1、本科毕业论文系列开题报告水产养殖管角螺胚胎发育的研究一、选题的背景与意义管角螺HEMIFUSUSTUBA隶属于软体动物门（MOLLUSCA），腹足纲（GASTROPODA），新腹足目（NEOGASTROPODA），盔螺科（GALEODIDAE），角螺属（HEMIFUSUS），俗称响螺,为热带和亚热带暖水性种类王慧珍,1991。管角螺是浅海较大型经济螺类，主要分布在我国浙江以南、广东、广西、福建和海南沿海，生活在潮下带近海1140M的软泥和泥沙质的海底（潘英等，2008）。成螺体大肉肥，味道鲜美独特，具有滋补功效，且肌肉中糖蛋白有显著的抗癌活性，在市场的价格一向居高不下，高达100200元/KG
2、，具有很大的市场开发潜力。但天然的野生种群密度低，成螺的生长周期长，捕获不易，加之近年来过度捕捞和海洋环境的污染，导致了我国沿海的管角螺资源日益枯竭。因此，用显微和亚显微水平上对其进行胚胎发育及生化组分变化的研究，为该种的人工育苗、增养殖、资源保护以及开发利用，提供基础繁殖生物学方面的参考数据和理论依据，对渔业的持续发展有着重要意义。目前有关管角螺胚胎发育的研究较少,国外主要有MORTONB（19851986）报道了管角螺的摄食、繁殖、摄食及饥饿对其幼体的影响、幼螺生长及种内残杀，DJHPHILLIPS（1986）关于管角螺的同属细角螺组织中的无机盐与总砷的含量分析等；国内主要集中在繁殖发育（
3、林志华，1998；罗杰，2007；杨铭，2008；潘英，2008）、人工育苗（张正道，2001；潘英，2007、）、营养成分分析（傅余强，2002；朱爱意，2008）、代谢（罗杰，2008）、同工酶（梁海鹰，2007）等。本课题从形态学和组织学角度系统研究了管角螺胚胎发育,旨为深入了解软体动物胚胎发育机制积累基础资料,并进一步为该种的人工育苗、增养殖、资源保护及开发利用提供理论依据。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容1胚胎发育的形态学研究。2胚胎发育的时序研究。拟解决的问题1胚胎发育各时期形态的描述2胚胎发育各时期大小的测定3胚胎发育各时期持续时间的测定三、研究的方法与技术路线
4、一研究的方法1进行管角螺的人工育苗，取刚产出的卵囊若干。2控制适合的孵化条件（温度2225、盐度2030，每日换水1/2,充气）连续或每隔一定时间取样，解剖卵囊，在光学显微镜及解剖镜下观察卵囊内的胚胎发育（从受精卵至孵出后膜）的形态变化，测量其大小，并对胚胎发育各时期进行拍照。3部分胚胎样品用甲醛或BOUINS液固定,石蜡切片,HE染色，用组织学进行研究。4采用不同温度（22、25、28）进行孵化，其他条件同上，记录各温度条件下胚胎各期发育所需的时间，掌握管角螺胚胎发育时序。二技术路线四、研究的总体安排与进度201001201002毕业论文选题人工育苗卵囊与胚胎取样显微观察卵囊测量与形态观察胚
5、胎发育时序观察各期胚胎形态观察与测量败育卵测量与形态观察数据分析完成论文201003201004进行文献查阅和资料收集，制定具体研究计划和试验方案。201004201005试验相关仪器的采购和安装，亲体的购买、暂养、孵化。201005201010管角螺胚胎发育的组织学和形态学试验。201008201010数据和材料整理、分析。201008201012完成2篇外文翻译201012201104论文撰写201105提交论文并答辩五、主要参考文献1陈康贵,谢嗣光折叠萝卜螺胚胎发育的初步研究J西南师范大学学报自然科学版,2003,2811301332曹伏君,李长玲,罗杰,等管角螺、细角螺的核型研究J广东
6、海洋大学学报,2008,28115183傅余强,顾谦群,刘睿,等管角螺肌肉中性糖蛋白的化学组成及抗肿瘤活性研究J中国海洋药物,2002,620244梁海鹰,曹伏君,伍泽妹管角螺不同组织同工酶的研究J广东海洋大学学报,2007,27622265梁海鹰,曹伏君,张亮珠,等细角螺几种组织的同工酶分析J吉首大学学报自然科学板,2007,28587916林志华,王铁轩,夏彩国管角螺生态及繁殖习性观察J海洋科学,1998,13511127林志华,王铁杆,夏彩国管角螺的人工育苗J海洋科学,1998,1351291348罗杰,刘楚吾,黄翔鵠盐度对管角螺胚胎发育的影响J广东海洋大学学报,2007,2732427
7、9罗杰,刘楚吾,李锋,等盐度及规格对管角螺耗氧率和排氨率的影响J海洋科学,2008,325465010罗杰,刘楚吾,唐洪超,等温度对管角螺（HEMIFUSUSTUBAGELIN）耗氧率和排氨率的影响J广东海洋大学学报,2008,281858811罗杰,刘楚吾,李锋,等管角螺窒息点及昼夜代谢规律J应用生态学报,2008,1992092209612陆珠润,蒋霞敏,王春琳,等不同温度、底质和饵料对管角螺孵化和稚、幼螺生长的影响J南方水产,2009,133232613潘英,陈锋华,李斌,等管角螺对几种环境因子的耐受性试验J水产科学,2008,271156656914潘英,陈锋华,庞有萍,等管角螺的生物
8、学特性及养殖J水产科学,2008,271242615潘英,庞有萍,罗福广,等管角螺的繁殖生物学J水产学报,2008,32221722216潘英,王强哲,庞有萍,等管角螺全人工育苗试验J水产科技情报,2007,342848517谢嗣光大瓶螺胚胎发育的观察J水产学报,1994,181394418许章程,王初升,张玉生细角螺的繁殖生态条件及繁殖习性J水产学报,2006,30684885019许章程,金亮,宋普庆,等温度和盐度与细角螺幼体生存、生长及发育的关系J台湾海峡,2009,280226627020杨铭角螺的繁殖生物学观察J海洋与渔业,2008,4192221张正道管角螺的人工育苗J科学养鱼,2
9、001,42522朱意爱,赵向炯,杨运琪东极海区管角螺软体部的营养成分分析J南方水产,2008,42636823王慧珍浙江动物志软体动物篇M杭州浙江科学技术出版社,199110324MORTONBPREYPREFERENCE,CAPTUREANDRATIONINHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1985,941319121025MORTONBREPRODUCTION,JUVENILEGROWTH,CONSUMPTIONANDTHEEFFECTSOFS
10、TARVATIONUPONTHESOUTHCHINASEAWHELKHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1986,1022325728026PHILLIPSDJH,DEPLEDGEMHDISTRIBUTIONOFINORGANICANDTOTALARSENICINTISSUESOFTHEMARINEGASTROPODHEMIFUSUSTERNATANUSJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1986,34261266毕业论文文献综述
11、水产养殖管角螺的研究概述摘要管角螺是我国浅海大型经济螺类,具养殖开发前景。本文将近些年来国内外学界对管角螺的研究概括成文，包括管角螺的生物学特征，繁殖习性，经济价值三方面，并对管角螺以后的发展方向作简要介绍，为该物种的保护以及开发利用提供参考。关键词管角螺；生物学特征；繁殖；胚胎发育；经济价值；展望管角螺（HEMIFUSUSTUBAGMELIN）隶属腹足纲GASTROPODA、新腹足目NEOGASTROPODA、盔螺科GALEODIDAE，角螺属（HEMIFUSUS），在一些地区俗称角螺、响螺，是浅海较大型经济肉食性贝类。其肉肥大鲜美，营养丰富，在肌肉中糖蛋白有显著的抗癌活性（傅余强等，200
12、0）。近几年，由于资源量日趋减少，而人们对管角螺的需求增大，进一步开展管角螺的研究势在必行。1、生物学特征11分布、栖息管角螺生活在潮下带水深1070M泥沙质海底，主要分布我国东南沿海，为暖水性种类。管角螺的生活方式为底栖型，有潜沙习性。12形态特征管角螺一般成体壳高1022CM，壳宽715CM，重约150300G。壳质坚厚，壳表有被有黄褐色或淡棕色细密而短的茸毛壳皮。螺体一般有78个体螺层，螺魇厚而实，具有较强的闭合能力，可保存水分时间较长，因此具有较强的耐干露能力。13生长及食性管角螺的生长与多个因素相关，包括温度，底质，盐度等，经试验（陆珠润等，2009）管角螺较适孵化温度为23，初孵稚
13、螺无底质培养比泥底质培养好，幼螺沙底质培养优于无底质。同时，又有试验表明（潘英等，2008），幼螺在泥沙质和无底质条件下生长率较高，底质条件对管角螺个体存活率无明显影响，但是无底质条件下，幼螺常攀爬于池壁上，容易长时间干露而死，因此在人工养殖池内，以泥沙质池为好。管角螺的耐受性试验表明（潘英等，2008），管角螺幼螺生存温度范围为632，适应盐度为130190，对低盐具有较强的耐受性，生存PH为62104，并具有较好的耐干露能力。管角螺快速生长期在水温为2028的五月到八月，水温降到20以下时，幼螺生长速度明显降慢，在13以下，幼螺基本不进食，随着个体增长，生长速度减慢（林志华等，1998）。
14、同时管角螺的夜间代谢强于白日（罗杰等，2008）。管角螺一年个体可达79CM，二年可达1113CM，而同属的细角螺的生长速度相对应分别为9CM和14CM（许章程等，2006）。管角螺幼螺以双壳类为主，对贝类、鱼虾肉糜具明显的趋食性（潘英等，2008），成螺为肉食性贝类，肝胰脏腺发达，食双壳类，尤其是薄壳无足丝种类，如缢蛏、蓝蛤，管角螺食性凶猛，以发达足丝缠绕食物随后送入口中进食。在实际养殖情况下，对一般的后期幼体，一般用藤壶，牡蛎，鱼糜喂食（张正道，2001）。在实验条件下，鲜活饵料组生长速度远高于配合饲料组（陆珠润等，2009）。刚出膜的稚螺有摄食底栖硅藻的习性，也可以吃碎蛏子肉或者剪碎的鱼
15、肉，尚未有较合适的人工饲料，当饵料不足时自相残食严重（潘英等，2008），这是在育苗过程中必须解决的问题。人工养殖条件下饵料对管角螺的生长发育有很大的影响。管角螺在繁殖季节、交配产卵期间，摄食率明显下降，不喜摄食。2、繁殖习性21繁殖条件与交配产卵在浙江海域，每年4月中旬，水温达到20，管角螺开始进入繁殖期，到6月份水温上升达到2627，产卵结束。广西北部湾沿海地处亚热带气候，每年一个繁殖期，为45月，水温在2428，到29即停止繁殖（潘英等，2008）。在厦门海域，与管角螺同属的细角螺繁殖情况类似，5月中旬，2426开始繁殖到6月中，2628结束（许章程等，2006）。管角螺为雌雄异体，在其
16、体内并未发现性染色体（曹伏君等，2008），仅通过外壳难以分辨，但在繁殖季节可根据软体部交接器形态、腹足口等特征加以区分，自然条件下的群体，雌性的个体远远多于雄性，约为101（林志华等，1998），而同属的细角螺，自然条件下雌雄比约为一半（许章程等，2006）。管角螺交配时，雄螺与雌螺壳口成45相对，阴茎伸入交接囊完成受精。受精卵与卵子一起被输卵管分泌的胶状物质包被形成卵囊雏形，经腹足口定型聚集后排放到阴暗处，并附着于基质上。交配时间持续较长，达数小时至几十小时，大多数个体在夜间或者黎明产卵。不同雌螺常集中产卵，形成卵囊群。一般单个雌螺平均产204个卵囊（潘英等，2008），但是其受精率非常低
17、，一个卵囊内受精卵与卵子比在1/151/10左右。产完卵的亲螺摄食欲望强，需要多投饵料。22胚胎发育管角螺整个胚胎发育过程都在卵囊内进行，属直接发生型。潘英在2008年发现，在水温2428时，受精卵经过30D发育成稚螺，有其他研究表明（林志华，1998），管角螺整个胚胎发育过程持续4050D，这之间差别应该是跟温度还有环境因素有关，。整个发育过程卵粒的形状可经历大卵期、花生期、哑铃期、葫芦期，且同一卵囊内受精卵发育过程即缓慢又不同步。受精后经三天发育成多细胞的原肠胚，第五天出现担轮幼虫（潘英，2008），想比较而言，折叠萝卜螺从卵裂开始到形成原肠胚只要19小时左右，到担轮幼虫需要23D（陈康贵
18、等，2003），管角螺的胚胎发育比较缓慢。一般而言，管角螺每个卵囊含有15002000个卵数，大部分的卵为败育卵，即为正常卵的整个胚胎发育过程提供营养，能正常发育变态成稚螺的仅1030个。在整个胚胎发育过程中，温度、盐度、密度、充气等生态因子都会对卵的发育变态造成重要的影响。23胚后发育管角螺破膜而出成为稚螺，一般来说，刚孵出的稚螺平均螺高41MM，壳宽23MM（潘英等，2008）。稚螺孵出后，聚集在卵囊周围，此时的螺壳已具有3个螺层，78调纵螺肋，爬行比较灵活。刚孵出的稚螺主要以底栖硅藻为食，大约在3D后即可摄食贝肉，30D后，稚螺一般能长到78MM，具发达的足和吻，可主动舔食贝肉（潘英等，
19、2007），稚螺的生长速度在这段时间最快。大约在45天以后螺壳便出现4个螺层，壳表面开始长出茸毛。90D后能长到5CM左右，已具备成螺的形态特征。在实际上产过程中，经过9个月左右的养殖便可收获成螺。3、经济价值管角螺经济价值极高。有研究表明（航晓敏，2001），管角螺软体部分多粗脂肪中脂肪酸含量齐全，多不饱和脂肪酸比例高，对人体具有明显的降血脂、降血压、提高生物膜液态性、抗肿瘤和免疫调节作用，能明显的降低心血管疾病的发生几率。DJHPHILLIPS（1986）关于管角螺的同属细角螺组织中的无机盐与总砷的含量分析也证实了这一点。朱爱意等对东极海区野生管角螺软体部营养成分进行了分析，表明管角螺软体
20、部干品DS的粗蛋白含量达8077，蛋白质中检出含有17种氨基酸，氨基酸含量达软体部干重的512。其必需氨基酸的构成比例基本符合FAO/WHO模式（竺俊全等，2005）；管角螺赖氨酸含量为342MGG1DS，对于以谷物为主食的人来说摄入赖氨酸有利于提高食物营养的利用率。同时管角螺的厣具燥湿收敛、清热解毒作用，螺壳可作为观赏物品，傅余强等对管角螺肌肉中性糖蛋白研究发现其对小鼠的S180肿瘤有明显的抑制作用，作用效果与环磷酰胺相似（傅余强等，2002）。总之，管角螺是一种高蛋白低脂肪、具有优良保健和营养价值的食品。4、展望经查阅，相比其他腹足类如波部东风螺、方斑东风螺、细角螺，管角螺的研究工作才刚刚
21、起步。目前国内外对于管角螺的研究仅限于繁育习性，人工育苗、营养分析方面，且研究内容比较浅，研究种类比较少，特别是对管角螺胚胎发育的研究也涉及较浅，研究工作不连续，缺乏有效的数据分析。随着近年来管角螺资源的日趋减少再加上野生的管角螺越来越无法满足人们的日常需求，因此人工育苗是必然趋势，这就需要更多关于管角螺孵化、稚螺生长等方面的研究来提供理论依据和技术支持，管角螺的研究工作势必要从不同角度，不同层次加以完善。参考文献1陈康贵,谢嗣光折叠萝卜螺胚胎发育的初步研究J西南师范大学学报自然科学版,2003,2811301332曹伏君,李长玲,罗杰,等管角螺、细角螺的核型研究J广东海洋大学学报,2008,
22、28115183傅余强,顾谦群,刘睿,等管角螺肌肉中性糖蛋白的化学组成及抗肿瘤活性研究J中国海洋药物,2002,620244梁海鹰,曹伏君,伍泽妹管角螺不同组织同工酶的研究J广东海洋大学学报,2007,27622265梁海鹰,曹伏君,张亮珠,等细角螺几种组织的同工酶分析J吉首大学学报自然科学板,2007,28587916林志华,王铁轩,夏彩国管角螺生态及繁殖习性观察J海洋科学,1998,13511127林志华,王铁杆,夏彩国管角螺的人工育苗J海洋科学,1998,1351291348罗杰,刘楚吾,黄翔鵠盐度对管角螺胚胎发育的影响J广东海洋大学学报,2007,27324279罗杰,刘楚吾,李锋,等
23、盐度及规格对管角螺耗氧率和排氨率的影响J海洋科学,2008,325465010罗杰,刘楚吾,唐洪超,等温度对管角螺（HEMIFUSUSTUBAGELIN）耗氧率和排氨率的影响J广东海洋大学学报,2008,281858811罗杰,刘楚吾,李锋,等管角螺窒息点及昼夜代谢规律J应用生态学报,2008,1992092209612陆珠润,蒋霞敏,王春琳,等不同温度、底质和饵料对管角螺孵化和稚、幼螺生长的影响J南方水产,2009,133232613潘英,陈锋华,李斌,等管角螺对几种环境因子的耐受性试验J水产科学,2008,271156656914潘英,陈锋华,庞有萍,等管角螺的生物学特性及养殖J水产科学,
24、2008,271242615潘英,庞有萍,罗福广,等管角螺的繁殖生物学J水产学报,2008,32221722216潘英,王强哲,庞有萍,等管角螺全人工育苗试验J水产科技情报,2007,342848517谢嗣光大瓶螺胚胎发育的观察J水产学报,1994,181394418许章程,王初升,张玉生细角螺的繁殖生态条件及繁殖习性J水产学报,2006,30684885019许章程,金亮,宋普庆,等温度和盐度与细角螺幼体生存、生长及发育的关系J台湾海峡,2009,280226627020杨铭角螺的繁殖生物学观察J海洋与渔业,2008,4192221张正道管角螺的人工育苗J科学养鱼,2001,42522朱意爱
25、,赵向炯,杨运琪东极海区管角螺软体部的营养成分分析J南方水产,2008,42636823王慧珍浙江动物志软体动物篇M杭州浙江科学技术出版社,199110324MORTONBPREYPREFERENCE,CAPTUREANDRATIONINHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1985,941319121025MORTONBREPRODUCTION,JUVENILEGROWTH,CONSUMPTIONANDTHEEFFECTSOFSTARVATIONUPO
26、NTHESOUTHCHINASEAWHELKHEMIFUSUSTUBAGMELINPROSOBRANCHIAMELONGENIDAEJJOURNALOFEXPERIMENTALMARINEBIOLOGYANDECOLOGY,1986,1022325728026PHILLIPSDJH,DEPLEDGEMHDISTRIBUTIONOFINORGANICANDTOTALARSENICINTISSUESOFTHEMARINEGASTROPODHEMIFUSUSTERNATANUSJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,1986,34261266本科毕业设计（20_届）管角螺的胚胎发育
27、过程的研究目录引言11材料与方法111材料112方法113测量与计算12结果与分析121卵囊形态122胚胎发育分期2221受精卵2222第一极体期2223第二极体期22242细胞期22254细胞期22268细胞期222716细胞期222832细胞期2229多细胞期32210桑椹期32211大卵期形成期32212大卵期32213花生期32214螺旋期32215哑铃期32216葫芦期32217囊内面盘期32218囊内稚螺期42219初孵稚螺期423胚胎发育时序43讨论631产卵632卵囊633胚胎发育的分期634胚胎发育时序735关于胚胎发育的形态74小结7致谢错误未定义书签。参考文献8图版说明9
28、摘要本文从形态学以及胚胎发育时序对管角螺的胚胎发育进行研究。结果表明管角螺为卵囊内直接发育型，根据胚胎在卵囊内的形态，可以将管角螺胚胎的发育分为19个时期，即受精卵期、第一极体期、第二极体期、2细胞期、4细胞期、8细胞期、16细胞期、32细胞期、多细胞期、桑椹期、大卵形成期、大卵期、花生期、螺旋期、哑铃期、葫芦期、囊内面盘期、囊内稚螺期、初孵稚螺期。从受精卵到稚螺破膜孵化这一过程在水温220，约需40D；水温200242，约需35D；水温250，约需33D；水温280，约需37D。卵囊内大部分卵为败育卵，为正常发育受精卵提供营养。关键词管角螺；胚胎发育；卵囊；败育卵；发育时序ABSTRACTT
29、HISARTICLESTUDYTHEHEMIFUSUSTUBAFROMMORPHOLOGYANDTHECALENDAROFEMBRYONICDEVELOPMENTTHERESULTSSHOWTHATHEMIFUSUSTUBAISDEVELOPEDDIRECTLYINTHEOOCYST,THEENTIREEMBRYONICDEVELOPMENTOFHEMIFUSUSTUBAWASDIVIDEDINTONINETEENSTAGESACCORDINGTOTHESIZEOFTHEEMBRYONIC,OOSPERMSTAGE,THEFIRSTPOLARBODYSTAGE,THESECONDPOLARBO
30、DYSTAGE,2CELLSTAGE,4CELLSTAGE,8CELLSTAGE,16CELLSTAGE,32CELLSTAGE,MULTICELLSTAGE,MULBERRYSTAGE,FORMEDBIGEGGSTAGE,BIGEGGSTAGE,EARTHNUTLIKEEGGSTAGE,HELIXLIKEEGGSTAGE,DUMBBELLLIKEEGGSTAGE,CALABASHLIKEEGGSTAGE,VELIGERINOOCYSTSTAGE,YOUNGSNAILINOOCYSTSTAGE,YOUNGSNAILSTAGEEACHPERIODRANGINGFROMAFEWHOURSTOSEV
31、ERALDAYSWHILEITISINFLUENCEDBYEXTERNALTEMPERATUREANDSALINITYTHEWATERTEMPERATUREWAS22,HATCHINGTIMENEED40DAT25,HATCHINGTIMENEED33DATTHENATURALTEMPERATURE200242,ITNEED35DAT28,ITNEED37DMOSTOFTHEFERTILIZEDEGGSISABORTIVEEGGS,THEYPROVIDENUTRITIONFORTHEFERTILIZEDEGGSKEYWORDSHEMIFUSUSTUBAEMBRYONICDEVELOPMENTO
32、OCYSTABORTIVEEGGSTHECALENDAROFDEVELOPMENT1引言管角螺（HEMIFUSUSTUBA），俗称角螺、响螺，是浅海较大型经济肉食性贝类，为热带和亚热带暖水性种类王慧珍等，1991。其肉肥大，营养丰富，肌肉中糖蛋白有显著的抗癌活性（傅余强等，2000）。主要分布在我国东南沿海，生活在潮下带近海1170M的软泥和泥沙质的海底。其市场价格不菲，一般可达100200元/KG，具有一定的市场开发潜力。但天然的野生种群密度低，成螺的生长周期长，捕获不易，加之近年来过度捕捞和海洋环境的污染，导致了我国沿海的管角螺资源日益枯竭。管角螺人工育苗与增养殖迫在眉睫。目前国内外有关管
33、角螺胚胎发育的研究报道不多，国外对管角螺的研究主要集中在幼螺的生长摄食方面（MORTONB），同属的细角螺无机盐与总砷的含量分析（DJHPHILLIPS）国内主要集中在繁殖发育（林志华等，1998；罗杰等，2007；杨铭，2008；潘英等，2008）、人工育苗（张正道，2001；潘英等，2007、）、营养成分分析（傅余强等，2002；朱爱意等，2008）、代谢（罗杰等，2008）、孵化与稚幼螺生长（陆珠润等，2009）等。而迄今有关管角螺胚胎发育时期卵囊、胚胎的形态学以及胚胎发育时序的研究尚未见报道。本课题主要从管角螺胚胎发育的形态学以及发育时序，对管角螺胚胎发育过程、卵囊膜进行初步研究，以期
34、为该物种的人工育苗、增养殖资源保护以及开发利用等提供理论依据和参考数据。1材料与方法胚胎作为亲体和幼体的中间环节，处在举足轻重的位置，胚胎发育是个体发育的主体，一直是个体发育研究的核心。不同种动物具有不同繁殖方式和不同发育史，胚胎有不同的形态，它们的胚胎发育也表现了高度的多样性和复杂性。国内有关软体动物胚胎发育的报道较多，双壳类种类主要有背角无齿蚌（ANODONTAWOODIANA）石安静，1995、绢丝丽蚌（LAMPROTULAFIBROSA）（杨学芬等，1999）、河蚬（COBICULAFLAMINCA）（顾敏强等，2001）、蛤蜊（RUDITAPESPHILIPPINARUM）（沈永忱等
35、，2005）等。腹足类种类主要有大瓶螺（POMACEACANALICULATASPIX）（谢嗣光，1994）、泥螺（BULLACTAEXARATA）（王一农等，1997）、波部东风螺（BABYLONIAFORMOSAEHABEI）郑怀平等，2000、折叠萝卜螺（RADIXPLICATULA）陈康贵等，2003、方斑东风螺（BABYLONIAAREOLATA）（刘建勇，2005）等。但对于管角螺胚胎发育的研究很少，只有罗杰等研究了盐度对管角螺胚胎发育的影响（罗杰等，2007）。本试验对管角螺的胚胎发育过程的形态学进行研究，旨在充实管角螺在繁殖生物学方面的资料，为管角螺的人工育苗提供一些理论依据。
36、11材料试验于2010年4月至2010年7月在宁波市宁海县得水水产育苗厂进行。亲螺从浙江舟山海域底拖网获得的，螺壳高12881751CM，壳宽489811CM，螺重13932299G。暂养在得水育苗厂65M32M15M的水泥池中，暂养条件水深80CM，温度为190250（早期加温至190），盐度205221，PH80，遮阳布遮光，投喂缢蛏，日投喂量为螺重的10，每天换水一次，换4/5的水，23D后水全换，清洗池子一次，24H连续充气。12方法雌螺产出卵后，迅速取下部分卵囊，分别放入16个1L烧杯内培养，烧杯分别置于48CM48CM25CM的泡沫箱中，其中一个泡沫箱为自然变温环境，其他用电热棒加
37、热至22、25、28恒温水浴。前期连续观察，后期间隔4H观察一次，活体用N300M显微镜与OPLENIC拍摄系统观察、拍照并进行测量，观察后样本用5的甲醛溶液固定。卵囊外部形态用数码相机拍摄，卵囊内用OLYMPUSBH2显微镜观察、拍照并进行测量。13测量与计算试验期间，雌性管角螺产卵后，即用直尺（精确到1MM）及圆规测量卵囊串的长度、卵囊的高、宽及卵囊基部的高度等数据，并计数囊内受精卵的数量，数据、图表用EXCEL进行处理。2结果与分析21卵囊形态2管角螺喜将卵囊产于池壁上或池底，成线型排列或盘旋型排列（图版1，2）。卵囊经雌性腹足口（图版15）产出，刚产出的卵囊膜较软，呈乳白色，半透明，表
38、面光滑，上宽下窄，呈乒乓板状或豆荚状。产出后卵囊膜逐渐变硬，颜色逐渐变淡黄色、深黄色。卵囊顶端的两侧有褶皱，中间有一薄的椭圆形卵膜孔，被透明的胶质膜封闭，是稚螺孵化的出口。在卵囊的基部有一胶质短柄柄长24MM，短柄的基部是一薄而有强粘性的胶质层，各卵囊依靠其与短柄相连并黏附在固着物上，连成串，即卵囊串。卵囊游离端宽度为091182CM，近柄部宽度为022054CM，高度为139338CM，厚度为011021CM（图版3）。每一卵囊串的卵囊个数不同，为1281个，卵囊串总长可高达到694CM左右（图版4）。卵囊内卵子均匀悬浮分布于粘稠透明状的胶质液中，不同的卵囊含卵量不同，一般每个卵囊含卵量为1
39、8003500IND。卵囊内存在两种卵，即正常卵和败育卵，只有正常卵能发育成稚螺，最后发育成稚螺的数量一般在737个，每个卵囊内只有0320的卵能正常发育，其余都是败育卵，大量的败育卵给为数不多的正常卵提供了整个发育阶段的营养，所以也称营养卵。在单细胞阶段，受精卵和败育卵的形态、大小相似。卵囊内充满粘液，胚胎发育早期，卵囊一旦剪破，正常卵就停止发育；而到发育后期，已形成囊内面盘幼虫时，即使卵囊破裂，胚胎依然能正常发育。22胚胎发育分期管角螺为卵囊内直接发育型，没有浮游幼虫期，根据胚胎在卵囊内的形态，可以将管角螺胚胎的发育分为19个时期，即受精卵期、第一极体期、第二极体期、2细胞期、4细胞期、8
40、细胞期、16细胞期、32细胞期、多细胞期、桑椹期、大卵形成期、大卵期、花生期、螺旋期、哑铃期、葫芦期、囊内面盘期、囊内稚螺期、初孵稚螺期。同一个卵囊内胚胎发育不同步。221受精卵管角螺初产卵呈淡黄色，圆球形，卵径大小为280330M，产出后，颜色逐渐变深（图版5），一个卵囊中约18003500粒，却难以判别正常卵与败育卵（图版II1）。222第一极体期在温度为20280，盐度210221的条件下，受精67H后，首先在动物级顶端出现1个直径为1015M的小突起，然后放出第一极体（图版II2），卵径大小为265310M。223第二极体期受精后78H，第一极体被释放40MIN左右后，紧接又放出第二极
41、体（图版II3，4），卵径大小250300M，两极体一大一小突起在受精卵的一端或两端，两极体直径分别为1020M和1535M。2242细胞期受精后811H，管角螺卵属均黄卵，卵裂方式为螺旋型卵裂。受精约810H后，受精卵进入卵裂，在受精卵中央形成一个分裂面，1个细胞分裂成大小相等的2个分裂球，形成花生型二细胞胚胎，细胞大小为326136342159M（图版II5）。2254细胞期受精后1114H，第一次分裂完成后，进行第二次卵裂。第二次分裂面与第一次分裂面垂直，2个细胞分裂成4大小相等的分裂球，形成4细胞胚胎，细胞大小为239212245213M（图版II6，7）。2268细胞期受精后1520
42、H，4细胞分裂球逐渐形成小葫芦状。小葫芦顶端与底端比大约为122，小葫芦顶部直径为125M，底部直径约为275M（图版II8）。此后进行第三次分裂，分裂面与第一、二次分裂面垂直，从而形成大小不等的8个分裂球，动物极的4个分裂球较小，植物极的4个分裂球较大，每个小分裂球位于2个大分裂之间，体现出螺旋卵裂方式。大分裂球直径约为200M，小分裂球直径约为75M（图版II9）。22716细胞期受精后2032H，8细胞之后继续进行卵裂形成16细胞胚胎，大小分裂球螺旋间隔排列，呈现花瓣状胚胎，胚胎大小约为400M365M，大分裂球的直径约为186M，小分裂球直径约为60M（图版II10）。22832细胞期
43、3受精后2539H，16细胞之后继续进行卵裂形成32细胞胚胎。此胚胎期，32个分裂期分成动物极分裂球层与植物极分裂球层，植物极分裂球直径约为156M，动物极分裂球比植物极分裂球小，直径约为100M（图版II11）。229多细胞期受精后5977H，32细胞之后继续进行多次卵裂形成多细胞胚胎。多细胞胚胎呈椭圆型，胚胎外边粗糙，胚胎长为277286M，宽为150186M（图版II12）。2210桑椹期受精后6787H，受精卵经过多次分裂，形成具有数十至数百个细胞的细胞团，外形与桑实相似，故称为桑椹胚，胚胎大小约200320M（图版II13）。2211大卵期形成期卵囊产出后76106H，败育卵不断向正
44、常卵靠近，且每一个正常发育的受精卵会用卵囊内的粘液将周围许多败育卵粘到一起，败育卵包围在受精卵外，为受精卵胚胎发育提供营养，最外一层较薄的胶质膜包裹正常卵与败育卵，形成圆球状大卵，直径约26MM（图版II14）。大约有3050个卵组成一个大卵，在卵囊外能看到在大卵周围还分布了一部分败育卵（图版6）。2212大卵期卵囊产出大约6D，一层较薄的胶质膜将正常发育的受精卵用粘液粘着150200个败育卵形成一个个大卵了。剪开卵囊在显微镜下看，表面凹凸不平，大卵直径约为38MM（图版II15），看似胚胎发育的多细胞期，实质是黏附到一起的败育卵。用解剖针挑动胶质薄膜，正常发育卵与败育卵容易全部散开。2213
45、花生期卵囊产出约7D，大卵胚胎从中间内凹，逐渐变成花生状，从卵囊外看如一颗颗花生，故称此期为花生期（图版7）。剪开卵囊在显微镜下观察，花生期胚胎的长径约36MM，最短径约20MM，外层胶质膜变厚，包裹在胚胎外，所以胚胎表面光滑，观察不到凹凸不平的现象，胶质膜内依然充满败育卵（图版16），用解剖针刺破胶质，败育卵会散开。花生期胚胎继续发育，中间内凹处逐渐出现一个透明的肉状器官，能像青蛙腮帮不停的扩张，鼓起呈泡状，收缩则为一小突起（图版17）。2214螺旋期卵囊产出约10D，花生期胚胎短径部分逐渐弯曲，从卵囊外看成螺旋型，故称此期为螺旋期（图版8）。剪开卵囊在显微镜下观察，螺旋期胚胎分化形成眼、口
46、器官。眼约为100M，口约为50M，整个胚胎为3947MM，外观似光滑的小鼠（图版18）。2215哑铃期卵囊产出约13D，胚胎中间内凹更加明显，逐渐变成哑铃状，故称此期为哑铃期，胚胎从卵囊外看和花生期差不多（图版9）。剪开卵囊在显微镜下观察，哑铃期胚胎比花生期胚胎小，长径约31MM，最短径约06MM，中间凹陷处透明的肉状突起逐渐变态成两片状结构，形似两片船桨，并能在卵囊内的粘液中不断滑动（图版19）。胚胎外的胶质膜变的更加厚实，从体积上显示，哑铃期胚胎内的败育卵明显减少。2216葫芦期卵囊产出约15D，哑铃期胚胎的一端开始逐渐变小，另外一端逐渐变大，逐渐变成葫芦状，故称此期为葫芦期（图版10）
47、。剪开卵囊在显微镜下观察，葫芦期的胚胎比哑铃期小，长径约25MM，短径约10MM，外胶质膜更加明显厚实，在中间凹陷处，除了两片状结构，还出现了一个蝴蝶状的肉质器官，不停的在粘液中伸缩（图版20）。葫芦期胚胎继续发育，较大的一端不断变小（图版21），外被胶质膜越来越厚，败育卵逐渐减少，片状结构和蝴蝶状器官更加明显（图版22），片状结构由最初的透明肉状小突起进化而来，最后发展成为鳃，蝴蝶状器官最后则发展成足。2217囊内面盘期卵囊产出约20D，葫芦期的一端败育卵完全耗尽，逐渐出现螺的雏形（图版11）。将卵囊剪开观察，已经能清楚的辨别螺的足和外壳（图版23），壳高约2633MM，壳宽约1121MM，
48、并能在卵囊内活4动，头部出现L对触角和基眼（图版24），此即为管角螺的囊内面盘期，面盘期胚胎外被的胶质膜已经硬化，形成原始贝壳，在螺旋部还能清楚的观察到败育卵的存在，将胚胎放在培养皿中观察，其能粘附在玻璃器皿上爬行（图版25）。2218囊内稚螺期卵囊产出约27D，胚胎发育到囊内稚螺期，囊内稚螺期的胚胎已经形成螺形了，壳高2841MM，壳宽1321MM，螺壳白色透明状（图版26），在卵囊中黏附在卵囊壁上，能爬行（图版12），如果将此期的胚胎从卵囊中取出，它们也能存活。2219初孵稚螺期卵囊产出约35D，卵膜孔破裂，囊内稚螺从卵囊内爬出，为初孵稚螺，壳白色，壳顶部仅一个螺层，略显红色，壳高3753
49、MM，壳宽1932MM，初孵稚螺喜欢吸附在卵囊的外壳及其它可供附着的基质上（图版13，14）。随着幼螺的不断生长，贝壳慢慢转变为浅黄色，体螺层不断增加（图版27）。从卵囊内一出来，初孵稚螺就能摄食缢蛏或菲律宾蛤子等双壳类的肉糜，它们能成群的爬在双壳类肉糜上舔食。23胚胎发育时序由表1和图1可知，在不同水温条件下，管角螺的胚胎发育所需时间不同。水温200242，约需35D；水温22，约需40D；水温25，约需33D；水温28，约需37D。各个水温条件下，胚胎发育过程中均体现受精卵期至32细胞期各期持续时间较短，大卵期至初孵稚螺期各期间隔时间较长。第一极体期持续3648MIN；第二极体期持续23H，2细胞期持续23H；4细胞期持续46H；8细胞期持续512H；16细胞期持续46H；32细胞期到多细胞期需时2834H；多细胞期持续810H。形成大卵的时间为6394H，大卵期到花生期需要时间为2435H。受精约10D，胚胎呈现螺旋状。受精约13D后，胚胎进一步发育形成哑铃期胚胎。受精约15D后，哑铃期胚胎逐渐变成葫芦状。卵囊产出约20D，胚胎形成囊内面盘幼虫期，此期持续时间56D。囊内稚螺期持续时间最长，可持续78
