆菌不超过 3 个。某小 组欲通过实验来检测自来水中大肠杆菌的含量，已知大肠杆菌在伊红美蓝培养基培养， 大肠杆菌菌落呈深紫色。请根据下列有关实验步骤回答问题： (1)配制培养基：配制伊红美蓝培养基时，除蛋白胨、乳糖、伊红、美蓝等原料外， 还需要水、无机盐和_。在这些成分中，能为大肠杆菌提供氮源的是 _。搅拌加热至完全溶解后调节_，分装到锥形瓶。 (2)倒平板：配制好的培养基用_法灭菌后，待培养基冷却到 50左右倒平板。 平板冷凝后应将平板_
11、放置，以防止皿盖上的水珠落入培养基。 (3)接种：在下图的系列稀释操作中(10 1、10 2、10 3 表示稀释倍数)，依次将 1 mL 液体 移入下一个盛有_mL 蒸馏水的试管中。过程 a 所用的接种方法为_。 (4)观察与计数：通过一段时间的培养，观察统计培养皿表面深紫色菌落的数目，结果 如图所示，则自来水样本中大肠杆菌超标_万倍。 解析：(1)微生物生长需要碳源、氮源、生 长因子、水和无机盐，另外配制固体培养基需 要添加琼脂。蛋白胨中含有氮，能为大肠杆菌生长提供氮源，培养基在分装前要调节好 pH。(2)常用高压 蒸汽灭菌法对 培养基进行灭菌，灭菌后待其冷却至一定的温度进行倒平板， 平板冷
12、凝后应倒置，以防止皿盖上的水珠落入培养基影响微生物的生 长。 (3)因为稀释倍数依 次是 10 倍、100 倍、1 000 倍，故将上一 试管的 1 mL 液体移入下一个盛有 9 mL 蒸馏水的试 管中即可。(4)为 保证结果准确，一般选择菌落数在 30300 的平板进行计数，图示中只有 30 符合要求，其稀释度倍数为 102，所用稀 释液体积为 0.1 mL，计算菌落总数为： 300.1102310 4 个/mL,1L 水中就高达 3107 个，是国家规定的标准的 1107 倍。 答案：(1)琼脂 蛋白胨 pH (2)高压蒸汽灭菌 倒过来(倒置) (3)9 (稀释)涂布 (抹) 平板法 (4
13、)1 000 12(2013徐州、宿迁三模)要获得遗传特性单一的枯草杆菌菌种，一般必须对原有的 菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答以下问题： (1)获得纯净枯草杆菌的关键是_，为此，必须对培养皿、接种用具和培养基进 行严格灭菌。在接种或倒平板操作时，除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和 实验空间进行严格清洁和消毒外，还必须_，以防止空气中的杂菌污染。 (2)右图是纯化枯草杆菌的方法，该纯化分离方法的名称是_。 (3)枯草杆菌可以产生 淀粉酶，以下是利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶菌 株的主要实验步骤。(原理：菌株生长过程中可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌
14、落周 围形成透明圈。) 第一步：将枯草杆菌接种到液体培养基上进行扩大培养。 第二步：将枯草杆菌分成 A、 B 两组，_。 第三步：制备多个含淀粉的固体培养基。 第四步：将 A、B 组分别稀释后，分别在含淀粉的固体培养基上利用_法分离， 适宜条件下培养得到单菌落。 第五步：观察 A、B 组各菌落周围的_。 实验结果预期：据诱发突变率低的特点，预期_； 据诱发突变不定向性的特点，预期_。 解析：(1)获得纯净枯草杆菌的关键是防止杂菌的污染。在接种或倒平板操作时，除了在 超净工作台上进行操作并对实验者的衣着、手和 实验空间进 行严格清洁和消毒外， 还必须在 酒精灯火焰旁操作，以防止空气中的杂菌污染。
15、 (2)图中纯化分离枯草杆菌的方法为平板划线 法。(3)根据实验 目的“利用诱变育种方法培育获得产生较多淀粉酶菌株” ，可推测第二步中 将枯草杆菌分成 A、B 两组后，应设置对照处理，即 A 组用 诱变剂处理，B 组不处理(作对照)。 第四步纯化、分离枯草杆菌时 可利用稀释涂布法分离计数。第五步根据实验原理的提示，观 察 A、B 组各菌落周围的透明圈大小。实验结果预测：据诱发 突变率低的特点，预期 A 组多 数菌落周围的透明圈与 B 组差异不大，极少数有所不同；据诱发突变具有不定向性的特点， 预期 A 组有少数菌落周围的透明圈比 B 组明显小，可能有少数比 B 组明显大。 答案：(1)防止外来杂菌的侵入 在酒精灯火焰旁操作 (2)平板划线法 (3)A 组用诱变 剂处理，B 组不处理(作对照) 稀释涂布 透明圈大小 A 组多数菌落周围的透明圈与 B 组差异不显著 A 组有少数菌落周围的透明圈比 B 组明显小，有少数比 B 组明显大(或 A 组透明圈大小不一，B 组较一致 )
