1、实验目的 掌握 家兔耳缘静脉注射法 家兔颈部手术操作、神经血管分离、气管插管技术 记录家兔呼吸曲线 观察 血液中化学因素( CO2, O2和 H+)及药物对呼吸运动的影响 迷走神经对呼吸运动的调节 了解 各种因素影响呼吸运动的机制 实验原理 o 呼吸运动是受呼吸中枢控制的呼吸肌节律性活动,伴随 着压力变化而使气体进出呼吸道。 o 呼吸运动受神经以及血液中 PO2, PCO2, H+等因素 的调节。 o 药物能作用于呼吸中枢而影响呼吸运动。 o 肺牵张反射的传入神经是迷走神经,通过此反射弧完成 正常地节律性呼吸。 实 验 材 料 1、 动 物: 家兔 2、 器 械: 动物手术器材(手术刀、手术剪
2、、止血钳 、玻璃分针 ,动脉夹,丝线,注射器,兔手 术台),气管插管, 橡皮管(长 1 m以上,短 10-20 cm), 体重秤,呼吸换能器(或张力 换能器), 生物信号处理系统等 。 3、 药品和试剂 : 20%乌拉坦、 3%乳酸、 生理盐水等 。 实 验 方 法 一、 仪器连接与标定 二、 称重、麻醉 三、 固 定 、 剪 毛 四、 颈 部 手 术 五、 气 管 插 管 六、分离迷走神经 七、腹部手术 八、项 目 观 察 1、仪器的连接与标定 换能器和微机记录系统的信号输入通道连 接,刺激电极与刺激输出通道连接 设定记录呼吸运动的参数 o 捉拿 :实验家兔多数 饲养在笼内,所以抓 取较为方
3、便,一般以 右手抓住兔颈部的毛 皮提起,然后左手托 其臀部或腹部,让其 体重重量的大部分集 中在左手上,这样就 避免了抓取过程中的 动物损伤。不能采用 抓双耳或抓提腹部。 1、 2、 3均为不正确的抓取方 法( 1可损伤两肾, 2可 造成皮下出血, 3可伤两耳 ), 4、 5为正确的抓取方法 。颈后部的皮厚可以抓,并用 手托兔体。 2、捉拿、称重、麻 醉 称重、麻 醉 麻醉 o 兔耳缘静脉注射: 20%氨基甲酸乙酯 ( 1)注射液剂量 o 5 ml/kg体重,根据动物状态调整剂量 ,每次增加 10%左右 o 抽吸麻醉液时先取下针头, 多吸一部分, 排出气泡 ; ( 2)进针 注射姿势调整 o
4、选择 耳缘静脉,用 酒精刺激后血管较粗;按压住血管根部,血管 鼓起再进针,比较容易 o 从 远心端 开始;循序向根部移动,每次移动距离不要太大,以免 注射不成功或加药时无法注射。左右耳 o 针头扎进 1/3至 1/2,并用拇指固定住,以免兔挣扎时退出。 o 注射时推动液体 先快后慢 (前 1/3快,后面慢慢推进) 随时观 察动物状态。 o 剩余麻醉液需回收; 兔耳缘静脉注射时的注意事项 o 麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药 途径; o 进行静脉麻醉时,先将总用药量的三分之一快 速注入,使动物迅速渡过兴奋期,余下的三分 之二量则应缓慢注射,并密切观察动物麻醉状 态及反应,以便准确判断麻醉
5、深度; o 如麻醉较浅,动物出现挣扎或呼吸急促等,需 补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量 不宜超过原总用药量的五分之一; o 麻醉过程中,应随时保持呼吸道通畅,并注意 保温; 麻醉效果的观察 o 呼吸:深慢而平稳 o 角膜反射:明显迟钝 o 肌张力:全身肌肉松弛 o 皮肤夹捏反射消失。 3. 家兔固定和剪毛 l固定用细绳 回收 l固定头部要点: 门牙 拉直以使颈部挺 起,便于手术 剪毛: 剪刀 贴住 皮肤剪毛; 提起毛再剪,易剪破皮肤 4. 颈部手术颈部手术 v 颈部 正中 切口 分离 软组织 暴露气管 钝性 分离双侧迷走神 经 各自穿 2根 丝线备 用 v 钝性 分离气管 , 底下 穿
6、棉线备用 v 气管倒 T形切口,插入 Y形气管插管,棉线固 定 o 手术刀割开皮肤 一手绷紧皮肤, 另一手用力 一次性割开皮肤 o 分离软组织 用剪刀、镊子分离出气管 除净气管外表的 结缔组织 等 棉花条 清除气管内的淤血、粘液等 穿线备用 5.气管插管 气管插管术示意图 -示气管切口 环状软骨下 1cm , 做倒 T型切口 气管插管术示意图 -示固定插管 将三通管向肺方向插入,固定 6. 分离神经 o 由里向外翻出气管一侧组织 颈动脉鞘: 粗 迷走神经 中 交感神经 细 减压神经 神经分离示意图 神经分离示意图 -示迷走神经 7、腹部手术 o 切开胸骨下端剑突部位 的皮肤 ,再沿腹白线切 开
7、长约 2ml的切口。细 心分离表面的组织(勿 伤及胸骨),暴露出剑 突与骨柄(注意不要伤 害膈肌)。 o 2、将系有长线的金属 钩钩住或用线系住胸骨 柄,线的 另一端接张力 换能器 。 o 连接实验装置 o 选实验项目: 呼吸运动的调节 8、观察正常呼吸曲线 正常呼吸曲线的频率和幅度 7. 观察呼吸运动的影响因素 1. 增加 无效腔 (观察呼吸频率和幅度变化) 2. 窒息:夹闭两侧气管软管(几秒到几十秒,时间不要太长,否则会引起 窒息死亡)( 观察呼吸频率和幅度变化 ) 3. 吸入 CO2:肺活量较大的同学呼出的 CO2, 10s以上吹气(不要对着软 管直接吹,用手捧住软管,相对密闭,吹气)。(观察呼吸频率和幅 度变化) 4. 吸气末吹气,呼气末抽气。 5. 静脉内注入 3乳酸 2ml(观察呼吸频率和幅度变化) 6. 切断 右侧迷走神经 ,观察呼吸频率和幅度。再切断 左侧迷走神经 ,观察 呼吸频率和幅度变化。 连续电脉 冲刺激迷走神经中枢端 (靠近头部的一端), 观察呼吸频率 和幅度变化。 实验结果