1、Comment a1: （1 稻田排水中毒死蜱对鲫鱼毒性效应的研究_ 郑璐）Comment a2: （2 毒死蜱对我国南方稻区水域中 12种淡水鱼的毒性_赵颖）Comment a3: （1 稻田排水中毒死蜱对鲫鱼毒性效应的研究_ 郑璐）1毒死蜱对鲫鱼的急性毒性的研究 开 题 报 告一、选题背景及依据1.立题背景农药是现代农业生产中必不可少的一类重要的生产资料,在农业生产中占有非常重要的地位。农药的使用确实提高了粮食的增产和农民的增收,但农药残留的不良影响对环境和人类健康的危害也日益显得突出。残留在土壤中的农药经地表水或降雨进入沟渠、池塘和河流中，进而对水域中淡水鱼类的生长繁殖产生影响，甚至出现
2、邻近养殖水体出现鱼类急性中毒死亡事件，或者造成水体慢性污染而引发系列生态污染事件。毒死蜱作为常用农药，普遍存在于沟渠、池塘和河流中，从而对生活在其中的淡水鱼类具有潜在风险。2.目的及意义毒死蜱(chlorpyrifos)是一种稻田杀虫剂,随着研究的深入,毒死蜱对环境造成的污染和对人体健康造成的危害己越来越得到人们的重视。研究稻田排水中毒死蜱对水生动物的毒性作用是评价毒死蜱对水生生态环境影响与危害的一个重要指标,在毒理学研究中具有重要意义。本文研究的目的在于确定稻田排水中毒死蜱对鲫鱼的半致死浓度及机体急性毒性的大小，毒效应特征和剂量-反应效应，并根据 LD50进行急性毒性分级，为毒死蜱污染的治理
3、提供一定的科学依据。 国内外研究现状(1)毒死蜱的理化性质毒死蜱(chlorpyrifos)是一种有机磷农药,已被广泛应用于防治粮食、水果、茶叶、蔬菜、甘庶、卫生和畜牧体等表面害虫。其原药为白色颗粒状结晶,室温下稳定,有硫醇臭味,密度 1.398(43.5C),焰点 41.543.5C,蒸气压为2.5mPa(25C),可与苯、甲醇、丙酮、正己焼等常用有机溶剂以任意比例互溶。制剂有乳油、颗粒剂。Comment a4: 环境保护部国家污染物环境健康风险名录 化学第二分册 北京：中国环境科学出版社，2011Comment a5: （1 稻田排水中毒死蜱对鲫鱼毒性效应的研究_ 郑璐）2(2)毒死蜱在环
4、境中的分布和代谢毒死蜱除喷雾使用外，还可用颗粒或毒土法直接施用于土壤中。毒死蜱在土壤中相当稳定，其半衰期与施用剂型、施用量、土壤类型、气候及其他因素有关，通常变化在 7120d，甚至长达 1a。与土壤颗粒结合的毒死蜱可通过紫外线、化学水解、脱氯作用、微生物等途径降解，其过程与在动植物体内的降解相似，主要产物是 3,5,6-三氯吡啶-2-醇。毒死蜱与土壤颗粒牢固结合，几乎不会迁移或挥发，而且水溶性低，而其代谢产物 TCP与土壤颗粒结合弱，迁移性和持久性中等。在高 pH值的土壤中毒死蜱的持久性降低。毒死蜱难以直接进入水相，地表径流中的毒死蜱绝大部分是以颗粒结合态存在的。在水体中毒死蜱的挥发半衰期是
5、 3.520d，盛夏季节其光解半衰期为 34 周。毒死蜱水解速度随pH、温度升高而加快，pH7、25时的水解半衰期为 3578d。在空气中毒死蜱可与光化学过程产生的羟基自由基作用，半衰期推算为 411h，产物是毒死蜱氧化物。（3）鲫鱼在毒理学方面的指示作用鲫鱼（ Carassius auratus）属鲤形目、鲤科、鲫属,是主要以植物为食的一种杂食性鱼,喜群集而行,择食而居。鲫鱼肉质细嫩,味道甜美,营养价值很高。与此同时,它的药用价值极高,其性味甘、平、温,入胃、肾,具有和中补虚、利水除湿、补虚、温胃进食、补中生气之功效。鲫鱼分布广泛,遍布全国各地水域常年均有生产,以 2-4月份和 8-12月份
6、的鲫鱼最肥美,为我国重要食用鱼类之一。鲫鱼对养殖水体的水质要求较高,对环境污染物较为敏感。鱼类对水环境的变化非常敏感,当污染物浓度达到一定浓度或强度时,将会引起一系列中毒反应。例如,行为异常,生理功能紊乱,组织病变,直到死亡。鱼类毒性试验的目的是寻找某些毒物或工业废水对鱼类的半数致死浓度和安全浓度,并提供指定水质和污水排放标准的科学依据;测试水体的污染程度和检查废水处理效果等。有时鱼类毒性试验也用于一些特殊目的,如比较不同化学物质毒性的高低,测试不同种类的鱼对毒物的相对灵敏度,测试环境因素中的废水毒性的影响等。因此,进行鱼类毒性试验的研究,对试验结果给出正确合理的评价,对于我国水资源保护具有重
7、要意义。Comment l6: 简单写出两条，具体些，要精华。这部分再精炼。Comment a7: 由预实验和实验决定3二、 研究内容(1)毒死蜱对鲫鱼的急性毒性研究。三、研究方法1实验材料1、实验用动物长度在（101.0 ）cm 完整的健康鲫鱼 300尾，在实验室内驯养 7d,驯养期间死亡率低于 10%。试验前两天停止喂食,挑选大小相对一致、完整健康的鲫鱼,进行试验。2、实验用药毒死蜱一瓶3、实验器材玻璃缸（高 35cm，直径 30cm）6 个；溶解氧测定仪 1个；充氧器 7个；镊子 2个；解剖器具和其它各种玻璃器皿。4、实验动物的喂养环境。实验用水 使用高质量的自然水或标准稀释水，也可以使
8、用饮用水(必要时应除氯)。水的总硬度为 10-250mg/L (以 CaCO3计)， pH 为 6.0-8.5。实验周期 96h。实验负荷 静态实验系统最大承载量为 1.0 g鱼/L。光照每天 12-16h.温度与实验鱼种相适宜，变化范围土 2。溶解氧不低于空气饱和值的 60%。曝气时不能使受试物明显受损。2. 实验方案预试验为确定浓度的大致范围,参考相关文献，先做预备试验,试验浓度梯度可较大一些,每个浓度放入 10尾鱼并设 3个平行,连续试验 96h,筛选出 24hl00%死亡浓度(24h LC 100)和 96h无死亡浓度(96h LC 0)。Comment a8: GB/T 13267-
9、91.水质物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性测定方法,国家环境保护局 .Comment l9: 预期结果没有？遇到这么多问题？如何解决？以确保完成论文？4急性毒性试验根据 GB/T13267-1991水质 物质对淡水鱼急性毒性测定方法,采用静态换水式法,根据预试验中所得 24hl00%死亡浓度(24h LC100)和 96h无死亡浓度(96h LC0),并设置 6个质量浓度梯度和一个对照组 ,每个浓度梯度设 3次重复,每个浓度组投放鲫鱼 10尾,记录各浓度组的 24h、48h、72h、96h 的死亡数。用直线内插法,以浓度为横坐标,死亡率为纵坐标,求出各自的半致死质量浓度(LC50)以及安全浓度。
10、安全浓度根据急性毒性 96hLC50,计算求得安全浓度:安全浓度=96hLC 500.1四、预期结果及可能遇到问题（1）参照相关文献 毒死蜱对鲫鱼的半致死浓度范围是 750670 g /L,安全浓度为 67g/L。（2）本试验用水是模拟稻田排水进行实验室配对的拟合水样,后续研究可在实地稻田排水区建实验区进行试验；（3）本实验选择了淡水鲫鱼,在后续试验中应多选几种鱼进行研究,如草鱼、鲤鱼、鲢鱼、青鱼等；（4）高浓度染毒组试验鲫鱼在染毒 0.5-1h后开始出现中毒现象,鱼体开始失去平衡,出现翻滚、侧游、腮部及口部不时开合长大、呼吸困难等现象,并伴有躁动不安出现先浮到水面,然后鲫鱼逐渐沉至水底,鱼体
11、中后部由于肌肉抽搐而向容器底部弯曲, 2h后始出现死亡。低浓度染毒组的鱼出现症状时间较晚,基本特征和高浓度组相同,但挣扎时间较长。（5）（6）Comment l10: 将表格改为三线表，或用文字表述5五、技术路线图一 技术路线流程框图六、经费预算表 1 经费预算表项目 金额 计算根据缘由计算求得安全浓度，描述毒效应特征查询有关毒死蜱和鲫鱼的相关资料毒死蜱的特性 鲫鱼生活环境实验室人工模拟实验毒死蜱对鲫鱼的毒性试验的预试验毒死蜱对鲫鱼急性毒性研究测定 96hLC50,计算求得安全浓度根据 96hLD50进行急性毒性分级，为毒死蜱污染的治理提供一定的科学依据Comment l11: 在正文中引用地
12、方加上上角标进行标明！6实验材料及药品费用 700 药品，购买实验动物 仪器设备 500 仪器的使用合计 1200 -七、进度安排（一）准备阶段1第一周查阅文献确定题目并完成毕业论文开题报告撰写工作。2第二周将修改好的毕业论文开题报告提交毕业论文指导老师。（二）毕业论文撰写阶段1第三周到第八周完成毕业设计或者实验相关内容2第九周到第十周完成并上交论文初稿（按照毕业论文的正规格式要求进行排版）（三）毕业论文校正阶段1第十一周完成论文二稿并上交。2第十二周完成并上交论文三稿。3第十二周提交毕业论文定稿、毕业论文任务书、开题报告、外文文献翻译及各项答辩表格，准备参加毕业论文答辩。（四）毕业论文答辩阶
13、段第十三周组织完成毕业论文答辩工作。参考文献1郑璐. 稻田排水中毒死蜱对鲫鱼毒性效应的研究D.长春：吉林农业大学，2013:1-43.2赵颖，姚苏梅，刘毅华，等.毒死蜱对我国南方稻区水域中 12种淡水鱼的毒性J.生态毒理学报，2014,9(6):1-8.3夏锦瑜,王冬兰,张志勇,等.毒死蜱和丙溴磷对鲫鱼的毒性效应及其在鱼体中的富集J.江苏农业学报,2010,26(5):1-5.4周杜挺,何可佳.氟虫腈等 7种杀虫剂对鲫鱼的毒性及安全性试验研究J. 农药科学与管理2006,25(9)：1-3.5丁彩霞. 氯氰菊酯对鲫鱼的毒理效应研究D南京：南京农业大学，2007:1-55.6王乙震,黄岁樑,林超
14、,罗阳, 许维.五氯酚钠对鲫鱼的急性毒性:悬浮颗粒物的影响J. 生态毒理学报,2012,7(4):1-8.7崔静,陆光华.有机磷和氨基甲酸酯杀虫剂对鲫鱼的急性毒性研究 C.北京：中国环境科学学会，2009:1-5.78洪旭鹭. 有机农药对淡水水生生物毒性效应研究D.南京：南京信息工程大学，2015:1-61.9赵颖. 淡水鱼类对 3 种农药的敏感性分布（ SSDs）D.杭州：浙江大学，2013:1-90.10姜东生.典型污染物对淡水生物的急性毒性及我国林丹水质基准研究D.南京：南京大学，2014,1-73.11刘泽君,唐雅丽.5 种杀虫剂对 3 种淡水浮游动物的急性毒性J. 安全与环境学报,2
15、017,17(2):1-7.12孙胜男,张治斌, 王倩,原鑫, 吕静,赵文阁,于东.阿特拉津和毒死蜱对东北林蛙的急性毒性研究J. 黑龙江畜牧兽医,2017 ,3(5):1-4.13肖鹏飞,林晓雅, 刘毅华,赵颖, 沈坚,徐吉洋,耿翠敏, 朱国念.基于物种敏感性分布法的毒死蜱对稻田生态系统生态风险评价J. 生态毒理学报,2017,12(3):1-10.14Narra M R,Begum G,Rajender K,et al.Toxic impact of two organophosphate insecticides on biochemical parameters of a food fi
16、sh and assessment of recovery response J.Toxiclogy and Industrial Health,2012,28(5):343-352.15Booth LH,Ohalloran K.2001.Acomparison of biomarker responses in the earthworm Aporrectode caligioosa to the organophosphorus insecticides diazinon and chlorphrifos J.Eevirpn.Tocicol.Chem.20(11):2494-252016 Zhang Z-Y,Zhang C-Z,Liu X-J,et al.Dynamics of pesticide residues in the autumn Chinese cabbge(Brassicchinensis L.)grown in open fieldsJ.Pest Management Science,2006,62:350-355.
