1、第21章 螺旋体Spirochetes,中南大学基础医学院微生物学系,有细胞壁 二分裂繁殖 无定性的核 对抗生素敏感 体态柔软 有轴丝使其能自由活动 运动活泼 易被胆汁或胆盐溶解革兰阴性，但不易着色。原核细胞型微生物,螺旋体特点,似细菌之处,似原虫之处,名称 螺旋数 螺旋特 举例,致病螺旋体的螺旋特点,密螺旋体属 814 规则，细密； 两端尖直,疏螺旋体属 310 不规则,苍白密螺旋体苍白亚种,钩端螺旋体属 数十个 规则，更细密； 一端/两端呈钩状,问号状钩端螺旋体,回归热疏螺旋体 伯氏疏螺旋体,对人体致病的螺旋体属,钩端螺旋体属（Leptospira）,-问号状钩端螺旋体（L. interr
2、ogans）-双曲钩端螺旋体（L.biflexa） 分两个种。,第一节 钩端螺旋体,1.形态特点,0.10.2 620um; 螺旋细密, 一端或二端常呈钩状。革兰阴性，但不易着色。Fontana镀银染色呈棕褐色,问号钩端螺旋体一、生物学特性,2.培养特性, 专性需氧或微需氧 培养基：Korthof（柯索夫） 液体培养基 最适生长温度：2830 液体培养基中呈云雾状 最适 pH ： 7.27.4 生长缓慢：12 weeks,问号钩端螺旋体, 属特异性抗原：外膜蛋白、脂蛋白 群特异性抗原：类脂多糖复合物(25个血清群) 型特异性抗原：菌体表面的多糖与蛋白复合物 （273血清型）,3.抗原结构,问号
3、钩端螺旋体,抵抗力不强，不耐热、对化学消毒剂及青霉素敏感，但在中性湿土或水中可存在数月。,4.抵抗力,问号钩端螺旋体,二、致病性1. 流行环节,传染源 ： 野生动物：啮齿类特别是鼠类。 家畜: 如猪，狗，牛等。传播方式： 接触传播: 消化道 其它: 胎盘,为自然疫源性疾病,问号钩端螺旋体,2.致病物质 主要为内毒素, 内毒素样物质 溶血素 粘附素 胶原酶,问号钩端螺旋体,3.所致疾病 钩端螺旋体病 人畜共患传染病，多宿主（鼠和猪为主），传播途径有： 人与污染水或土壤接触 黏膜或皮肤侵入 消化道黏膜（污染食物/饮水） 胎盘垂直传播 吸血昆虫,流行特点 季节性（夏秋）：洪水型猪，稻田型鼠 地区性：
4、三多鼠、猪、水 职业性：农民、矿工、饲养员致病性 先形成钩体血症，损伤全身毛细血管内皮细胞及肝、肾、肺心及中枢神经，出现休克、DIC、黄疸、出血、心肾功能不全、脑膜炎等。,孕妇感染流产,寒热“三痛”爬不起，拒绝检查腓肠肌，眼红出血淋巴肿，流行多在夏秋季。若不及时来相救, 口鼻涌血死神拿。,钩体病临床症状,寒热:恶寒发热三痛：头痛、 全身痛、 腓肠肌痛,4.免疫性,体液免疫为主，对同型别有牢固的免疫力。特异性抗体明显促进吞噬细胞的吞噬作用,问号钩端螺旋体,三、微生物学检查法1.标本采集 发病10天内取血液；2周后取尿液；脑膜刺激者取脑脊液。2.直接镜检 暗视野镜检或镀银染色镜检3.分离鉴定 接种
5、至Korthof培养基，置28孵育阳性标本在2周内可见培养液呈轻度混浊；暗视野显微镜检查有动力，则用已知诊断血清鉴定其血清群和血清型。,4.动物接种 敏感方法，尤适用于有杂菌污染的标本。接种于幼龄豚鼠或金地鼠腹腔，35天后用暗视野显微镜检查腹腔液；或36天取心血检查并作分离培养。5.血清学诊断 病初和发病后第34周各采血清一次。有脑膜刺激症状者采取脑脊液。 显微镜凝集试验（microscopic agglutination test, MAT）。,四、防治原则,防： 防鼠灭鼠 家畜管理 疫苗接种治： 首选青霉素，注意防止赫氏反应,问号钩端螺旋体,第二节 密螺旋体属,密螺旋体分类 苍白密螺旋体（
6、T. pallidum） 苍白亚种(subsp. pallidum)：亦称梅 毒螺旋体，引起人类梅毒。 地方亚种（subsp. endemicum）：引 起非性传播梅毒（污染餐具传播） 极细亚种（subs. perternue）：雅司 病（皮肤损伤受染） 品他密螺旋体（T. carateum） 引起人类品他病本属主要介绍梅毒螺旋体。,(一)生物学性状,小而规则的螺旋，两端尖直,1.形态,梅毒螺旋体,2.培养特性 目前人工培养方法尚未真正成功。 接种兔睾丸或眼前房，兔睾丸活体培养，但生长缓慢，多用来保存菌种；家兔上皮细胞中能有限生长，繁殖慢，约30 h分裂一次。3.抵抗力 抵抗力极弱，对冷、热及
7、干燥特别敏感；离体1-2小时死亡；血液中的螺旋体4放置3天后才死亡，故冷藏3天以上的血液无传染梅毒的危险。,1. 流行病学特点,（二）致病性与免疫性, 人类是唯一的自然宿主 传播方式： 性接触传播 母婴传播 输血传播,梅毒螺旋体, 荚膜样物质 为酸性粘多糖，具有抗吞噬作用 粘附因子 为外膜蛋白 透明质酸酶 分解透明质酸有利于扩散并造成组织损伤。,2. 致病物质 主要为侵袭力,梅毒螺旋体,3. 所致疾病, 先天梅毒 后天梅毒：表现为反复、隐伏、再发特点 性病梅毒 输血梅毒,梅毒螺旋体,先天梅毒 亦称胎传梅毒，易致流产、早产或死胎；也可致先天畸形，出生后被称为梅毒儿，常呈锯齿形牙、间质性角膜炎、神
8、经性耳聋等症状。,Periostitis,后天梅毒 分三期 I期梅毒： 多见外生殖器，出现无痛性、直径约1 cm的硬性下疳，含有大量梅毒螺旋体，此时传染性极强。48周后，下疳自然愈合。经23个月无症状潜伏期后进入第二期。,II期梅毒：传染性极强，破坏性小。全身皮肤黏膜出现梅毒疹，周身淋巴结肿大，不经治疗一般在13个月后症状自然消退而痊愈，经24年, 又可被激活进入第三期。, 感染2年（亦可达1015年） 传染性小，破坏性大 皮肤粘膜溃疡性坏死 侵犯内脏器官和组织 侵犯神经系统 出现慢性肉芽肿、梅毒瘤,III期（晚期）梅毒,4.免疫性 以细胞免疫为主 传染性免疫 一般认为当体内持续有螺旋体存 在
9、时，对再感染有免疫力，一旦螺旋 体被杀灭，其免疫力亦随之消失。 产生两类抗体 特异性抗体 非特异性抗体： 反应素抗体，能与 生物组织中的类脂抗原（如牛心肌） 发生非特异性结合反应，可利用其进 行血清学诊断。,1.标本采集 期梅毒：硬下疳渗出液 期梅毒：梅毒疹渗出液或局部淋巴结 抽出液2.显微镜检查 暗视野显微镜观察螺旋体的动力和形态 Fontana镀银染色法,（三）微生物学检查法,T. pallidum in a dark-field microscopy,梅毒螺旋体,镀银染色,3.血清学诊断 非密螺旋体抗原试验：测非特异性抗体 抗原（正常牛心脂质）测血清中的反应素（抗脂质抗体） VDRL（v
10、eneral disease research laboratory）试验和RPR（rapid plasma reagin, 改良的VDRL）试验：适合梅毒患者的初筛。 前者在玻片上进行，后者在专用纸卡反应圈（内径18 mm）内进行。I期梅毒阳性率约70，II期梅毒可达100，III期梅毒阳性率低。, 密螺旋体抗原试验 采用Nichols株梅毒螺旋体或重组蛋 白作为抗原，测定病人血清中特异性抗体。 荧光密螺旋体抗体吸收试验（fluorescent treponemal antibody-absorption, FTA-ABS） 梅毒螺旋体血凝试验（treponema pallidum hema
11、gglutination assay, TPHA）,（四）防治原则预防1）加强宣传教育；2）一旦患病，应去正规医院及时就医；3）发现梅毒病人必须强迫进行隔离治疗；4）追踪病人的性伴侣；5）对可疑患梅毒的孕妇，给予预防性治疗；6）严格筛选血源。7）目前尚无疫苗可供使用。,梅毒螺旋体,治疗1）诊断正确，治疗及时，剂量足够，疗程正规；2）首选药物是青霉素。,梅毒螺旋体,思考题1. 螺旋体与细菌和原虫的相同点2.梅毒螺旋体传播方式、致病物质、防治原则,第35章 真菌学总论,真 菌,是一类具有细胞壁和典型细胞核，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。,组成：核膜和核仁(细胞核) 完整的细胞器(
12、胞浆) 单细胞(少数)或多细胞(多数),分布广泛、种类繁多、数量大生存方式：腐生或寄生繁殖方式：有性或无性多数有益：如酿造业、抗生素生产等少数有害：人类及动、植物疾病 医学(病原)真菌400种 常见的有50100种, 有核膜和核仁、完善的细胞器的真核细胞型微 生物； 细胞壁不含肽聚糖，而含几丁质； 细胞膜含固醇； 多数对人无害，有的甚至有益，少数可引起人 和动物致病（病源性真菌）； 以孢子进行繁殖； 少数为单细胞真菌，大部分为多细胞真菌。,真菌的特点,真菌细胞与细菌细胞的比较,一、真菌的形态与结构1. 单细胞圆形、卵圆形2. 多细胞孢子、菌丝(菌丝体),形态：圆形、卵圆形菌落： 酵母型真菌：无
13、菌丝，由母细胞以芽生方式繁 殖，其菌落与细菌的菌落相似。 类酵母型真菌：芽生方式繁殖，其延长的芽体 可伸进培养基内，称假菌丝。,单细胞真菌,酵母型真菌,新生隐球菌(无菌丝),单细胞真菌,白假丝酵母菌（假菌丝）,类酵母型真菌,单细胞真菌,多细胞真菌,基本结构：由菌丝和孢子组成菌丝(hypha)：孢子生出嫩芽，称为芽管。芽管 逐渐延长呈丝状，称为菌丝。孢子(spore)：真菌的生殖结构，是由生殖菌丝 产生的。,多细胞真菌,营养菌丝(vegetative hypha) 按功能分 气生菌丝(aerial hypha) 生殖菌丝(reproductive hypha) 菌丝 无隔菌丝(nonseptat
14、e hypha) 按结构分 有隔菌丝(septate hypha) 按形态分 球拍状,结节状,梳状,螺旋状等,菌 丝（hypha）,气中菌丝及生殖菌丝,营养菌丝(vegetative hypha) 按功能分 气生菌丝(aerial hypha) 生殖菌丝(reproductive hypha) 菌丝 无隔菌丝(nonseptate hypha) 按结构分 有隔菌丝(septate hypha) 按形态分 球拍状,结节状,梳状,螺旋状等,菌 丝（hypha）,有隔菌丝和无隔菌丝,营养菌丝(vegetative hypha) 按功能分 气生菌丝(aerial hypha) 生殖菌丝(reprodu
15、ctive hypha) 菌丝 无隔菌丝(nonseptate hypha) 按结构分 有隔菌丝(septate hypha) 按形态分 球拍状,结节状,梳状,螺旋状等,菌 丝（hypha）,许兰毛癣菌蒙古变种鹿角样菌丝SEM1000,分生孢子 大、小分生孢子,叶状孢子1.芽生孢子,叶状孢子 2. 厚膜孢子,胞浆浓缩，胞壁增厚,叶状孢子 3.关节孢子,菌丝胞壁增厚，形成链状排列的长方形节段。,孢子囊孢子,菌丝末端膨大成囊状，内含许多孢子。,真菌孢子与细菌芽孢的区别,1. 繁殖方式：芽生裂殖隔殖萌管,二、繁殖与培养,2. 培养特点,嗜糖：耐酸：最适pH46喜低温：最适2228喜潮湿生长慢,标准培
16、养基： (Sabourauds medium)：蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和琼脂。菌落类型：三种,1.酵母型菌落 ：菌落柔软、光滑、湿润。镜下可见单细胞性的芽生孢子，无菌丝。如隐球菌菌落。,Yeast type colony,2.类酵母型菌落（酵母样菌落） ：和酵母型菌落相似， 镜下可见假菌丝。如白假丝酵母菌菌落。单细胞真菌,Yeastlike type colony,3.丝状型菌落 ：由多细胞菌丝体组成的絮状菌落（一部分向空中生长，并形成孢子）。丝状真菌或霉菌菌落。 (菌落较大),Filamentous type colony,三、变异性和抵抗力,真菌易变异,多次传代或孵育过久，容易发生形态、结
17、构、菌落性状、色素及生理性状如毒力等的变异。,1.变异性,某些真菌在宿主体内(或37培养)和人工培养基上(25培养)形成酵母型和丝状型两种不同类型的菌落,称双相型真菌,双相型真菌（Dimorphic fungi）,对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，601小时菌丝、孢子均被杀死对2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感对细菌抗生素不敏感对二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟 康唑和伊曲康唑敏感,2.抵抗力,真菌病逐年增多的原因1抗生素特别是广谱抗生素的滥用而 致菌群失调.2免疫抑制剂及抗肿瘤药物的使用及 吸毒使机体免疫功能低下.3HIV的流行.4慢性消耗性疾病如
18、糖尿病等。,第二节 真菌的致病性与免疫性, 直接感染致病(Infection) 激发机体产生超敏反应致病(Hypersensitivity) 真菌毒素中毒症(Mycotoxicosis),真菌的致病作用,(一).真菌性感染： 致病性真菌感染（浅部，深部）：多为外源性,包括: 浅表糠秕马拉色氏霉菌 (Malassezia furfur) 皮肤皮肤癣菌(Dermatophytes) 皮下申克孢子丝菌 (Sporothrix schenckii) 全身 荚膜组织胞浆菌(H. capsulatum) 厌酷球孢子菌 (C. immites),一、致病性, 条件致病性真菌感染：多为内源性,the most
19、 frequent in china： 白假丝酵母菌(S. albican) 新生隐球菌(C. neoformans) 卡氏肺孢菌(Pneumocystis carinii) 曲霉(Aspergillus) 毛霉(Mucor), 机体的易感性：,1.生理条件 年龄、组织结构： 新生儿鹅口疮 儿 童头癣 成 人脚癣、甲癣,2.病理条件免疫功能降低： 先天性免疫功能低下 慢性消耗性疾病 手术、放疗、化疗 用免疫抑制剂等,（二）真菌性超敏反应： 按性质分： 接触或吸入或食入真菌孢子或菌丝引起 可为-型超敏反应 感染性超敏反应：一般为型超敏反应,按部位分: 皮肤超敏反应:皮炎、湿疹、荨麻疹、瘙 痒症等 呼吸道超敏反应: 支气管哮喘以及过敏性 鼻炎 消化道超敏反应,（三）真菌毒素中毒：中毒特点： 有地区性和季节性 与进食有关 无传染性及免疫性 抗生素治疗无效,二、免疫性, 非特异性免疫 特异性免疫 细胞免疫为主 体液免疫,第三节 真菌的微生物学检查法,1.标本采集 充足、新鲜、无菌操作2.形态学检查：直接镜检及分离培养3.血清学检查：测Ab4.分子生物学检测,第四节 真菌感染的防治原则,解释下列名词：菌丝, 菌丝体, 假菌丝, 双相型真菌. 1.比较真菌孢子与细菌芽胞的主要区别。2.简述真菌的基本结构。,
