1、野生型和栽培型土三七总酚酸的含量比较作者：付煜荣 张红芬 张小红 【摘要】 河北省科学技术研究与发展指导计划项目（编号：06276431） ；河北省教育厅科学研究计划项目（编号：2004403） 【摘要】 目的：比较张家口产野生型和人工栽培型土三七药材中总酚酸的含量，并分析两者是否有显著性差异。方法：采用分光光度法，以没食子酸为对照品，以 0.6%FeCl30.9%K3Fe(CN)6 （10.9）混合溶液为显色剂，在 720 nm 波长处进行测定。结果：总酚酸分析的线性范围为0.228gmL-11.14gmL-1（r=0.9993） ，平均回收率为96.6%，RSD 为 1.9%（n=6） 。
2、野生型土三七中总酚酸含量为 78.3 mgg-1,RSD 为 5.5%（n=5） 。人工栽培型土三七中总酚酸含量为 82.4 mgg-1，RSD 为 2.5%（n=5） 。结论：野生型土三七和人工栽培型土三七中总酚酸含量无显著性差异。 【关键词】 景天三七 总酚酸 分光光度法【ABSTRACT】 Objective:To analyze the content of total phenolic acid in wild and planted type Sedum Aizoon L.which were collected from Zhangjiakou.Methods:Total phe
3、nolic acid was analyzed by spectrophotometry at 720nm.The colourdeveloping agent was the mixture solution of 0.6% FeCl3 0.9% K3Fe(CN)6(10.9). Results: Calibration curve was constructed in the range of 0.228gmL-11.14 gmL-1 (r=0.9993)for total phenolic acid.The average recovery was 96.6% for total phe
4、nolic acid and the RSD of the methods was 1.9%(n=6).The average contents were 78.3mgg-1 for wild type（n=5)and 82.4mgg-1 for planted type（n=5).The RSDs of the two methods were 5.5% and 2.5% respectively.Conclusion:Dealt with statistics,the determination of total phenolic acid had no significant diffe
5、rence between wild type and planted type Sedum Aizoon L.【KEY WORDS】 Sedum Aizoon L.,Total Phenolic Acid,Spectrophotometry土三七（Sedum Aizoon L.）为景天科景天属植物，别名景天三七、费菜、血散、养心草；性平，味甘，微酸，无毒，有凉血止血、散瘀、消炎、安神、镇痛等作用。该药含有没食子酸等多种酚酸和谷甾醇等成分1,2，试验证明，能缩短动物的凝血时间，对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均有抑制作用。本品还有明显的促进血液循环、化瘀降压作用,可防治心脏病、高血压、高血脂、血管硬
6、化等。我们测定了野生型和人工栽培型土三七中总酚酸的含量，并比较了其含量差异。1 材料与方法1.1 仪器721 分光光度仪（上海） ，A/D 分析天平（1/10 万，日本） ，万分之一天平（上海） 。1.2 试药野生土三七采自河北省张家口市区，由王德富老师鉴定。人工栽培型土三七由野生型土三七的叶经组织培养，再移入土壤栽培而成3。没食子酸对照品购自中国生物制品检定所。其余试剂均为分析纯，试验用水为二次去离子水。1.2 实验方法1.2.1 分析方法取适量待测样品置于 25mL 比色管，加无水乙醇至 5mL，加 0.3%十二烷基磺酸钠 2mL 及 0.6% FeCl30.9% K3Fe(CN)6（10
7、.9）混合溶液 1mL，混匀，在暗处放置 5min，加 0.1molmL-1 HCl 至刻度，混匀，在暗处放置 20min。 用 721 分光光度计，以显色剂为空白，在 720nm 波长处测定吸光度 A，根据标准曲线计算含量4,5。1.2.2 对照品溶液制备及标准曲线的绘制取一定量没食子酸对照品，精密称定，用乙醇溶解，定容，配成22.8gmL-1 没食子酸储备液。 分别取对照品溶液0.25mL，0.50mL，0.75mL，1.00mL，1.25mL，1.50mL 置于 25mL 容量瓶，同“1.2.1 分析方法”项下进行显色和测定，记录吸光度 A，以 A 为纵坐标，以含量 C 为横坐标，作图，
8、得没食子酸标准曲线。经统计学处理，得回归方程为：A=0.5579C+0.0888，r =0.9993（C：gmL-1） 。结果表明没食子酸含量在 0.228gmL-11.14gmL-1 范围内，呈现良好线性关系。1.2.3 供试液的制备将野生型和人工栽培型土三七干燥粉碎，取粉末各 0.2g，精密称定，分别加入 15mL 水浸泡过夜，于沸水浴中提取三次（40min，30min，10min） 。吸取上清液，合并三次提取液，定容至50.00mL，摇匀备用。2008 年 10 月付煜荣等：野生型和栽培型土三七总酚酸的含量比较第 5 期 2008 年 10 月河北北方学院学报（医学版）第 5 期2 结果
9、2.1 含量分析取各提取液 50L，同“1.2.1 分析方法”项下进行显色和测定，并根据标准曲线计算总酚酸含量，结果见表 1。表 1 样品测定结果注:t检验，与野生型土三七相比*P0.052.2 精密度试验取 0.2g 栽培型土三七粉末，精密称定，按“1.2.3 供试液的制备”项下进行提取，同“1.2.1 分析方法”项下进行显色和测定，记录吸光度A，吸光度 A 的 RSD 为 0.17%（n6） 。2.3 重现性试验取 0.2g 同一批药材 5 份，精密称定，按“1.2.3 供试液的制备”项下进行提取，同“1.2.1 分析方法”项下进行显色和测定，记录吸光度A，经数据处理，计算得样品含量，RS
10、D 为 2.5%（n5） 。2.4 稳定性试验取一份人工栽培型土三七药材，精密称定，按“1.2.3 供试液的制备”项下进行提取，同“1.2.1 分析方法” 项下进行显色和测定，每隔5min 测定一次 A。经数据处理得总酚酸含量，含量的 RSD 为 0.74%。结果表明样品在 70min 内稳定。2.5 回收率试验取已知总酚酸含量的人工栽培型土三七 6 份，精密称定，分别加入高、中、低量的没食子酸对照品，按“1.2.3”项下制得供试液后，按“1.2.1”项下进行显色和含量测定，计算没食子酸的回收率，平均回收率为 96.6%，RSD 为 1.9%（n=6） ，结果见表 2。表 2 回收率测定结果（
11、n=6）序号样品重（g）样品含量（mg）加入量（mg）测得量（mg）回收率（%)XRSD（%)10.09828.2510.918.695.020.09918.3210.818.594.230.10088.468.0716.295.896.61.940.09948.348.5016.798.350.10058.446.0414.498.760.10008.406.5614.897.63 讨论3.1 土三七的营养及药用价值较为广泛，试验证明，能缩短动物的凝血时间，对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均有抑制作用。本品还可防治心脏病、高血压、高血脂、血管硬化；用鲜全草炖猪心可治疗神经衰弱、失眠、烦躁不安等6
12、。此外，还可采用景天三七鲜草治疗老年中风，且种植容易、产量大、收益高、见效快，有广阔的应用前景，但是，目前研究较少，一定程度上限制了它的应用，故有待于进一步深入探究。3.2 本文分析了野生型和人工栽培型土三七的总酚酸含量，经统计学处理，两种来源药材的均值无显著性差异（P0.05） 。3.3 在试验过程中发现，显色剂不稳定，放置时间超过一天已不能使用，应在每次实验前临时配置，否则，对实验结果会造成较大影响。3.4 有报道注射用丹参总酚酸对缺血性中风瘀血阻络证确有较好疗效7，注射用丹参多酚酸盐治疗冠心病心绞痛（心血瘀阻证）8。有关土三七中总酚酸的药理作用尚未见报道，有待于进一步研究。本文测定栽培型
13、可代替野生型土三七药用，故可用栽培型土三七作后续研究。土三七含多种有效化学成分，因此，对野生型和人工栽培型有效成分的比较，对于扩大其药用价值,保护日趋减少的野生资源具有重要意义。【参考文献】1 国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册M.北京：人民卫生出版社,1986.4762 谢宗万.中药材品种论述上册M.第 2 版.上海:上海科学技术出版社,1989.79803 芮和恺，顾慧芬，忻晓君,等.四种药用植物的组织培养简报J.中药材，1987，10（5）：114 刘瑞玲，李维维，杨维嘉.丹参及其注射液中水溶性总酚酸的测定J.药物分析杂志，1983，3（3）：1635 付煜荣，张万明，陈桂敏,等.景天三七中没食子酸和总分酸含量测定J.中成药，2006,28（7）：101610186 车苏容,郭素华,竺叶青.景天三七的药学研究进展J.福建中医药,2004,35(3)：51537 韩景献，韩力.注射用丹参总酚酸治疗缺血性中风瘀血阻络证临床研究J.天津中医药,2005,22(4):2878 苗阳，高铸烨，徐凤芹,等.丹参多酚酸盐治疗冠心病心绞痛（心血瘀阻证)的临床观察J.中药研究与信息，2005，7(10):23
