1、不同提取条件对紫竹茎中总黄酮提取量的影响摘要:文章通过分光光度法测定紫竹茎中总黄酮的含量;并经正交实验选定紫竹茎中总黄酮的最佳提取工艺条件为 A2B3C1D1:即提取温度为 90,提取次数为 4 次,回流时间为 60min,料液比为 1:15。 关键词:紫竹;总黄酮;正交实验 中图分类号:S-3 文献标识码:A 文章编号:1674-0432(2012)-12-0040-2 基金项目:国家林业局 948 项目(2008-4-30) “竹子重要性状的基因工程研究技术引进” 、云南省科技计划项目 2009CD073、云南省中青年学术技术带头人后备人才培养项目(2010CI016 ) 共同资助研究。
2、紫竹(Phyllostachysnigra (Lodd.) Munro) , 又名黑竹、乌竹等,属禾本科竹亚科刚竹属,我国南北各地多有栽培1。紫竹为多用途径经济竹种,集园林观赏、工艺品加工与竹材等众多优点于一体, 已成为现代竹产业开发的新兴资源。竹类植物中含有丰富的黄酮类化合物2。近年来我国学者对竹类植物黄酮类化合物做了大量研究,研究表明,竹类植物黄酮类化合物具有明显的抗癌活性、降血脂和降血清胆固醇的作用、显著的抗衰老和抗疲劳作用3-4。本文通过讨论料液比、提取温度、回流时间、提取次数等因素对总黄酮提取的影响,研究了乙醇水溶剂为提取剂提取紫竹茎中总黄酮的可行性,为紫竹资源综合利用提供理论依据。
3、 1 仪器、试剂与材料 1.1 仪器 752-紫外分光光度计、冷凝回流装置、RE-52A 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂) 、电热恒温水浴锅、天平等。 1.2 试剂 乙醇、芦丁标品、硝酸铝溶液等,所用试剂均为分析纯。 1.3 材料 采自西南林业大学竹园,将新鲜紫竹竹茎洗净,冷冻干燥后粉碎,过 30 目筛置于冰箱中备用。 2 方法与结果 2.1 水平因素的考察 单因素实验分析最佳提取条件。根据实验因素选用料液比、提取温度、提取次数、回流时间 4 个因素,每个因素选择 3 个水平,设定因素水平表,见表 1。 2.2 提取方法 按 L9(34)正交表设计方案进行试验,称取干燥过 30 目的紫竹竹茎2
4、.00g 于冷凝回流装置中,加入一定量的 70%乙醇溶剂,在不同温度下,回流提取一定次数和时长, 将提取液合并后,再浓缩并定容,并称取一定量该试液,与硝酸铝试液进行显色反应,并以芦丁为标准溶液,用752-紫外分光光度计在 510nm 下测定吸光度,然后计算出提取液中总黄酮的含量及提取率,实验结果与分析结果见表 2。 从表 2 实验结果可得出:提取温度对于总黄酮提取率的影响显著,其次是提取次数,料液比和回流时间对提取率的影响最小;以 70%乙醇溶剂提取紫竹茎中的总黄酮时,提取温度以水平 A2 为最好,提取次数以水平 B3 为最好,回流时间以水平 C1 为最好,料液比以水平 D1 为最好,即最佳的
5、工艺条件是 A2B3C1D1。进一步进行方差分析结果如下: 方差分析的 F 值检验结果(表 3)表明,因素 A、B、C、D 差异极显著,表明本试验中提取温度() 、提取次数、回流时间(min) 、料液比(g/mL)是影响提取紫竹竹茎总黄酮含量的主要因素。 3 结论 采用 L9(34) ,做温度、提取次数、回流时间和料液比的四因素三水平的正交实验,结果表明最佳的工艺条件为 A2B3C1D1:即提取温度为90,提取次数为 4 次,回流时间为 60min,料液比为 1:15。四个因素影响的主次顺序是提取温度提取次数料液比回流时间。 参考文献 1 吴征镒.云南植物志M.北京:科学出版社,2003. 2 Peterson J,Dwyer J.Flavonoids:Dietary occurrence and biochemical activityJ.Nutrition Research,1998,18:1995-2018. 3 高锦明.植物化学M.北京:科学出版社,2003:191-193. 4 丁明,陈少妃,徐耀华.黄条金刚竹中总黄酮的提取及含量测定J.浙江农业科学,2011(4):910-913. 作者简介:王明悦(1987-) ,女,河南郸城人,硕士研究生,研究方向:植物化学。 通讯作者:王娟(1966-) ,女,云南建水人,云南省林业科学院教授,博士,从事竹类植物研究工作。