1、一、填空题 1构成蛋白质的氨基酸有 种，一般可根据氨基酸侧链（R）的 大小分为 侧链氨基酸和 侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔 是具有 性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有 性。碱性氨基酸（pH67 时荷正电）有两种，它们分别是 氨基酸和 氨 基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是 氨基酸和 氨基酸。 2紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有 氨基酸、 氨基酸或 氨基酸。 4氨基酸与水合印三酮反应的基团是 ，除脯氨酸以外反应产物的颜色是 ；因为脯氨酸是 亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示 色。 6镰刀状贫血症是最早认识的
2、一种分子病，患者的血红蛋白分子 亚基的第六位 氨酸被 氨酸所替代，前一种氨基酸为 性侧链氨 基酸，后者为 性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较 低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 11在适当浓度的 -巯基乙醇和 8M 脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为 RNA 酶的 被破坏造成的。其中 -巯基乙醇可使 RNA 酶分子中的 键破 坏。而 8M 脲可使 键破坏。当用透析方法去除 -巯基乙醇和脲的情况下，RNA 酶 又恢复原有催化功能，这种现象称为 。 12细胞色素 C，血红蛋白的等电点分别为 10 和 7.1，在 pH8.5 的溶液中它们分别荷的电
3、性是 、 。 13在生理 pH 条件下，蛋白质分子中 氨酸和 氨酸残基的侧链几乎 完全带负电，而 氨酸、 氨酸或 氨酸残基侧链完全荷正 电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 15当氨基酸溶液的 pHpI 时，氨基酸（主要）以 离子形式存在；当 pHpI 时，氨基酸（主要）以 离子形式存在；当 pHpI 时，氨基酸（主要）以 离子形式存在。 18蛋白质变性的主要原因是 被破坏；蛋白质变性后的主要特征是 ；变性蛋白质在去除致变因素后仍能（部分）恢复原有生物活性，表明 没被破 坏。这是因为一级结构含有 的结构信息，所以蛋白质分子构象恢复后仍能表 现原有生物功能。 19盐析作用是指 ；盐溶作用是 指
4、 。 20当外界因素（介质的 pHpI、电场电压、介质中离子强度、温度等）确定后，决定蛋白质 在电场中泳动速度快慢的主要因素是 和 。 二、选择填空题 1侧链含有咪唑基的氨基酸是（ ） A、甲硫氨酸 B、半胱氨酸 C、精氨酸 D、组氨酸 2PH 为 8 时，荷正电的氨基酸为（ ） A、Glu B、Lys C、Ser D、Asn 3精氨酸的 Pk1=2.17、Pk 2=9.04（-NH 3）Pk 3=12.48（胍基） PI=（ ） A、1/2(2.17+9.04) B、1/2(2.17+12.48) C、1/2(9.04+12,48) D、1/3（2.17+9。04+12。48） 4谷氨酸的
5、Pk1=2.19(-COOH)、pk 2=9.67(-NH3)、pk 3=4.25(-COOH) pl=（ ） A、1/2（2.19+9。67） B、1/2（9.67+4.25） C、1/2(2.19+4.25) D、1/3(2.17+9.04+9.67) 5氨基酸不具有的化学反应是（ ） A、肼反应 B、异硫氰酸苯酯反应 C、茚三酮反应 D、双缩脲反应 6当层析系统为正丁醇冰醋酸水=415 时，用纸层析法分离苯丙氨酸（F）、丙氨酸 （A）和苏氨酸（T）时则它们的 Rf值之间关系应为：（ ） A、FAT B、FTA C、AFT D、TAF 7氨基酸与亚硝酸反应所释放的 N2气中，氨基酸的贡献是
6、（ ） A、25% B、50% C、80% D、100% 8寡肽或多肽测序时下列试剂中最好的是（ ） A、2，4-二硝基氟苯 B、肼 C、异硫氰酸苯酸 D、丹酰氯 9下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容的是（ ） A、多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序 B、多肽链中氨基酸残基的键链方式 C、多肽链中主肽链的空间走向，如 -螺旋 D、胰岛分子中 A 链与 B 链间含有两条二硫键，分别是 A7-S-S-B7，A 20-S-S-B19 10下列叙述中哪项有误（ ） A、蛋白质多肽链中氨基酸残基的种类、数目、排列次序在决定它的二级结构、 三级结构乃至四级结构中起重要作用 B、主肽链的折叠单位肽平面
7、之间相关一个 C碳原子 C、蛋白质变性过程中空间结构和一级结构被破坏，因而丧失了原有生物活性 D、维持蛋白质三维结构的次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力和范德华力 11蛋白质变性过程中与下列哪项无关（ ） A、理化因素致使氢键破坏 B、疏水作用破坏 C、蛋白质空间结构破坏 D、蛋白质一级结构破坏，分子量变小 12加入下列试剂不会导致蛋白质变性的是（ ） A、尿素（脲） B、盐酸胍 C、十二烷基磺酸 SDS D、硫酸铵 13血红蛋白的氧合动力学曲线呈 S 形，这是由于（ ） A、氧可氧化 Fe（），使之变为 Fe（） B、第一个亚基氧合后构象变化，引起其余亚基氧合能力增强 C、这是变构效应的显著
8、特点，它有利于血红蛋白质执行输氧功能的发挥 D、亚基空间构象靠次级键维持，而亚基之间靠次级键缔合，构象易变 14下列因素中主要影响蛋白质 -螺旋形成的是（ ） A、碱性氨基酸的相近排列 B、酸性氨基酸的相近排列 C、脯氨酸的存在 D、甘氨酸的存在 15蛋白质中多肽链形成 -螺旋时，主要靠哪种次级键维持（ ） A、疏水键 B、肽键 C、氢键 D、二硫键 16关于蛋白质结构的叙述，哪项不恰当（ ） A、胰岛素分子是由两条肽链构成，所以它是多亚基蛋白，具有四级结构 B、蛋白质基本结构（一级结构）中本身包含有高级结构的信息，所以在生物 体系中，它具有特定的三维结构 C、非级性氨基酸侧链的疏水性基团，避
9、开水相，相互聚集的倾向，对多肽链 在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用 D、亚基间的空间排布是四级结构的内容，亚基间是非共价缔合的 17有关亚基的描述，哪一项不恰当（ ） A、每种亚基都有各自的三维结构 B、亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在 C、一个亚基（单位）只含有一条多肽链 D、亚基单位独立存在时具备原有生物活性 18关于可溶性蛋白质三级结构的叙述，哪一项不恰当（ ） A、疏水性氨基酸残基尽可能包裹在分子内部 B、亲水性氨基酸残基尽可能位于分子内部 C、羧基、氨基、胍基等可解离基团多位于分子表面 D、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等残基尽可能位于分子内部 19蛋白质三级结构形
10、成的驱动力是（ ） A、范德华力 B、疏水作用力 C、氢键 D、离子键 20引起蛋白质变性原因主要是（ ） A、三维结构破坏 B、肽键破坏 C、胶体稳定性因素被破坏 D、亚基的解聚 21以下蛋白质中属寡聚蛋白的是（ ） A、胰岛素 B、Rnase C、血红蛋白 D、肌红蛋白 22下列测定蛋白质分子量的方法中，哪一种不常用（ ） A、SDS-PAGE 法 B、渗透压法 C、超离心法 D、凝胶过滤（分子筛）法 23分子结构式为 HSCH 2CHCOO 的氨基酸为（ ） A、丝氨酸 B、苏氨酸 C、半胱氨酸 D、赖氨酸 26关于二级结构叙述哪一项不正确（ ） A、右手 -螺旋比左手 -螺旋稳定，因为
11、左手 -螺旋中 L-构型氨基酸残基侧链 空间位阻大，不稳定； B、一条多肽链或某多肽片断能否形成 -螺旋，以及形成的螺旋是否稳定与它 的氨基酸组成和排列顺序有极大关系； C、多聚的异亮氨基酸 R 基空间位阻大，因而不能形成 -螺旋； D、-折叠在蛋白质中反平行式较平行式稳定，所以蛋白质中只有反平行式。 27根据下表选出正确答案： 样品液中蛋白质的组分 蛋白质的 pI 蛋白质分子量 MW(KD) A 6.2 40 B 4.5 30 C 7.8 60 D 8.3 80 pH8.6 条件下电泳一定时间，最靠近阳极的组分一般是（ ）； SephadexG 100柱层析时，最先洗脱出来的组分应该是（ ）
12、。 28前胰岛素原信号肽的主要特征是富含下列哪类氨基酸残基（ ） A、碱性氨基酸残基 B、酸性氨基酸残基 C、羟基氨基酸残基 D、亲水性氨基酸残基 29蛋白质三维结构的构象特征主要取决于（ ） A、氨基酸的组成、顺序和数目 B、氢键、盐键、范德华力和疏水力 C、温度、pH 和离子强度等环境条件 D、肽链间或肽链内的二硫键 30双缩脲法测定禾谷类作物样品中的蛋白质含量时，加入少量的四氯化碳（CCl4)其主要作用 是（ ） A、促进双缩脲反应 B、消除色素类对比色的干扰 C、促进难溶性物质沉淀 D、保持反应物颜色的稳定 31醋酸纤维薄膜电泳时，下列说法不正确的一项是（ ） A、点样前醋酸纤维薄膜必
13、须用纯水浸泡一定的时间，使处于湿润状态 B、以血清为样品，pH8.6 条件下，点样的一端应置于电泳槽的阴极一端 C、电泳过程中保持恒定的电压（90110V）可使蛋白质组分有效分离 D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾，结果不易分析 三、是非判断（用“对”、“错”表示，并填入括号中） 1胰岛素分子中含有两条多肽链，所以每个胰岛素分子是由两个亚基构成（ ） 2蛋白质多肽链中氨基酸的种类数目、排列次序决定它的二级、三级结构，即一级结构含有高 级结构的结构信息。（ ） 3肽键中相关的六个原子无论在二级或三级结构中，一般都处在一个刚性平面内。（ ） 4构成天然蛋白质的氨基酸，其 D构
14、型和 L型普遍存在。（ ） 5变构效应是蛋白质及生物大分子普遍的性质，它有利于这些生物大分子功能的调节。（ ） 6功能蛋白质分子中，只要个别氨基酸残基发生改变都会引起生物功能的丧失。（ ） 7具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质有的生物活性。（ ） 8胰岛素分子中含有 A7-S-S-B7，A 20-S-S-B19和 A6-S-S-A11三个二硫键，这些属于二级结构的 内容。（ ） 9 -折叠是主肽链相当伸展的结构，因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。（ ） 10在 RNase（核糖核酸酶）分子中存在 His12、His 119侧链的咪唑基及 Lys41-NH3由于多肽链是
15、 按特定方式折叠成一定空间结构，这三个在一级结构上相距甚远的氨基酸残基才彼此靠近构成 RNase 的催化中心。（ ） 11变性后的蛋白质电泳行为不会改变（ ） 12沉降系数 S 是蛋白质以及核酸分子量大小常用的表示单位。（ ） 13调节溶液的 pH 值对盐析分离蛋白质影响不大。（ ） 14Folin-酚试剂法测定蛋白质的灵敏度较高，但由于不同蛋白质含有酪氨酸的量不尽相同， 会使测定结果往往带来较大偏差。（ ） 15重金属盐对人畜的毒性，主要是重金属离子会在人体内与功能蛋白质结合引起蛋白质变性 所致。（ ） 16利用蛋白质系数计算粗蛋白含量时对不同的生物样品都一样（即为 6.25）。（ ） 17
16、胰蛋白酶作用时对肽键 N-端氨基酸残基的要求是赖氨酸或精氨酸，这种专一性可称为基团 专一性。（ ） 18同源蛋白质中，保守性较强的氨基酸残基在决定蛋白质三维结构与功能方面起重要作用， 因此致死性突变常常与它们的密码子突变有关。（ ） O 19肽平面或酰胺平面是因为CNH结构中 C=0 的 电子离域或说是 sp2杂化 N 的孤对 电子与 C=0 P- 共轭后引起的。（ ） 20有两种蛋白质 A 和 B 的等电点分别是 6.5 和 7.2，在 pH 为 8.5 的条件下同一静电场中 A 一 定比 B 向异极泳动速度快。（ ） 21多肽链出现 180回折的地方会形成转角，其中甘氨酸和脯氨酸常出现在
17、-转角处，因为 其侧链较短，对 41 氢键形成空间位阻小。（ ） 22苯丙氨酸疏水性比缬氨酸强（ ） 23由于静电作用，在等电点时氨基酸的溶解度最小（ ） 24渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及 PAGE（聚丙稀酰胺凝胶电泳）法都是利用蛋白质的物 理化学性质来测定蛋白质的分子量的（ ） 25当某种蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点 为 7.0（ ） 26蛋白质的亚基（或称为亚单位）和肽是同义词（ ） 四、解释下列名词 1二面角 2蛋白质一级结构 3蛋白质二级结构 4蛋白质三级结构 5蛋白质四级结构 6超二级结构 7别构效应 8同源蛋白质 9简单蛋白质 10结
18、合蛋白质 11蛋白质变性作用 12蛋白质盐析作用 13蛋白质分段盐析 14结构域 15寡聚蛋白 16构象 17构型 18肽单位 19肽平面 20螺旋 21 折叠或 折叠片 22超二级结构 23转角 24蛋白质的变性作用 25蛋白质的复性作用 26亚基 五、问答题 1组成蛋白质的 20 种氨基酸依据什么分类？各类氨基酸的共同特性是什么？这种分类在生物 学上有何重要意义？ 2蛋白质的基本结构与高级结构之间存在的关系如何？ 3Edman 反应所有的试剂和反应的特点如何？ 4何谓蛋白质等电点？等电点时蛋白质的存在特点是什么？ 5何谓盐析？分段盐析粗分蛋白质的原理是什么？ 6哪些因素可引起蛋白质变性？变
19、性后蛋白质的性质有哪些改变？ 7蛋白质分离分析技术常用的有哪几种，简述凝胶过滤、电泳基本原理。 8有哪些沉淀蛋白质的方法？其中盐析和有机溶剂沉淀法有何区别或特点？ 9溴化氰在多肽裂解中的作用部位，和裂解产物的末端氨酸残基为何物？ 10举例说明蛋白质一级结构与功能关系。 11举例说明蛋白质变构效应与意义。 12一样品液中蛋白质组分为 A（30KD）、B（20KD）、C（60KD），分析说明用 SephadexG100 凝胶过滤分离此样品时，各组分被洗脱出来的先后次序。 13多聚赖氨酸（polyLys）在 pH7 时呈无规线团，在 pH10 时则呈 螺旋；而多聚的谷氨 酸酸（polyGlu）在 p
20、H7 时也呈无规线团，而在 pH4 时则呈 螺旋，为什么？ 14简述胰蛋白酶原激活过程。 15螺旋的特征是什么？如何以通式表示？ 16高浓度的硫酸铵（pH5 时）可使麦清蛋白沉淀析出，并用于初步分离该种蛋白的早期步， 简要说明其原理。 17用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液（洗脱剂：pH3.25，0.2N 柠檬酸钠），其结果如下： 各洗脱峰的面积大小或高度有何含义？Asp 比 Glu 先洗脱出来的原因？ 18为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒的解毒剂？ 六、计算题 1测得一种蛋白质分子中 Trp 残基占分子量的 0.29%，计算该蛋白质的最低分子量（注：Trp 的分子量为 204Da）。 2一种蛋
21、白质按其重量含有 1.65%亮氨酸和 2.48%异亮氨酸，计算该蛋白质最低分子量。（注： 两种氨基酸的分子量都是 131Da）。 3某种氨基酸 COOHpK2.4 ， N H3pK9.6，N H3pK10.6，计算该种氨基酸的等 电点（pI）。 4某种四肽 COOHpK2.4 ， N H3pK9.8，侧链N H3pK10.6 侧链COOHpK4.2， 试计算此种多肽的等电点（pI）是多少？ 5有一种多肽，其侧链上羧基 30 个（pK4.3），嘧唑基有 10 个（pK7）， NH 3（pK10），设 C 末端 羧基 pK3.5，N末端氨基 pK9.5，计算此多肽的 pI。 6已知氨基酸平均分子量
22、为 120Da。有一种多肽的分子量是 15120Da，如果此多肽完全以 螺旋形式存在，试计算此 螺旋的长度和圈数。 答 案： 一、填空 1. 20 非极性 极性 疏水 亲水 赖 精 天 冬 2.色 苯丙 酪 3. OH SH COOH N NH 4.氨基 紫红 亮黄 5.肽 氢键 二硫键 疏水作用（键） 范德华力 二硫键 6. 谷 缬 极 非极 7.异硫氰酸苯酯 从 N-端 依次对氨基酸进行分析鉴定 8. -螺旋 -折叠 转角 无规卷曲 氢 氨基酸种类 数 目排列次序 中断 9. 分子表面的水化膜 同性电荷斥力 10.溶解度最低 电场中无电泳 行为 11.空间结构 二硫 氢 复性 12.正电
23、负电 13.谷 天冬 赖 精 细 15. b a c 二、选择填空 1.D 2.B 3.C 4.C 5.D 6.A 7.B 8.C 9.C 10.C 11.D 12.D 13.B 14.C 15.C 16.A 17.C 18.B 19.B 20.A 22.B 23.C 24.B 25.B 26.D 三、判断题 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 六、计算题 1.解：Trp 残基 MW/蛋白质 MW0.29%，蛋白质 MW64138Da。 2.解：异亮氨酸/亮氨酸2.48%/
24、1.65%1.5/13/2 所以，在此蛋白质中的亮氨酸至少有 2 个，异亮氨酸至少有 3 个。由此推理出： 1.65%2（13118）/蛋白质 MW 答案：蛋白质 MW13697Da。 3.答案：pI10.1 4.答案：pI7.0 5.解：要计算多肽的等电点，首先应该找到静电荷为零的分子状态。在此多肽中最多可以带有 （301）个单位负电荷，而正电荷最多只有（15101）个，相差了 5 个电荷。要想让正负 电荷数相等，只能让 30 个羧基（侧链COOHpK4.3）少带 5 个负电荷（COOHpK3.5，它 比侧链COOH 易于解离，难于接受质子），即在 30 个侧链COOH 中有 25 个处于解离状态 （COO），5 个不解离（COOH）。因此： pHpKalg（碱/酸）4.3lg（25/5）5.0。 6.解：答案：肽链长度43.92(nm)；该蛋白质（或多肽）分子量14640Da
