1、本科毕业设计（20_届）象山港不同营养层次鱼类摄食的脂肪酸生物标志物分析所在学院专业班级海洋生物资源与环境学生姓名学号指导教师职称完成日期年月I摘要采用改进BLIGHDYER法，提取鲈鱼、半滑舌鳎、龙头鱼、带鱼、黄鲫、海鳗、黑鳃梅童鱼、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼、棘头梅童鱼10种象山港不同营养层鱼类总脂，并进行脂肪酸的气相色谱质谱定性定量分析。结果表明，象山港鱼类含有丰富EPA和DHA，EPA含量最高的是鲻鱼（1105），最低的是带鱼（440）；DHA含量最高的为棘头梅童鱼（2890），最低的为鲻鱼（605）。通过脂肪酸组成和脂肪酸生物标志物的食物链溯源分析，基本确定这些鱼类的源头食物链。半滑舌鳎、龙
2、头鱼、黄鲫、海鳗、黑鳃梅童鱼、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼食用细菌，10种鱼类均食用蓝细菌、鞭毛藻属，黄鲫、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼食用陆源高等植物，龙头鱼、带鱼、黄鲫、黑鳃梅童鱼食用浮游动物；10种鱼样基本上不食用硅藻、绿藻、褐藻，鲈鱼、半滑舌鳎、龙头鱼、带鱼、海鳗、黑鳃梅童鱼、棘头梅童鱼不食用陆源高等植物，鲈鱼、半滑舌鳎、海鳗、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼、棘头梅童鱼不食用浮游动物。根据脂肪酸组成判断鲈鱼、半滑舌鳎、龙头鱼、黑鳃梅童鱼、棘头梅童鱼具肉食性；黄鲫、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼具杂食性；带鱼、海鳗具肉食腐食性。关键词象山港；脂肪酸；生物标志；营养层ABSTRACTTHEFATTYACIDCOMPOSITIONOF
3、TENDIFFERENTTROPHICPOSITIONFISHESINXIANGSHANHARBORLATEOLABRAXJAPONICAS,CYNOGLOSSUSSEMILAEVIS,HARPODONNEHEREUS,TRICHIURUSJAPONICUS,SETIPINNATATY,MURAENESOXCINEREUS,COLLICHTHYSNIVEATU,MUGILCEPHALUS,SYNECHOGOBIUSOMUNATURUSANDCOLLICHTHYSLUCIDUSWEREANALYZEDBYMEANSOFGC/MSTHERESULTSHOWSTHATTHEFISHESINXIANG
4、SHANHARBORISABUNDANTINEPAANDDHAMUGILCEPHALUSHASTHEHIGHESTCONTENTOFEPA1105,WHILETRICHIURUSJAPONICUSHASTHELOWESTCONTENTOFEPA440ANDTHEFISHTHATHASTHEHIGHESTDHAISCOLLICHTHYSLUCIDUS2890,WHEREASTHELOWESTISMUGILCEPHALUS605ASSESSMENTOFFATTYACIDCOMPOSITIONANDBIOMARKERSINDICATETHATCYNOGLOSSUSSEMILAEVIS,HARPODO
5、NNEHEREUS,SETIPINNATATY,MURAENESOXCINEREUS,COLLICHTHYSNIVEATU,MUGILCEPHALUSANDSYNECHOGOBIUSOMUNATURUSPERHAPSFEEDONBACTERIAALLOFTHETENSPECIESHAVECYANOBACTERIAANDDINOFLAGELLATESASTHEIRFOODRESOURCETHEFATTYACIDOFSETIPINNATATY,MUGILCEPHALUSANDSYNECHOGOBIUSOMUNATURUSMAYHASTERRESTRIALPLANTCONTRIBUTIONSANDT
6、HEREISZOOPLANKTONSOURCEINTRICHIURUSJAPONICUS,SETIPINNATATY,MURAENESOXCINEREUS,COLLICHTHYSNIVEATUANDSYNECHOGOBIUSOMUNATURUSINADDITION,WECOULDRULEOUTTHEPOSSIBILITYOFTHEFOODSOURCEOFDIATOMS,GREENALGAE,BROWNALGAEINALLOFTHETENSPECIESOFFISHESLATEOLABRAXJAPONICAS,CYNOGLOSSUSSEMILAEVIS,HARPODONNEHEREUS,TRICH
7、IURUSJAPONICUS,MURAENESOXCINEREUS,COLLICHTHYSNIVEATU,SYNECHOGOBIUSOMUNATURUSANDCOLLICHTHYSLUCIDUSMIGHTNOTFEEDONTERRESTRIALPLANTANDTHEREISNOCONTRIBUTIONFROMZOOPLANKTONINTHEFATTYACIDOFLATEOLABRAXJAPONICAS,CYNOGLOSSUSSEMILAEVIS,MURAENESOXCINEREUS,MUGILCEPHALUS,SYNECHOGOBIUSOMUNATURUSANDCOLLICHTHYSLUCID
8、USOURFINDINGMAYALSODEMONSTRATETHEFEEDINGMODE,LATEOLABRAXJAPONICAS,CYNOGLOSSUSSEMILAEVIS,HARPODONNEHEREUS,COLLICHTHYSNIVEATUANDCOLLICHTHYSLUCIDUSARECARNIVOROUSANDSETIPINNATATY,MUGILCEPHALUS,SYNECHOGOBIUSOMUNATURUSAREOMNIVOROUSTRICHIURUSJAPONICASANDMURAENESOXCINEREUSARECARNIVOROUSNECROPHAGOUSKEYWORDSX
9、IANGSHANHARBORFATTYACIDBIOMARKERTROPHICPOSITIONII目录1引言12材料与方法121药品与仪器122试验样品123样品分析124色谱质谱条件125数据处理226脂肪酸生物标志物判断依据23结果34讨论441必需脂肪酸442脂肪酸标志物判断鱼类摄食种类543以脂肪酸标志物判断鱼类摄食食性75展望8致谢错误未定义书签。参考文献8附录11引言食物联系是海洋生态系统的结构与功能的基本表达形式。因此，对海洋生态系统的食物网营养级的了解，有助于评估海洋中物质和能量的流动过程、海洋生物资源现状。作为捕食者，鱼类在生态环境中发挥重要作用，因此我们需要研究其食性，以此
10、了解其营养层次分布关系1。对象山港鱼类食性的研究主要依赖传统胃含物分析方法2。但是这种方法存在一定的偶然性，因此往往需要大量的统计观察才能消除这种偶然性；而且，它不能区分对所摄取食物消化吸收的难易程度，结果往往偏向于较难消化的食物；此外，对消化道内残余物的观察不确切，使得生物在食性确定上存在较大的困难3。在过去的二十年中，研究人员已经建立利用脂肪酸作为生物标志物调查海洋动物营养关系与海洋生物分布模式4、5、6的科学方法。由于海洋动物的脂肪酸主要来自于所摄入的食物，同时脂肪酸在生物体内的代谢过程中比较稳定，经生物消化吸收后基本结构不变。因此它连接的脂肪酸是标志其食物来源的重要标志7，这些脂肪酸从
11、生态系统的低营养级向高营养级的传递过程中，结构基本保持不变，使其成为标志生态系统不同营养级之间营养关系的良好标志物。本实验拟通过研究20种鱼类的白肌脂肪酸组成状况，探讨其营养层次关系。2材料与方法21药品与仪器QP2010气相色谱质谱分析仪，AOC20自动进样器（日本SHIMADZU公司），30MM025025MSPB50色谱柱（美国SUPELCO公司）；冷冻干燥机（美国LABCONCO公司）；国产旋转蒸发仪、超声清洗机、漩涡混合仪、低速离心机、高速分散器、电子天平等。C190脂肪酸标准溶液和14BF3CH3OH溶液（美国ALLTECH公司），色谱纯正己烷（美国TEDIA公司），氯仿、甲醇、氢
12、氧化钾、盐酸、正己烷、无水硫酸钠均为国产分析纯。22试验样品鱼样2010年12月30日采自象山港海域，共20尾，10种，作两个平行。分别如下鲈鱼（LATEOLABRAXJAPONICUS）、半滑舌鳎（CYNOGLOSSUSSEMILAEVIS）、龙头鱼（HARPODONNEHEREUS）、带鱼（TRICHIURUSJAPONICUS）、黄鲫（SETIPINNATATY）、海鳗（MURAENESOXCINEREUS）、黑鳃梅童鱼（COLLICHTHYSNIVEATUS）、鲻鱼（MUGILCEPHALUS）、斑尾复鰕虎鱼（SYNECHOGOBIUSOMUNATURUS）、棘头梅童鱼（COLLICH
13、THYSLUCIDUS）。取一定量白肌匀浆后，放在冷冻干燥机上彻底干燥后，20温度下冷冻保存。23样品分析称取1020G左右的鱼样干品，参考改进后的BLIGHDYER法8提取总脂，按文献9中方法将总脂皂化后进行脂肪酸的气相色谱质谱定性定量分析。24色谱质谱条件GC条件进样口温度250，载气为纯度为99999的高纯氦，柱流速081ML/MIN,柱前压730KPA,柱起始温度150，保持35MIN，以20/MIN升至200，再以5/MIN升至280，保持37MIN。分流2进样1L，分流比501；MS条件离子源选用电子轰击（ELECTRONIMPACT,EI）源，电子能量为70EV，离子源温度200
14、，接口温度250，选取全程离子碎片扫描（SCAN）模式，质量扫描范围为40600，溶剂延迟35MIN。用化学电离（CHEMICALIONIZATION,CI）源分析时，反应气为甲烷。25数据处理在上述分析条件下，每一脂肪酸组分都有各自保留时间，此保留时间即为定性依据之一。从GCCIMSTIC图中各组分的质谱，可以初步确定出各组分的分子量；再根据GCEIMSTIC中各组分的离子碎片质量谱图，通过NIST库并参考脂肪酸标准谱图可以定性出所有的脂肪酸。取同种鱼样的两个样品均值进行统计处理。26脂肪酸生物标志物判断依据得到鱼样的脂肪酸组成成分后，本文根据表1来判断各脂肪酸所指示的食物来源进行分析。表1
15、用于表征不同食物来源的生物标志物脂肪酸及脂肪酸比值TAB1FATTYACIDBIOMARKERSTOINDICATETHEFOODRESOURCESINMARINESYSTEM来源生物指示物细菌10C150、C170和分支脂肪酸15蓝细菌11、12、13160161N7181N9硅藻属14205N3164N1161/1601616/182205N3/226N31鞭毛藻属14226N3205N3/226N310陆源高等植物（红树林）19长链脂肪酸（碳的数目大于24）182N6183N325浮游动物2020122133结果根据气相色谱质谱总离子图中各组分的例子碎片质量谱图，通过NIST和WILEY
16、库检索并参考脂肪酸标准，从10种鱼中共鉴定出41种脂肪酸（表2）。其中，饱和脂肪酸（SFA）有17种，单不饱和脂肪酸（MUFA）9种，多不饱和脂肪酸（PUFA）15种。十种鱼的综合结果是SFA占总脂肪酸的35224412，MUFA占15223619，PUFA占22744128，EPA占440806，DHA占5161105。SFA中，含量最多的均为C160，占总量的20以上，C180占第二位，其次是C140，其他饱和脂肪酸的含量都很低；MUFA中含量最高的是C181N7，占总量的8382532，其次是C161N7和C181N8；PUFA中含量最高的是DHA，其次是EPA，C204N6等。十种鱼类
17、EPA含量均低于DHA。EPA含量最高的是鲻鱼（1105），最低的是带鱼（440）；DHA含量最高的为棘头梅童鱼（2890），最低的为鲻鱼（605）。从表2中可以看出，UFA均大于SFA，与舟山渔场、长江口毗邻海域所采集的鱼类样本脂肪酸定性定量实验结果一致4、21。鲈鱼、半滑舌鳎、黄鲫、斑尾复鰕虎鱼和棘头梅童鱼的PUFA大于MUFA，而剩余五种鱼的PUFA小于MUFA。10种鱼脂肪酸N3/N6的比值均大于3，带鱼与棘头梅童鱼的N3/N6的比值达到79，说明其高活动性22。表2象山港主要鱼种类的脂肪酸组成TAB2FATTYACIDCOMPOSITIONOFTENDIFFERENTTROPHICL
18、EVELFISHESFROMXIANGSHANHARBOR脂肪酸组成鲈鱼半滑舌鳎龙头鱼带鱼黄鲫海鳗黑鳃梅童鱼鲻鱼斑尾复鰕虎鱼棘头梅童鱼C120005000030000013000022000011006C14023113263049131623219036117514712MC150A044053003003000007003007007018C150019000054042059152057119065020C1602599248525762642277526262421281525512702C161N7469210137574453161810131367524563C162N40000
19、00022026000000000093000000C163N600000000000000000000007000000015MC1700000000000000130000130000000007MC171N11000000005000000000000000000000C1700601270230380481050300510700462HEXYLC170B000000056014035112063089054000C180106712424608345281126621763813803C181N10000000000000328619000000000000C181N91630868
20、17912477201816251933125414301371C181N7277445344310000000334553566254C182N3000000000000000000000038000000C182N5000000000110000000000000000000C182N6230178126000137112131205248137C182N12000000000000000000027000000000C183N3000000080025092000000250187000C183N600000000500000000000001100000010MC19000000000
21、000600003200000000000017MC1900000000110000000000000000000004续表2脂肪酸组成鲈鱼半滑舌鳎龙头鱼带鱼黄鲫海鳗黑鳃梅童鱼鲻鱼斑尾复鰕虎鱼棘头梅童鱼C190000000011000000000018000019000C191N90000000050000000000000000000003,7,11,15TETRAMETHYLC200C012000029000045000009000023000C200011039047019024021041020000021C201N9000000052030035000063000033000C202
22、N6000000010000000000000000000000C204N6551413222250184501246177360323C205N3/EPA51680268644066151573111051097569C204N7000000000000000000211000000000C210000056003000000000000000000000C220000000023000006000009000021000C221N9000000004000000000000000000000C214N7179000054088052000090038120125C226N3/DHA2093
23、27351175133620501600160760515772890C224N7000000002000000000005000000000C240011220028021011000027016031009C241N9000000011059043000056000026000EPA/DHA025029058033032032046183070020SFA4057435139804108387144123522423838363770MUFA2375152235863619295528623398317425772188PUFA3569412823802274317527273047258
24、935874043UFA5944565059655893613055886445576361646230N32609353719401801280221152338199728603459N6781591362250321612377462608459N3/N6334599536720873346621433471753注A在本文中，脂肪酸命名采用类似12MC150格式，其中“12”代表在远离羧基的甲基算起的第12个碳原子上带有一个甲基；B在本文中脂肪酸命名采取类似2HEXYLC170格式，其中“2”代表在远离羧基的甲基算起的第2个碳原子上带有一个己基；C在本文中脂肪酸命名采取类似3,7,11
25、,15TETRAMETHYLC200格式，表示在远离羧基的甲基算起的第3、7、11、15个碳原子上各有一个甲基。4讨论41必需脂肪酸金头鲷（SPARUSAURATA）饥饿时体内总脂、中性脂和极性脂中不同脂肪酸减少量由多到少依次为N6N9N3，而摄食鱼体内滞留的脂肪酸量由多到少则为N3N9N623。C205N3EPA和C226N3DHA等N3系列多不饱和脂肪酸是海水鱼类的必须脂肪酸24、25、26。因为大多数海水鱼类体内5不存在C205延长酶和去饱和酶，所以不能将亚麻酸和亚油酸等短链脂肪酸延长，也不能去饱和生成EPA与DHA。海水鱼N3系列PUFA中含量最高的为DHA，其次是EPA。其中鲈鱼、半
26、滑舌鳎、黄鲫、海鳗、黑鳃梅童鱼、斑尾复鰕虎鱼、棘头梅童鱼的DHA含量均达到15以上。EPA的含量为3521584，其中以斑尾复鰕虎鱼最高，均达到8以上。由此可见，象山港鱼类含有丰富的EPA和DHA。N3脂肪酸为EPA和DHA的统称，是细胞和组织的组成成分，参与代谢，调节生理机能。N3脂肪酸能有效帮助降低胆固醇和甘油三酯的含量27，促进人体内饱和脂肪酸代谢，从而起到降低血液粘稠度，增进血液循环，提高组织供氧而消除疲劳。防止脂肪在血管壁沉积，预防各类心血管疾病，包括脑血栓、脑溢血和高血压等。除此之外，还有报道指出，使用鱼油会改变血小板的脂质组成和功能，使其富含N3脂肪酸，延长出血时间28。鱼类中富
27、含必须氨基酸，无疑是老幼皆宜的保健佳品。42脂肪酸标志物判断鱼类摄食种类生物脂肪酸成分由食物链位置决定，并受各种生物的营养关系影响，故为有效的营养生物标志（TROPHICBIOMARKER）。SARGENT29指出，由于海水类PUFA在新陈代谢中存在竞争性相互作用，因此要总体考虑其自身组织中3种基本脂肪酸（EPA、DHA、AA）之间的比例。一般来说，首先，以细菌来源为主的脂肪酸其分布特征为碳数范围在C80C110饱和脂肪酸，主峰碳数为C9，在色谱图上以独立的峰群出现；其次，浮游生物和细菌有机质来源为主的脂肪酸有高含量的C120C200短链饱和脂肪酸30；另外，C220C340来自高等植物。因此
28、脂肪酸的组成可以作为很好的物源输入指示物。表3列举了主要用于食物网研究的脂肪酸标志物及脂肪酸比值。通过比对某种鱼类的脂肪酸含量组成差异，可以追踪物质在食物网中的传递路径，从而确定其摄食情况，了解其在海洋食物网中的位置。脂肪酸标志发展30年左右，其中细菌标志尤为被科学家接受31。细菌含有的脂肪酸种类比高等动、植物少得多。细菌脂肪酸的碳原子数目和高等动、植物脂肪酸的碳原子数目相似，也在1218个碳原子之间，但是细菌中绝大多数的脂肪酸为饱和脂肪酸，且部分脂肪酸还带有分支的甲基。不饱和脂肪酸只带有一个双键32。细菌标志物为奇数C的脂肪酸和脂肪酸分支33，它们是细菌细胞膜的常见脂肪酸。但是，目前存在一些
29、相悖的理论认为这些标志物对于指示细菌的存在无效，也正因为这样，我们在采用细菌的脂肪酸标志物时应该更加谨慎。比如说，HARVEY和MACKO34未发现来自细菌的脂肪酸与细菌碳数存在相关性，他们指出细菌脂肪酸只能用来作为一种量化的工具来衡量细菌所作出的贡献值。WAKEHAM35也指出海洋中的常见细菌脂肪酸与浮游生物脂肪酸成分不同，所以细菌的贡献不易察觉。基于这些争论，细菌脂肪酸只能用来衡量在一个研究中细菌脂肪酸所占的比例与其他样品的相对值。为了量化考虑，本文采用分支的脂肪酸和不分支的奇数碳脂肪酸贡献值大于15作为细菌脂肪酸存在的标志的方法10。本试验中，此类脂肪酸包括C150、12MC150、15
30、MC170、7MC171N11、C170、2HEXYLC170、10MC190、17MC190和3,7,11,15TETRAMETHYLC200。本文所研究的鱼样中（表3），半滑舌鳎、龙头鱼、黄鲫、海鳗、黑鳃梅童鱼、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼中此类标志物的含量大于15。细菌提供食物主要通过腐烂的有机物及其生物体；反之，低细菌脂肪酸含量表明鱼类偏向摄食新鲜饵料。海鳗的标志脂肪酸含量最高（表3），说明海鳗部分脂肪酸来自细菌，且具较高腐食性。唐逸民对浙江近海海鳗的食性研究指出，海鳗是一种凶猛、食量大、摄食品种广的鱼类，食性组成主要取决于海区饵料生物品种及其容易获取程度，我们可以推测海鳗可能食用一定的腐烂有机
31、物及其生物体，或可食用腐烂有机或生物体为食的生物。除此之外，黄鲫与鲻鱼的食性还需要更多的样本量来评6估脂肪酸中是否含有细菌脂肪酸，因此来判断是否具有腐食性。表3鱼样脂肪酸标志物判断TAB3ANALYSISOFFATTYACIDCOMPOSITION鱼样细菌脂肪酸判断硅藻脂肪酸判断绿藻脂肪酸判断陆生植物脂肪酸判断分支脂肪酸、C150、C170的和C161/C16016/18C18PUFA182N6、183N3的和鲈鱼1340180963203230半滑舌鳎1790080992732178龙头鱼1800531422805206带鱼1010280913755025黄鲫1990191073103229
32、海鳗4070240933482112黑鳃梅童鱼1740421133045131鲻鱼2650491413072454斑尾复鰕虎鱼2180210953242435棘头梅童鱼0830211272564137蓝细菌脂肪酸的标志物为高含量的C160和C161N7，一些C181N9、C182N6、C183N6、C183N3和长链脂肪酸。长链脂肪酸可能来自陆源性高等植物；181N9可由C180去饱和得到。通过判断其含有丰富C160和C161N7，可以确定本文所涉及到的10种鱼类脂肪酸中均含有蓝细菌脂肪酸。DALSGARRD等36认为特定的脂肪酸组成可以认为海洋生态系统中硅藻的标志物，尤其是C161N7/C1
33、60和N3/N6比值与来自硅藻的脂肪酸含量呈正相关，另外EPA含量、EPA/DHA比值，C20脂肪酸也都与其相关，而且硅藻所含的脂肪酸衍生出的脂肪酸含量与C18脂肪酸负相关。20个鱼白肌样品中均含有C205N3，但是所有鱼样中脂肪酸C161/C160都小于16（见表3），16/18小于16，鱼白肌样品EPA/DHA都小于1。C18作为鞭毛藻的脂肪酸标志物，含量直接指示鞭毛藻在其食物链中的作用。并且，鞭毛藻在食物链中越重要，DHA的含量也越高。因此，出现16/18小于16，EPA/DHA小于1的情况，我们不能排除鞭毛藻的影响。另外，高含量的C160和C161N7是蓝细菌脂肪酸的生物指示物，C16
34、0是绿藻生物指示物，所以两者的比值也受到了干扰。然而除此之外，164N1是硅藻重要的脂肪酸标志物，因为这是硅藻中常见的脂肪酸，却在其它浮游植物中很少存在。要想确定鱼样脂肪酸中是否含有硅藻脂肪酸就需要做进一步的测定，并且还需了解象山港的赤潮习见种、该季节是否为赤潮多发季节。鞭毛藻属的生物标志物包括DHA、C18（特别是C182N6）和C22PUFA，并作为C181N9的潜在来源。由于所有样品中都存在DHA、C181N9且EPA/DHA小于1，我们可以初步判断这10种鱼类的脂肪酸中有一部分来自鞭毛藻属。绿藻的脂肪酸标志物指示其含有丰富C160，高含量C16PUFA和低含量的C18PUFA。表2显示
35、，20个脂肪酸标本均含有大量C160，但是C160同时也作为蓝细菌脂肪酸的标志物，不能作为衡量的唯一标准。样本不含高含量的C16PUFA，且C18PUFA也达到13052993（表3），所以要判断其是否含有绿藻7脂肪酸还需要做进一步的同位素方法进行比较。褐藻的标志脂肪酸为C181N9，它可由C160延长形成C180去饱和后形成。本文所研究的所以样品中都含有C181N9，但是要想做进一步确定是否含有褐藻脂肪酸还需要深入实验。红藻中所含的大量EPA使其标志为205N3/204N610，本文鱼样EPA/DHA比例为020183，均不符合红藻标志的标准。我们不能否定硅藻、鞭毛藻的干扰，但从数据来看，我
36、们可以基本排除红藻脂肪酸的贡献。只有进一步的同位素实验才能确定是否含红藻脂肪酸。在研究海洋生态环境时，我们总是倾向于确定陆生植物的贡献值。长链脂肪酸通常被用来作为陆生植物的标志物37、38，但是长链脂肪酸作为标志物有局限性，因为在最大温度范围内这些脂肪酸很难从极性柱上洗脱下来。我们只能采用在大多数陆生植物中含量较高的脂肪酸182N6与183N3作为陆生的标志，并且我们规定只有标志物含量大于25时，才承认陆生植物脂肪酸的贡献10。本文10种鱼样脂肪酸样品品中黄鲫、鲻鱼和斑尾复鰕虎鱼符合标准，可初步确定陆生植物对其脂肪酸的贡献。浮游动物摄食是高营养级与低营养级之间的重要联系，脂肪酸标志物也可用来确
37、定浮游动物来源对某种鱼来说的重要性。一般来说，植食性和杂食性的浮游动物摄食大量长链并带有蜜蜡脂部分的MUFA39、40、41，所以脂肪酸201和221可以作为浮游动物脂肪酸的标志物。龙头鱼中既含201N9又含有221N9，可以确定浮游动物的贡献；带鱼、黄鲫、黑鳃梅童鱼、斑尾复鰕虎鱼含有221N9，基本上可以确定浮游动物脂肪酸的影响，但仍需进一步同位素实验排除干扰。综上所述，我们得到分析结果。可以基本上确定该种脂肪酸对鱼样的贡献的有半滑舌鳎、龙头鱼、黄鲫、海鳗、黑鳃梅童鱼、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼食用细菌；10种鱼类均食用蓝细菌、鞭毛藻属；黄鲫、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼食用陆源高等植物；龙头鱼、带鱼、黄鲫、
38、黑鳃梅童鱼食用浮游动物。通过本文分析可以基本排除鱼样中含有该种脂肪酸的有10种鱼样基本上不食用硅藻属、绿藻、褐藻；鲈鱼、半滑舌鳎、龙头鱼、带鱼、海鳗、黑鳃梅童鱼、棘头梅童鱼不食用陆源高等植物；鲈鱼、半滑舌鳎、海鳗、鲻鱼、斑尾复鰕虎鱼、棘头梅童鱼不食用浮游动物；剩余的脂肪酸分析不明确，可能存在其他脂肪酸的干扰，需要进行下一步同位素分析实验鲈鱼、棘头梅童鱼的是否食用细菌；10种鱼样是否食用红藻。43以脂肪酸标志物判断鱼类摄食食性食性的一个标志为PUFA/SFA，但是不同生物PUFA/SFA比例的受很多因素影响，如生活环境、食物来源42。有报道指出在变温动物中，随着温度下降生物体内的脂肪酸不饱和程度
39、上升43、44、45以补偿细胞膜流动性和渗透性46。另一方面，低PUFA/SFA还与高C160含量有关，说明食物中可能含有植物碎屑47。总之，PUFA/SFA比例受多种限制，其应用范围没有181N9/181N7可靠。181N9/181N7可以指示不同水生生物的肉食性行为。181N9由前体C180通过9去饱和形成；181N7由主要来自浮游植物的C161N7延长产生，所以181N7的含量越高，浮游植物或者固着植物在食物来源方面占的比重越大。48、49反之，比例增大说明动物食物来源比重来源增大，高比例表明腐食性。因此，这两个指示者就反应了生物的食性植食性、肉食性、杂食性、腐食性。另外根据鱼类摄食种类
40、的判断，我们比较了本文中鱼类的食性。由于黄鲫和海鳗体内未测得181N7，本文中我们比较了除黄鲫和海鳗之外8种鱼类的食性。181N9/181N7比例基本上随着生物摄食中植物来源比例的下降而上升（表4）。8表4鱼样食性判断TAB4181N9/181N7RATIOINMARINESPECIESDIFFERENTIATEDBYTHEIRFEEDINGMODE鱼样181N9/181N7食性鲈鱼590肉食性50半滑舌鳎195肉食性51龙头鱼520肉食性52带鱼800肉食性腐食性53黑鳃梅童鱼579肉食性54鲻鱼227杂食性斑尾复鰕虎鱼253杂食性棘头梅童鱼540肉食性545展望脂肪酸可作为营养传递的标志物
41、研究生物之间的摄食关系，因为浮游植物和浮游动物具有不同的脂肪酸组成，而且浮游动物的脂肪酸组成主要由其摄食饵料的脂肪酸特征决定。对于食性比较简单的鱼类来说，脂肪酸的指示能力较好。但是对于高营养级鱼类来说，由于饵料来源的复杂性和多样性使得脂肪酸组成判断摄食等级的能力相对较差。所以到目前为止，脂肪酸指示物的方法还无法对营养级进行定量评估。脂肪酸生物指示物工作主要还集中在讨论以下几方面首先，海洋浮游植物的脂肪酸组成差异主要来自种类差异，但是也受环境因素影响。其次，海洋动物不同发育阶段对脂肪酸需求不同，脂肪酸组成受性别和生长时期影响。最后，赤潮影响细胞的脂肪酸组成，尤其是不饱和脂肪酸55。因此，需建立赤
42、潮与脂肪酸组成变化的关系模型以便更好利用脂肪酸生物指示物研究食物来源。利用脂肪酸分析鱼类食性可有效避免繁重的鱼类胃含物分析工作，对样品数量的要求也明显降低。但是，由于脂肪酸指示物方法本身存在缺陷，我们在利用脂肪酸组成分析食物链营养级时，应结合其他数据，如胃含物分析、稳定同位素等，以便定量反映其营养等级。参考文献1唐启升海洋食物网与高营养层次营养动力学研究策略J海洋水产研究,1999,2021112高爱根,陈全震,胡锡钢,等象山港网箱养鱼区大型底栖生物生态特征J海洋学报,2005271081133蔡德龄,张淑芳,张经稳定碳、氮同位素在生态系统研究中的应用J青岛海洋大学学报,2002,322287
43、2954王娜脂肪酸等生物标志物在海洋食物网研究中的应用以长江口毗邻海域为例D华东师范大学,20085SOFIAGAMITO,PAULACHAINHO,JSELINOCOSTA,ETALMODELLINGTHEEFFECTSOFEXTREMEEVENTSONTHEDYNAMICSOFTHEAMPHIPODCOROPHIUMORIENTALEJECOLOGICALMODELLING,2010,2214954666DANIELPFAITH,SUSANAMAGALLON,ANDREWPHENDRY,ETALEVOSYSTEMSERVICEANEVOLUTIONARYPERSPECTIVEONTHELI
44、NKSBETWEENBIODIVERSITYANDHUMANWELLBEINGJCURRENTOPINIONINENVIRONMENTALSUSTAINABILITY2010,266747HENDERSONRJ,SARGENTJRLIPIDBIOSYNTHESISINRAINBOWTROUT,SALMOGAIRDNERII,FEDDIETSOFDIFFERINGLIPIDCONTENTJCOMP9BIOCHEMICALPHYSIOLOGY,1981,69C31378BLIGHEG,DYERWJARAPIDMETHODLIPIDEXTRACTIONANDPURIFICATIONJCJBIOCHE
45、MICALPHYSIOLOGY,1959,379119239徐继林,严小军,周成旭,等一种海洋席藻淡化过程中脂肪酸组成的应急变化J水生生物学报,2004,28437437910BUDGESM,PARISHCCLIPIDBIOGEOCHEMISTRYOFPLANKTON,SETTLINGMATTERANDSEDIMENTSINTRINITYBAY,NEWFOUNDLNDIIFATTYACIDSJORGANICGEOCHEMISTRY,1998291547155911AHLGRENG,GUSTAFSSONIB,BOBERGMFATTYACIDCONTENTANDCHEMICALCOMPOSITIO
46、NOFFRESHWATERMICROALGAEJPHYCOL,199228,375012SERVELMO,CLAIREC,DERRIENA,ETALFATTYACIDCOMPOSITIONOFSOMEMARINEMICROALGAEJPHYTOCHEMISTRY1994,36,69169313LVEILLJC,AMBLARDC,BOURDIERGFATTYACIDSASSPECIFICALGALMARKERSINANATURALLACUSTRIANPHYTOPLANKTONJPLANKTONRES,1997,1946949014PARRISHCC,ABRAJANOTA,BUDGESM,ETAL
47、LIPIDANDPHENOLICBIOMARKERSINMARINEECOSYSTEMSANALYSISANDAPPLICATIONSCINPWANGERSKY,EDITOR,THEHANDBOOKOFENVIRONMENTALCHEMISTRY,PARTD,MARINECHEMISTRYSPRINGER,BERLIN,HEIDELBERG,200019323315CRANWELLPA,JAWORSKIGHM,BICKLEYHMHYDROCARBONS,STEROLS,ESTERSANDFATTYACIDSINSIXFRESHWATERCHLOROPHYTESJPHYTOCHEMISTRY19
48、90,2914515116ZHUKOVANV,AIZDAICHERNAFATTYACIDCOMPOSITIONOF15SPECIESOFMARINEMICROALGAEJPHYTOCHEMISTRY,1995,3935135617JOHNSRB,NICHOLSPDANDPERRYGJFATTYACIDSCOMPOSITIONOFTENMARINEALGAEFROMAUSTRALIANWATERSJPHYTOCHEMISTRY,1979,1879980218KHOTIMCHENKOSVANDVASKOVSKYVEDISTRIBUTIONOFC20POLYENOICFATTYACIDSINREDM
49、ACROPHYTICALGAEJBOTANICAMARINA,1990,3352552819WANNIGAMAGP,VOLUMANJK,GILLANFT,ETALACOMPARISONOFLIPIDCOMPONENTSOFTHEFRESHANDDEADLEAVESANDPNUEMATOPHORESOFTHEMANGROVEAVICENIAMARINAJPHYLOCHEMISTRY,19812065966620FALKPETERSEN,DAHLTM,SCOTTCL,ETALLIPIDBIOMARKERSANDTROPHICLINKAGESBETWEENCTENOPHORESANDCOPEPODSINSVALBARDWATERSJMARINEECOLOGYPROGRESSSERIES,2002,22718719421叶新荣舟山鱼类油脂中饱和及不饱和脂肪酸组成的初步研究J海洋科学,1990,3404222李淡秋中国20种海水鱼虾脂肪酸组成的分析研究水产学报,1989,13215715923ROVENWM,RISSIGWANDTANDLERALIQUIDANDN3REQUIREMENTOFSPARUSAURATALARVAEDURINGSTARVATIONANDFEEDINGJAQUACULTURE,1989,7918519
