1、复习,血小板血型抗原 血小板相关抗原：ABO、HLA 血小板特异性抗原HPA,血小板血型的临床意义,血小板上HLA抗原的同种免疫血小板上ABO血型抗原的同种免疫血小板上HPA抗原的同种免疫血小板上ABH,HLA,HPA抗原均可引起免疫反应;免疫反应程度不一;免疫反应强弱程度的影响因素尚不清楚,血小板血型抗体,血小板抗体也可以分为两类 一类主要是针对人类组织相容性抗原(HLA)I类抗原的抗体，即血小板相关抗体（PAIgG） 一类是针对GP抗原(血小板膜糖蛋白，携带HPA分子）的血小板特异性抗体，称为PBIgG,两次或以上血小板输注无效且无明显非免疫因素导致检测患者血清中是否存在HLA抗体血清中存
2、在HLA抗体 血清中不存在HLA抗体 HLA相符的血小板输注 进一步分析非免疫因素 效果良好 效果不好 是 不是 继续 考虑1、HLA不合 治疗病因 HPA抗体检测 2、非免疫因素 根据临床实际情况 3、HPA 选择是否继续进行 阳性 阴性 4、ABO 血小板输注 HPA相符 HLA相符,二者区别同种异体免疫 输入的血小板很快破坏，输注后1小时 和24小时均不见计数增高非免疫因素 输注后1小时血小板计数增高，但24小时计数不增高或受影响,临床上由于血小板血型抗原引起的血小板减少症主要有5种：血小板输注无效（PTR）输血后紫癜（PTP）新生儿同种免疫血小板减少症（FMAIT/NAIT）被动免疫血
3、小板减少症（PAT）移植相关的同种免疫血小板减少症（TAT),二、输血后紫癜,输血后血小板减少性紫癜(post-transfusion thrombocytopenic purpura，PTTP)，又称“输血后紫癜”, Post-transfusion purpura, PTP: 由于血小板输注后发生同种免疫反应所致，一般发病率低。患者被输入不相容的血小板/全血或多次妊娠而产生血小板抗体，破坏输入的和自身血小板而导致急性和暂时性血小板减少。患者多见于（95%)有多次妊娠或输血史的老年女性。,PTP的病因尚未明确，有数种假说。 抗体致敏形成的血小板抗原抗体复合物与自身正常血小板结合导致血小板破坏
4、 可溶性血小板吸附于正常血小板上，与血小板抗体反应后导致血小板的破坏 血小板抗体与自身和外源性血小板交叉反应,HPA-1a是引起该病的主要抗原。我国绝大部分人为HPA-1a抗原阳性。实验室检查：血小板计数降低、骨髓巨核细胞增生活跃、血清学检查血小板抗体存在但效价和病情无关。,临床表现,输入含血小板的血液制品后710天发病。有明显的免疫反应症状，如畏寒、寒战、高热、荨麻疹，重者有头痛、胸痛、呼吸困难甚至休克。继而血小板明显急性减少，有不同程度的出血表现，皮肤淤点、淤斑，口腔、鼻腔出血，舌黏膜出现血疱，重者可以有血尿、消化道出血或阴道出血；患者体内可检出高效价的血小板特异性抗体并存着自身血小板的破
5、坏，当血小板计数低于10X109/L时，会出现皮下或刀口出血，如不及时处理患者可能死亡，死亡率大约在 5%-10%。,本病输血小板无效，甚至有加重病情的危险，肾上腺皮质激素不能缩短病程，但是，有可能改善出血症状。主要治疗措施为血浆置换或换血，换血浆优于换全血。在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时，应立刻做血浆置换，一次交换65%85%的血浆量，平均在15天后出血症状减退，血小板数目上升。尽可能避免或减少输注血小板及含血小板的血液制品。,大多数PTP为针对HPAla的同种抗体所致2002年英国报道了第2例表现为抗HPA一5a相关PTP。6l岁女性诊断为急性心肌梗塞伴胃肠道出血，在接受6单位
6、压积红细胞5天后，由于HPA一5a抗体发展成PTP，表现为严重的血小板减少症(5000UL)。采用静脉内注射免疫球蛋治疗很成功，提示无论患者发病为何种抗体，这种治疗方法对于PTP患者的治疗是高度有效,三、新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT),Neonatal alloimmune thrombocytopenia, NAIT foetal maternal alloimmune thrombocytopenia, FMAIT发病机制:,胎儿血小板怀孕或生产时进入母体循环胎儿血小板刺激母体产生抗体母亲IgG抗体通过胎盘进入胎儿体内使胎儿血小板致敏血小板破坏增加发生FAIT,第一胎即
7、可发病；病死率约13%；治疗：输入相合的血小板以提高患儿的血小板数，如找不到相合的血小板，可以输注经洗涤和辐射的母亲血小板，也可给患儿做放血治疗；治疗前交叉配血：以母亲血清与供者血小板进行交叉配合试验；预防：母亲在孕期可进行血浆置换。,病例介绍：,患儿，女性，1994年6月3日生 足月顺产，出生体重3.1kg，身高49cm，一般情况尚好，无血管瘤，无肝脾肿大，躯体可见广泛的紫癜。外周血血小板计数为40109，红细胞和白细胞计数正常；腹部超声检查未见血管瘤和其它异常，脑超声检查示出血可能。以输注同型血小板(随机供者)和高剂量免疫球蛋白治疗(每24小时1gkg)，病情得到控制 6月12日出院，出院
8、时血小板计数为154109L。,患儿母亲28岁。第1胎第1产，身体健康，血小板计数为226109I ，无不良嗜好乙型肝炎病毒(HBV)检测阴性从来接受过输血或其它血制品治疗怀孕期间无毒物接触史。,四、被动免疫血小板减少症,Passive alloimmune thrombocytopenia, PAT: 患者输入含有血小板特异性抗体的血浆，在数个小时之内出现血小板减少症，约一周后缓解。一旦发现献血员血浆、血清中含有血小板特异性抗体应立即停止献血，这类献血员多为有妊娠史。,一例因输全血导致的被动免疫血小板减少症,患儿男，6岁。因畏寒、发热、食欲不振1周院。体检：T39 ，P82次分，心肺正常，肝
9、脾无肿大。辅助检查：PLTl47109L，Hb89g/L，RBC343109L，血肥达氏反应01：160，H1：320伤寒LPSPHA试验阳性(1：640)：骨髓常规提示感染。诊断：伤寒。予先锋霉素静脉滴注及对症处理。,因患儿有中度营养不良在体温正常后第6天输同型鲜血100ml，输血10分钟后出现畏寒、寒故，肌注非那更15mg缓解。次晨患儿全身皮肤广泛出血点，臂部、前胸、腋下大片瘀斑，查PLT为32109L，8小时后降至121091 ，血Hbl03gLRBC4.0109L，PT、KPTT正常，尿潜血、尿三胆、尿FDP均阴性。予地塞米松4rngd及vit C静脉滴注1O天，紫癜隐退，plt回升至
10、135109L(血小板动态变化见图)。,移植相关的同种免疫血小板减少症,Transplantation-associated alloimmune thrombocytopenia, TAT: 移植后因血小板抗原引起的血小板减少症；该病较罕见。 官接受者的淋巴细胞产生抗外来移植物（血小板）的特异性抗体；或供体器官中残留的淋巴细胞产生抗宿主血小板的抗体 免疫球蛋白疗法和脾切除法能使血小板计数正常化。,血小板自身免疫作用,血小板自身免疫作用可产生特发性血小板减少性紫癜（Idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP).自身免疫性疾病，患者体内存在抗自己血小板的特异
11、性抗体导致血液中血小板减少，为临床最常见的免疫性血小板减少症。抗体多为IgG、IgA，少数病人为IgM抗体。抗体的Fab片段和血小板膜糖蛋白结合后使得血小板抗体复合物经单核吞噬系统（由Fc段和其受体结合）被吞噬破坏。,本病以皮肤粘膜下及其他部位出血为主要表现。1.急性型。多见于儿童，发病前l3周常有上呼吸道及其他病毒感染史。起病急，出血严重。突发广泛的皮肤粘膜血点或成片瘀斑。甚至皮下血肿。常伴有鼻衄、牙龈出血等。胃肠和泌尿道出血可见便血及尿血。偶见结膜下、视网膜出血。少数患者同时伴有内脏或颅内出血而出现严重的不良后果。2.慢性型。多见于成人，病程为个月以上。起病缓。出血症状轻，一般仅见皮肤瘀点
12、或瘀斑反复发作性出现，或常见鼻衄、齿龈出血、结膜出血等其他出血倾向。女性患者可以月经过多或子宫出血为主要表现。长期反复大量出血而引起贫血者，可出现低热、乏力、头昏、失眠及脾肿大等,至今未能证明ITP相关自身抗体的特异性。有研究表明，ITP相关抗体有些是自身隐蔽抗原的抗体。速发型ITP多见于感染后儿童，症状多样，超过90%的病例预后良好，死亡率1%。慢性ITP多由于淋巴组织增生、占位性肿瘤及其他自身免疫疾病。其预后基于出血程度。,药物所致血小板抗体及疾病,1929年证明了奎宁引起血小板减少症；1953年证明了奎宁引起的血小板减少症患者血清中存在该药引起的抗体,抗体、药品、血小板反应的机制：机制未
13、完全清楚药品作为一种半抗原和血小板膜形成复合物，产生的抗体识别该复合物进而使血小板破坏；血小板膜上的奎宁引起血小板膜隐蔽的抗原暴露，形成新的血小板抗原，刺激机体产生抗体导致血小板破坏,血小板血型的检测,血小板血型检测,抗体的筛选和鉴定交叉配血血型鉴定,血小板抗体检查,正确检测出血清中血小板抗体及其特异性对获得有效的血小板输注是至管重要的。目前的检测方法多种： 免疫荧光、ELISA、SPISA、Micro-column gel、SEPSA等。,1、血小板黏附免疫荧光试验Platelet adherence immunofluorescence test PAIFT,原理为用已知血小板黏附于一种特
14、殊的玻璃孔中，和被检血清反应后洗净，使用荧光素标记的兔抗人IgG免疫球蛋白避光静置后在荧光显微镜下观察结果。该方法为早期的检测血小板抗体的敏感方法，1986年国际血小板血清学会将其作为标准的参考方法，并规定任何新方法应和其进行比较。,2、简易致敏红细胞血小板血清学试验SEPSA,原理：在微孔板上进行，血小板固定在孔壁上，与被检血清反应后以抗IgG指示细胞反应得到结果如果血小板上无抗体 ，则指示细胞聚集在孔底 ，形成细胞扣 ，为阴性结果，反之则为阳性。,该方法检测的是所有血小板相关抗体,包括特异性血小板抗体和HLA 抗体, 适用于广泛的血小板抗体筛查血小板附着在固相中，造成部分特异性抗原决定簇丢
15、失现象。利用磷酸氯喹溶液处理血小板, 除去血小板表面的HLA 抗原, 对该方法进行了优化。耗时较长, 灵敏性差, 目前已很少采用。,3、修饰的抗原捕获酶联免疫吸附试试验（Modified antige capture ELISA,MACE）,1 洗涤PLT,制备50%PLT悬液.2 PLT与患者血清或血浆在管内发生反应,若有相应抗体,则结合到PLT上形成复合分子.3 洗涤去掉其中未结合的Ig.4 裂解PLT,游离出抗原-抗体复合分子.5 加裂解液到相应的微孔内,孔壁上包被的抗体可结合(抓获)其中的抗原或抗原-抗体复合分子.6 洗涤,去掉未结合的Ig.7 加酶标二抗(anti-Ig),结合到抗原
16、-抗体复合分子上,形成一条反应链;病人血液中无相应的抗体,则反应链不成立.8 洗涤去掉未结合的二抗.9 加底物显色.10 终止反应,测OD值,判断结果.,ELISA for Platelet Antibody Detection,单克隆抗体固着血小板抗原分析McAb immobilization of platelet antigen,MAIPA原理类似于MACE，但更复杂。 同MACE一样,由于血清中抗体是与完整的血小板细胞反应,而不是附着在固相中, 避免了部分特异性抗原决定簇丢失现象发生,因此,MACE和MAIPA较固相吸附实验更有优势.,实验过程,血小板与血清孵育、离心、洗涤再与鼠抗血小
17、板单克隆抗体孵育，离心洗涤后，加入裂解液使血小板裂解将裂解的血小板加入已包被了羊抗鼠IgG的多孔板包被羊抗鼠IgG的多孔板俘获单抗加入酶标的羊抗人IgG,MAIPA原理：洗涤过的完整的血小板与人血清孵育(以HPA-1a抗体为例)，单克隆抗体与与相应糖蛋白结合（以GPIIb/IIIa为例）。裂解血小板，将上清加入先前包被抗鼠的IgG，用过氧化物酶标记的抗人IgG检测结合在糖蛋白上的人抗体，用合适的显色剂显色。,优点：避免血小板附着在固相中造成的部分特异性抗原决定簇丢失现象。可检测血小板抗原。缺点：如果被检血清中抗血小板抗体与鼠单克隆抗体识别同一抗原决定簇，它们将竞争结合位点，即可出现假阴性反应,
18、MAIPA 法由于检测血小板相关抗体特异性强, 尤其可以区分多种抗体, 被认为是检测血小板抗体的金标准； 但其操作步骤繁琐, 耗时长, 技术要求高, 只在少数参比实验室应用,Flow cytometry流式细胞仪检测,应用流式细胞仪免疫荧光技术检测血小板抗原抗体反应结果更为准确，可以定量检测。完整的血小板与患者血清孵育，洗涤，加入荧光标记的抗人球蛋白试剂，以检测血小板是否结合了特异性血小板抗体。缺点：流式细胞仪(FCM)检测相对费用仍较昂贵，不能在临床广泛推广。在血小板严重减少时，测定区中非血小板成分有所增加，针对淋巴细胞的IgG可被误认为PAIgG，血液中的细胞碎片对试验有干扰。,微柱凝胶间
19、接免疫分析技术Microcolumn gel immunoassay,MGIA,MGIA原理：微柱凝胶中依次加入受检者血清、血小板和指示红细胞指示红细胞上包被有动物抗人血小板抗体，该抗体 Fc段结合在人红细胞膜上，Fab段与血小板结合，如果受检者血清中存在抗血小板抗体，该抗体 Fab段亦与血小板结合 ，相邻 的抗体 Fc段通过抗人球蛋白搭桥连接成网络状凝集复合物，通过离心，该复合物浮于凝胶表面或位于胶中为阳性，如果受检者血清中无血小板抗体，则不能形成网络状血凝复合物 ，指示红细胞沉于微柱凝胶管尖底部为阴性；,结果判读模式,血小板血型检测血清学方法评价,血清学方法从实验原理分析，多采用从富血小板
20、血浆中提取血小板来包被反应板，进一步用直接法或间接法检测相应抗体，特异性和 (或)敏感度不高文献报道，MAIPA法的特异度为85 ，但敏感度仅为47 ，且耗时耗力。SEPSA方法的敏感度仅为394 ，至少需要血小板1 X 107。,血小板在制备过程中部分活化产生脱颗粒作用，抗原结构的主要成分发生相应构象改变，造成抗体检出率降低;血小板本身的聚集而产生不均匀包被的情况，抗体在微板反应孔的表面上有非特异性吸附，使背景信号加强，导致结果判读阴性本底增高，假阴性增多单克隆抗体的覆盖面窄，抗原的检出受到限制血清Ig非特异性吸附于血小板靶抗原是该类试验的共同问题。,血小板交叉配血：,检测受者血清中是否存在
21、针对供者血小板的抗体，或供者血清中是否存在受者血小板抗原相应的抗体，同红细胞交叉配血一样，前者为主侧交叉，后者为次侧交叉。,血小板交叉配血：一般可以采用SEPSA、和MGIA法进行血小板交叉配血试验，以避免由于血小板抗体或HLA相关抗体所致的血小板输血反应或输注无效。,血小板抗体检测和血小板交叉配型试剂盒（固相凝集法）,检验原理：反应板中包被有血小板鼠单克隆抗体（针对血小板表面糖蛋白IIb/IIIa,Ib/V/IX），血小板经离心洗涤后可在反应板中形成血小板单层。加入待检血清，在板中经过孵育后，若该血清中不含有血小板抗体则经过洗涤被去除；若含有血小板抗体，则该抗体与反应板中的血小板结合，加入抗
22、人IgG及人IgG致敏红细胞（指示细胞）经离心后指示细胞结合到血小板单层上。因此阳性反应为指示细胞均匀铺在反应孔底部，而阴性反应为指示细胞在反应孔底部中间形成红细胞聚集。,主要组成成份1、反应板8孔12 2、低离子介质10ml13、指示细胞6ml1 4、抗人IgG 6ml15、阴性对照1ml1 6、阳性对照 1ml17、30浓缩洗涤液10ml1,产品特点1、操作简便、稳定性好，时间短，结果可靠，易于判读；2、抗人IgG为多克隆抗体，敏感性强，准确性高；3、可用于大量样本的检测，重复性好；4、对仪器要求简单，适用于血站、医院、实验室,与HLA配合试验相比，交叉配血方法更经济和方便；能够避免HLA
23、血型不配合，但是相容的血小板；但当患者血清对超过70%的献血者血小板反应时，也只能用HLA配合试验；首先检测这些反应是否血小板抗体所致，如果是，则应学则已知血小板血型的供者或在亲属中选择合适的血小板供者。为避免输血相关的移植物抗宿主病，可先将亲属血小板辐射后使用。,血小板抗原检测,血清学方法分子生物学方法,血清学HPA分型价值有限因为从血小板减少症的患者中仅能获得极为少量的血小板而且除HPA-1a和HPA-5b之外，可靠的HPA血清学分型试剂很少；HPA抗血清中常常含有HLA-I类抗体，将它们用于GP特异性试验，如血小板抗原的单克隆抗体固定试验（MAIPA）具有局限性。单克隆抗体虽现已常规用于
24、红细胞表型分型试验，但除了HPA-1a之外，还没有一种单克隆抗体用于HPA分型。然而，最近发表了关于使用多克隆抗体或重组抗HPA-1a进行快速筛选试验的几种方法。这些表型分型试验可互补基因分型试验以备HPA配选供者之用。,相反，HPA基因分型能够从任何合适的细胞中获取基因组DNA而实现，而且可以使用商业试剂盒。22个血小板特异性抗原的分子基础已确定，并且其中的21个被证实是SNP。已有许多技术用于SNP分型，其中几种已用于HPA基因分型，尽管仅有几项得到广泛应用。PCR序列特异性引物分析（PCRSSP），由于其简单易行而被许多实验室所采用，在同样的PCR条件下能够检测多种HPA基因型的操作程序
25、已有报道。,血小板抗原基因检测,血小板抗原多态性源于编码基因的单个核苷酸置换，为血小板抗原基因检测创造了良好的条件。正好也补充了血小板检测免疫血清学手段不足的缺陷。除HPA14bw外，其他HPA基因都表现出单核苷酸多态性，因此，检测SNP的方法适用于HPA检测基因分型检测不要特异性的血清抗体。,PCR-SSP：PCR序列特异性引物技术(PCRSSP)，此技术采用序列特异性引物(SSP)，SSP的3端具有独一无二的序列，在退火时只能与某特定等位基因结合，因此能够特异性地扩增HPA基因，然后通过凝胶电泳检测PCR产物，根据是否得到PCR产物，以及产物的片段大小来判断HPA基因型。方法简便、快速、错
26、误率低，是目前采用的HPA基因分型方法中的首选方法 ，对HPA 15系统均可以进行基因分型，特别是针对GpbII1a抗体与血小板同源表位分析的研究。,PCR-特异性寡核苷酸探针杂交分析(PCR-SSOP)：此方法的第一步是使用PCR扩增某一段HPA基因，然后通过与顺序特异性寡核苷酸探针的杂交来鉴定HPA型，如检测HPA1-4。由于检测结果与探针的序列以及试验条件密切相关，需要严格控制杂交温度和时间,PCR-限制性片段长度多态性分析(PCRRFLP):使用PCR扩增HPA基因片段后，用特定的限制性内切酶水解，然后凝胶电泳分离被酶解的DNA片段，根据这些片段的分布格局指定相应的基因型因为双等位基因
27、中的一条就包含一个特异性限制性位点，所以对HPA1、2、3和7系统就可以使用PCRRFLP方法。此方法较PCRSSP增加了内切酶水解步骤，如果酶解不完全将得错误结果。此外，并非每个HPA等位基因都有适当的酶切点。,血小板抗体的检测技术无论是检测血小板自身抗体，还是检测血小板同种抗体，都比检测其他血液成分抗体困难得多。虽然现存的检测技术很多，但至今还没有一种真正具有临床实用价值的血清学检测方法;现有的技术和方法所得的结果差异较大;分子生物学的方法可以预测血小板血型的表现型，但实际的血型抗原却无法用该技术检测，而且DNA技术不能用于抗体的筛选，至少目前还没有合适的分子生物学方法可用 技术上要求很高
28、，不适合临床实验室常规应用。,血小板血型检测方法评价,血小板血清学检测落后的原因,试剂的原因 至今仍是人免疫血清试剂,没有研制成功抗HPA的单克隆抗体，已经研制成功的单抗都是抗血小板糖蛋白的血型抗原载体的单克隆抗体。因此，抗人血小板血型抗体在世界范围内都比较短缺和珍贵。目前尚无特异性高、纯度高的试剂。,血小板血清学检测落后的原因方法学问题。目前尚无有效方法高速、准确测定血小板抗体。目前世界范围内推荐两种方法：抗体固着血小板抗原分析；使用流式细胞仪进行荧光分析。缺点：操作复杂、耗时、试剂依赖进口价格昂贵，难以在临床上常规使用。,1. 1病例和血液标本 7名患者( 编号A-G )分别在四川大学华西
29、附二院、四川省人民医院和成都市儿童医院等住院治疗。患者均有输血史和血小板输注史。患者因血小板数低,或因有出血征兆, 申请血小板配型输注。我们采集患者血液标本检查有关抗体, 并进行血小板配型输注治疗(除患者G为特发性血小板减少性紫癜( ITP), 未接受输注治疗外)。,1. 2核酸提取 用美国Gentra试剂提取患者和血小板供者血液标本中DNA。1. 3 HLA、HPA 抗原基因分型检测 采用美国G&T 公司的HLA-A、B、DR 基因分型试剂和HPA1-16基因分型试剂对患者和血小板供者进行HLA、HPA 抗原基因分型。1. 4血小板相关抗体( PA IgG)检测 用上海血液中心提供的SEPS
30、A试剂检测患者血清中PAIgG,1. 5 抗HLA抗体、部分HPA同种抗体检测 用PAK12试剂对患者血清中可能存在的HLA抗体和部分HPA 特异抗体(H PA1a、1b、3a、3b、5a、5b抗体)进行检测。1. 6血小板供者筛选和配型输注 从100 名已定型的血小板供者库中挑选与患者ABO血型相同, HLA和H PA基因位点最大相合的血小板供者, 采集血小板, 进行血小板配型输注治疗。,多次输血的患者会产生血小板抗体, 是同种免疫引起血小板减少的主要原因。临床表现为患者血小板输注无效以及血小板减少等。本研究中除患者F未做血小板相关抗体检测外, 其余6位患者( 包括1名IPT患者)都检测出至
31、少有1种血小板相关抗体, 抗体阳性率100%。在血小板输注治疗时, 存在不同程度的同种免疫性血小板减少。孙晓明等也报道血小板相关抗体与患者血小板输注无效有关。所以,进行血小板配型输注治疗十分必要, 一则可提高血小板输注疗效; 二则可减少和预防输血引起的同种免疫反应, 对患者今后输血治疗有益。,讨论,我们归纳了6名患者10次血小板输注的疗效, 其输注后24h Plt增加和CC I值变化较大。除1 次血小板输注外,输注后患者的Plt都有不同程度的提高( 平均为10 x 109 /L)。按24h CC I值 4.5 x 109 /L的标准, 有5次血小板输注有效。,同种免疫只是影响血小板输注疗效的众
32、多因素之一。每次血小板输注疗效都要具体分析。例如, 患者D 与供者HLA完全不合、HPA不合, 又有PA IgG、HLA-I、HPA抗体, 导致血小板输注无效( CC I为0.72 )。患者F在骨髓移植后的1个月内, 一直伴有低烧, 血小板数很低, 隔天输注机采血小板1袋, 其血小板数缓慢升高, 但没有出血症状发生, 可以认为其血小板输注对防止出血是有效的。,Schlossberg的调查也证明, 2 /3的骨髓移植患者在输注血小板24h 后CC I值远 4.5 x 109 /L。观察血小板数增加只是评价血小板输注疗效的一个指标, 应该结合临床情况进行综合评价。目前, 国内外都有机构建立了一定规
33、模的已定型血小板供者库, 用于血小板配型输注治疗。我们的100人供者库, 在配型挑选上无法满足实际需要。尤其是H LA 配型, 最多也只有3个位点相合, 多数情况只有1-2 个位点相合, 结合H PA配型和血小板抗体交叉配型, 难以达到血小板配型输注的要求, 在一定程度上削弱了输注疗效。因此摆在我们面前的一个问题是要扩大供者库, 以尽量满足患者的需要。,总结（1）,对于不相合的红细胞输注，人们肯定不能容忍，而对于不相合的血小板输注，人们却认为是常规。 事实上，血小板输注无效，往往也伴随着死亡出血而亡。,总结（2）,临床上血小板输注无效通常是非免疫性因素引起的。同种免疫性血小板输注无效多由HLA
34、抗体引起 。输血和妊娠是引起HLA同种免疫两种主要的危险因素。,总结（3）,对血小板抗体进行筛选和鉴定，而后选择相应抗原阴性的血小板进行交叉配型，阴性者进行输注，这种类似于目前红细胞配血的方法，是最有效的PTR应对策略。,我国目前血小板检测中存在的问题,三个不知道患者和献血者都不知道血小板血型血小板与疾病的关系并无详细的研究报道临床很多时候对患者不知道检测哪个血小板血型,我国血小板输注存在的问题,血小板血型与疾病之间相关性没有详细的报道和宣传；临床上很多情况下不知道检测患者血小板血型；大多数血站和医院输血科在患者和献血者的血小板血型都不清楚的情况下，就进行血小板输注，其遵循的原则就是ABO同型
35、即可就进行血小板输注，很少进行HLA、HPA交叉配型以寻找相匹配的血小板，所以临床上出现了许多血小板输注无效症以及血小板免疫性疾病难以诊断的问题；在我国，很少的城市和地区设立血小板供者库。,随着单采血小板临床输血量的逐年上升，血小板输血反应和输注无效问题日益突出。临床上为尽量减少血小板输血反应或输注无效，必须做好血小板输注前的标本检查和交叉配血试验。,建议解决方式：,提高临床医生、中心血站工作人员对血小板不配型输注可能引发严重后果的充分认识。普查某地区甚至全国的HLAI类抗原和HPA抗原分布情况。在一个地区建立献血员队伍的同时，检测血小板供者的血小板血型，建立服务于整个地区的血小板库。建立适应我国国情的血小板输注规程；尽快实现血小板血型检测试剂的国产化。,
