1、实验室生物安全培训,Genokon Medical Technology,2018.06.28,一、实验室生物危害二、实验室生物安全法律法规三、实验室生物安全防护,一、实验室生物危害,实验室生物危害包括：1.病毒、细菌、真菌、毒素和寄生虫等2.来自感染实验室制备、环境样本、人和动物的血液、体液和各种组织等。,实验室感染特征,1979-2004；世界范围内确认1141例实验室感染，其中24例死亡，事故特征为：1、确认感染的大多数致病病原体包括： 结核杆菌 乙肝病毒埃博拉病毒 沙门氏菌布鲁氏菌 汉坦病毒2、许多是无症状感染（与化学相比）3、许多新发病原体例如：SARS-COV4、大多数事故中无特殊
2、暴露事故,实验室感染原因,发生感染的原因：80%是不明原因的感染（气溶胶）20%感染的原因是明确的（割伤，刺伤）80%是由工作人员操作失误引起（时间长，工作量大）20%是由设配故障引起的导致感染的最多的4种实验室事故实验操作或溢出产生气溶胶的吸入经皮接触粘膜污染,实验室感染必然性和可控性, 必然性: 客观存在,无法避免 可控性: 只要重视,认真对待是可以控制的.可控制性条件： 领导重视 科学管理 可靠的硬件 高素质的科技人才队伍 不断完善的技术和SOP,气溶胶的特点,生物气溶胶无色无味、无孔不入，不易发现，实验人员在自然呼吸中不知不觉吸入而造成感染。若治疗控制不及时会造成严重后果。与其疾病自然
3、感染相比，有些微生物气溶胶感染的症状不典型（与普通感冒相似），病程复杂，难以及时诊治，影响预后。,感染性气溶胶(infectious aerosol)：微粒中含有致病微生物。气溶胶粒径（PM2.5）10m，一般被阻留在鼻腔内；5m，可进入细支气管和肺泡。气溶胶粒子越小，进入的部位就越深：1m的在肺泡内沉积率最高；,中国实验室生物安全案例,1.中国CDC实验人员感染非典病毒事故:2004年4月，中国CDC病毒所两名研究生在做病毒实验时感染SARS 病毒。（后患者又引发同事、家人以及医护人员感染）。1）原因：该所实验人员多次违规将未完全灭活的SARS病毒从P3实验室带出至普通实验室操作而引起。2）
4、事件处理:中国疾控中心主任李立明引咎辞职，其它有关领导人员亦受相应处理。,经验教训：实验室生物安全无小事！病原微生物实验室、特别是高致病性病原微生物实验室内操作的任何疏忽、失误都可能造成难以弥补的损失。,二、实验室生物安全法律法规,国务院424号令生物安全管理条例条例共7章，72条。 目的：加强实验室生物安全管理，保护实验室工作人 员和公众的健康。核心思想：对病原微生物的分类管理，对实验室进行分级管理,条例规定：国家对病原微生物实行分类管理。根据其传染性、感染后对个体或群体的危害程度，将病原微生物分为一四类，其中一、二类统称为高致病病原微生物。条例规定对实验室实施分级管理，按防护水平和国家标准
5、的规定，将实验室分为一至四级。对一级、二级实验室需要备案。三级、四级实验室需要国家强制认可条例规定实验室负责人为实验室生物安全的第一责任人。,危险度等级,防护水平,三、实验室生物安全防护,1.生物安全实验室防护原则2.生物安全实验室个人防护装备3.实验室突发事件应急处理,生物安全实验室防护原则,实验室生物安全防护三原则：1.安全设备、个体防护装备（一级防护）2.实验室的特殊设计和设施建设（二级防护）3.标准化的操作程序和管理制度保证实验室工作人员不受操作因子感染保证实验室内环境和外环境不受操作因子污染,一级防护屏障（直接保护人员）是指在涉及病原微生物的活动中，为消除或减少人员直接暴露于感染性材
6、料，在人员与感染性材料之间设置物理隔离。一级防护包括生物安全柜（关键设备需要年检）各种密闭容器包括个人保护项目，例如手套，鞋套，口罩，护目镜等,二级防护屏障（直接保护实验室内外环境）是指涉及病原微生物活动的设施为了防止设施内病原微生物、活动产生的感染性“三废（固废、液废、气废）”等泄露到外环境而特殊设计的物理隔离技术和方法。BSL-1和BSL-2的二级屏障包括：实验室工作区和公共通道分开，消毒设备（如高压灭菌器）和洗手装置的使用,生物安全实验室主要防护装备1.生物安全柜2.高压灭菌器3.个人防护装备,个人防护装备,个人防护装备选择原则在危害评估的基础上，实验室工作人员根据不同级别的防护要求选择
7、适当的个人防护装备工作人员关注的要点：必须十分了解和掌握自己工作性质和特点正确的使用方法,1、眼睛的防护,1、安全眼镜和护目镜A）在所有易发生潜在眼睛损伤（物理、化学和生物因素引起）的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施B）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度。建议：工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐形眼镜 不得戴眼镜防护装备离开实验室区域 ！,a 、安全镜 大多数情况,佩戴侧面带有护罩的安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害。,在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时，必须佩戴护目镜。,2、洗眼装置,规定：BSL-2和BSL-3实验
8、室应配备紧急洗眼装置 如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。,3、淋浴装置和应急消毒喷淋装置,1） 规定：-BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置 2）要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋 装置的摆放位置、培训其操作方法。,4、头面部防护装备,口罩 普通口罩可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染 适用于BSL-1或BSL-2实验室中使用防护帽在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所
9、造成的污染要求：工作人员在实验操作时应佩带防护帽,5、手部防护装备 手套,1、在接触感染性物质 （血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。 2、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。 3、对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训。,规范使用手套的几个要点：手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护 手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（
10、漏损）或有裂缝。,乳胶手套,聚腈手套,聚氯乙烯手套,3、手套的使用： a）一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1和BSL-2实验室) b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-3实验室）应佩戴两副手套。 c）在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。 d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服衣袖。,4、手套的清洗和更换：a)使用一次性手套，不可重复使用。用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。b)不得戴着手套离开实验室区域。C) 工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜之前,应该脱去外层手套丢入生物安全柜
11、内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套，以避免污染门把手、电灯开关、电话等（BSL-2和BSL-3实验室）。,5、避免手套“触摸污染” a)戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）b)避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门把手等c) 注意尽量不去触摸工作台面和其他物品,戴手套注意要点:1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;戴手套的手要远离面部。,脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手
12、套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。,6、体表防护,防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁 5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换6、离开实验室区域之前应脱去防护服。,7、足部防护装置,当实验室中存在物理、化学和生物危险因子的情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套。可以防止实验人员足部（鞋袜）避免受到损伤。BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。禁止
13、在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋和露趾的鞋。,实验室事故应急处理,1、样本溢出处理： 做好个人的防护。用沾有消毒剂布或纸巾从污染区的四周向中心覆盖并吸收溢出物。向纸巾上倾倒适当量的消毒剂。使用消毒剂时，从溢出区域的外周开始，向中心进行处理。作用适当时间后（30 min），将所处理物质清理掉。如果含有碎玻璃或其他锐器，则要使用硬的厚纸板或镊子来收集处理过的物品，并将它们置于可防刺透的容器中以待处理。对溢出区域再次进行清洁并消毒(如有必要，重复第2-5步)。将污染材料置于防漏、防穿透的弃物处理容器中。,2、人员受伤应急处理皮肤针刺伤或割伤：立即用大量流水冲洗，尽可能挤出血液，3%碘酒及75%酒精消毒伤口皮肤污染：用水或肥皂水冲洗污染部位，并用适当的消毒剂浸泡粘膜污染：用大量流水或生理盐水彻底冲洗污染部位衣物污染：尽快脱掉污染的衣物，进行消毒处理,Thank you,
