1、本科毕业论文系列开题报告水产养殖溶藻弧菌筛选的三疣梭子蟹早期发育阶段的溶氧需求一、选题的背景与意义动物溶氧需求大小和变化在很大的程度上反映了其代谢水平的高低及其变化规律，所以常作为衡量动物能量消耗的一个重要指标。对三疣梭子蟹不同幼体发育阶段的溶氧需求的研究可以了解梭子蟹的代谢特征、生理状况和营养状况和对外界环境条件的适应能力，从而能为亲体养殖和人工育苗时确定最佳放养密度、水质调控及环境条件，及其它的生产管理提供理论指导，还可应用在亲体、苗种及活体运输上，来提高运输过程中的存活率。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题研究的基本内容用溶氧仪测定三疣梭子蟹不同幼体发育阶段的耗氧量，用天平测得体重，从
2、而得出不同幼体阶段耗氧率的变化趋势。拟解决的主要问题通过测定梭子蟹个幼体阶段的耗氧率，从而确定梭子蟹发育阶段溶氧需求的变化趋势。三、研究的方法与技术路线（一）研究的方法1）仪器设备12000L的烧瓶3个，溶氧测定仪2）研究方法1从同一养殖池中取若干只处于相同发育阶段的梭子蟹幼体，放置于盛满水的透明的大烧瓶中，具体数量由幼体大小来确定。2用溶氧测定仪测定水体中的溶解氧，然后将溶氧仪探头取出，用塑料纸密封，同时水面上不能出现气泡。密封1H后再次测定水中溶氧，取得两组数据。3根据幼体大小选用适合孔径的筛网将幼体过滤，将过滤的水重复上述操作，作为对照组。4实验按照上述步骤重复操作3次。5将实验取得的数
3、据用生物统计方法进行分析。（二）技术路线四、研究的总体安排与进度2010年1月2月查阅资料，与指导老师讨论实验相关问题。2010年3月4月完成开题报告和一篇2000字以上的综述。2010年5月12月完成实验和数据处理。2011年1月2月翻译两篇外文参考文献。2011年3月5月完成一篇科技论文并准备毕业答辩。五、参考文献1常亚青,王子臣魁蚶耗氧率的初步研究J水产科学,1992,112162陈佳荣,臧维玲,金送笛,等水化学测试指导M北京中国农业出版社,20003陈宁生,施瑔芳草鱼、白鲢和花鲢的耗氧率J动物学报,1955,7143584陈琴,谢达祥,吕业坚合浦绒螯蟹豆蟹耗氧率与窒息点的初步测定J水产
4、科学,2002,2121517实验设计和实验准备梭子蟹和养殖水体去除梭子蟹的养殖水体测定水体中溶氧，密封测定水体中溶氧，密封密闭1H，再次测定水中溶氧密闭1H，再次测定水中溶氧按照上述步骤，重复3组实验数据汇总和处理5丁彦文,李加儿平鲷RHABDOSARGUSSARBAFORSKAL幼鱼耗氧率的初步研究J湛江海洋大学学报,2000,2038126樊甄姣,吕振明,吴常文,等温度、盐度和PH值对疣荔枝螺耗氧率的影响J河北渔业,2009,25237李加儿,刘士瑞,区又君,等浅色黄姑鱼幼鱼耗氧率、排氨率及窒息点的初步研究J海洋学报,2008,3051651708李庭古盐度对克氏原螯虾幼虾耗氧率和排氨率
5、的影响J水产科学,2009,28116987009栗志民,刘志刚,谢丽,等体重和温度对华贵栉孔扇贝CHLAMYSNOBILIS耗氧率和排氨率的影响J海洋与湖沼,2010,4119910510刘中,石俊艳河蟹幼体不同发育期耗氧率和窒息点的测定J水产科技情报,1998,252666911罗杰,刘楚吾,唐洪超,等温度对管角螺HEMIFUSUSTUBAGELIN耗氧率和排氨率的影响J广东海洋大学学报,2008,281858812彭文国,郑建民墨吉对虾幼体耗氧量的初步研究J水产科技报,1996,23416917213王春琳,吴丹华,董天野,等曼氏无针乌贼耗氧率及溶氧胁迫对其体内酶活力的影响J应用生态学报
6、,2008,19112420242714王广军,谢骏,潘德博日本鳗鲡初孵仔鱼耗氧率的初步研究J海洋水产研究,2001,221525515王俊,姜祖辉,唐启升栉孔扇贝耗氧率和排氨率的研究J应用生态学报,2002,1391157116016王艺磊,张子平,张殷鹏,等耗氧率的初步研究J集美大学学报自然科学版,2002,7319319717吴常文,朱爱意,赵向炯海水养殖杂交鲟耗氧量、耗氧率和窒息点的研究J浙江海洋学院学报,2005,14210010418闫茂仓,单乐州,邵鑫斌,等盐度和PH对鮸鱼幼鱼耗氧率和氨氮排泄率的影响J台湾海峡,2007,261859119闫茂仓,单乐州,谢起浪,等温度、盐度及体
7、重对条石鲷幼鱼耗氧率和排氨率的影响J海洋科学进展,2008,26448649620杨红生,张涛,王萍,等温度对墨西哥湾扇贝耗氧率及排泄率的影响J海洋学报,1998,204919521张媛,方建光,毛玉泽,等温度和盐度对橄榄蚶耗氧率和排氨率的影响J中国水产科学,2007,14469069422张兆琪,张美昭牙鲆鱼耗氧率、氨排泄率与体重及温度的关系J青岛海洋大学学报,1997,27448348923朱爱意,谢佳彦,陈金海温度和个体大小对单齿螺耗氧率和排氨率的影响J生态科学,2007,26323223624朱小明,李少菁,宋星宇温度对锯缘青蟹状幼体呼吸和排泄的影响J厦门大学学报,2003,42192
8、9625BUCKINGHAMMJ,FREEDDJEFFECTSOFTEMPERATUREANDPHONTHEOXYGENCONSUMPTIONINTHEPROSOBRANCHSNAILVIVIPARUSCONTECTOIDESMOLLUSCAGASTROPODAJCOMPBIOCHEMPHYSIOL,1976,53A24925226HARRISJO,MAGUIREGB,EDWARDSSJ,ETALEFFECTSOFPHONGROWTHRATE,OXYGENCONSUMPTIONRATE,ANDHISTOPATHOLOGYOFGILLANDKIDNEYTISSUEFORJUVENILEGREEN
9、LIPABALONE,HALIOTISLAEVIGATADONOVANANDBLACKLIPABALONE,HALIOTISRUBRALEACHJJTHELLFISHRES,1999,1861161927HERRMANNJP,ENMELSECEFFECTOFBODYSIZEONTHESTANDARDMETABOLISMOFHORSEMACKERELJJFISHBIOL,2000,57374676028JOHND,SAKAMOTOMT,GORDONGE,ETALPHYSIOLOGICALANDRESPIRATORYRESPONSESOFTHEMOZAMBIQUETILAPIAOREOCHROMI
10、SMOSSAMBICUSTOSALINITYACCLIMATIONJCOMPARATIVEBIOCHEMISTRYANDPHYSIOLOGYPARTAPHYSIOLOGY,1997,117339139829MACDONATDBAPHYSIOLOGICALENERGETICSOFJAPANESESCALLOPPATINOPECTENYESSOENSISLARVAEEXPBIOLECOL,1988,12015017030MORGANJ,IWAMATSALINITYEFFECTSONOXYGENCONSUMPTION,GILLNA,KATPASEANDIONREGULATIONINJUWENILEC
11、OBOSALMONJJFISHBIOL,1998,53511101119毕业论文文献综述水产养殖水产动物溶氧需求的研究进展摘要动物溶氧需求大小和变化在很大的程度上反映了其代谢水平的高低及其变化规律，所以常作为衡量动物能量消耗的一个重要指标。对动物呼吸代谢研究可以了解动物自身的代谢特征、生理状况和营养状况和对外界环境条件的适应能力。本文综合了近年来多项关于水产动物耗氧率的研究，并进行综合分析，为三疣梭子蟹不同幼体发育阶段的溶氧需求研究提出新思路。关键词水产动物；耗氧率；影响因素1引言溶氧需求主要包括耗氧量和耗氧率，耗氧量的定义是指1升水中的还原性物质在一定条件下被氧化时消耗的氧毫克数。耗氧率指动
12、物单位时间的耗氧量，可分为单位体重耗氧率和单位个体耗氧率。水生动物的耗氧率是其体内代谢的反映，而其代谢水平受多方面因素的影响（王艺磊等，2002）。了解耗氧率与各种生物及非生物因素的相互关系及变化规律可为亲体养殖和人工育苗时确定最佳放养密度、水质调控及环境条件，及其它的生产管理提供理论指导，还可应用在亲体、苗种及活体运输上，来提高运输过程中的存活率，因此耗氧率及其变化规律作为呼吸代谢研究最重要的内容，一直受到人们的重视。水产动物的耗氧率受生物因素和非生物因素影响，生物因素主要包括体重、活动和应激、生活周期等；非生物因素主要包括温度、盐度、PH等。近年来，许多学者对很多水产经济动物进行过耗氧率的
13、研究，如墨吉对虾（PENAEUSMERGUIENSIS）（彭文国等，1996）、合浦绒鳌蟹（ERIOCHEIRHEPUENSIS）（陈琴等，2002）、河蟹（ERIOCHEIRSINENSIS）（刘中等，1998）、疣荔枝螺（THAISCLAVIGERA）（樊甄姣等，2009）等。本文参考比较了近年来耗氧率研究的方法以及影响因素，并以此为三疣梭子蟹（PORTUNUSTRITUBERCULATUS）早期发育阶段的溶氧需求研究提出参考。1耗氧率研究方法11直接法墨吉对虾幼体耗氧率的研究中（彭文国等，1996），采用美国YSL58L型测氧仪测定水中的溶氧量。将对虾幼体置于呼吸室中，用测氧仪探头塞紧瓶
14、口而密封，使幼体在呼吸室中适应安定1H，然后每隔LH记录测氧仪读数。试验结束后取出幼体，计算耗氧量和耗氧率。12间接法在间接法中，目前主要有两种方法，流水密闭式和静水密闭式。流水密闭式主要以陈宁生等（1955）的方法为代表。在曼氏无针乌贼（SEPIELLAMAINDRONI）耗氧率及溶氧胁迫对其体内酶活力的影响实验中（王春琳等，2008），是采用比较流水式密封装置中对照呼吸室与实验呼吸室水中溶氧量之差这种方法来测定耗氧率。实验依陈宁生等的方法稍加改进呼吸室为的透明的玻璃瓶，外遮黑色塑料薄膜；利用水位差使海水引入呼吸室，水流大小可调节；让水样瓶装满水并溢出23倍后要立即固定并测试。水中溶氧量测定
15、，采用WINKLER碘量法测定（陈佳荣等，2000。此外，有很多的实验采用了陈宁生等的测定方法，即采用流水式的密封装置，如温度对锯缘青蟹（SCYLLASERRATA）状幼体呼吸和排泄的影响（朱小明等，2003）、浅色黄姑鱼幼鱼（NIBEACOIBO）耗氧率、排氨率及窒息点的初步研究（李加儿等，2008）等。流水密闭式的实验要求相对较高，操作起来也较为复杂，因此很多研究者在耗氧率测定时采用了静水密闭式。如在河蟹幼体不同发育期耗氧率和窒息点的测定的试验中（刘中等，1998），首先将河蟹幼体放置于密闭三角瓶，在水浴中控温。实验结束时立即用WINKLER碘量法固定水样，测其溶解氧含量。相比较流水密闭式
16、，静水密闭式的应用更为广泛，如温度对管角螺（HEMIFUSUSTUBA）耗氧率和排氨率的影响（罗杰等，2008）、栉孔扇贝（CHLAMYSFARRERI）耗氧率和排氨率的研究（王俊等，2002）、盐度对克氏原螯虾（PROCAMBARUSCLARKII）幼虾耗氧率和排氨率的影响（李庭古，2009）、盐度和PH值对鮛鱼（MIICHTHYSMIIUY）幼鱼耗氧率和氨氮排泄率的影响（闫茂仓等，2007）、温度和盐度对橄榄蚶（ESTELLARCAOLIVACEA）耗氧率和排氨率的影响（张媛等，2007）、温度、盐度及体重对条石鲷（OPLEGNATHUSFASCIATUS）幼鱼耗氧率和排氨率的影响（闫茂仓
17、等，2008）等。2影响耗氧率的因素21温度对水生生物来说，温度对其的生长发育起着至关重要的作用，不同种类生物有各自的适宜温度，在适宜范围内水温越高、生长越快，这是因为水温高时，生物体摄食活动活跃，适宜的温度可增加酶活力，加速对饵料的消化，从而促进生长；在低温下某些酶将失活，很难消化食物，因而影响生物的生长。耗氧率也会随着温度的变化产生变化，就目前的研究结果来看，国内外学者普遍认为在一定温度范围内水温高低与动物耗氧率大小成正比。这是由于水温升高，组织器官的活动性能提高，体内各种生化反应速度加快，从而使耗氧率增高的缘故，这也是变温动物的普遍特征。但耗氧率并不会一直处于升高状态，而是有一个极值，一
18、旦超过这一数值，耗氧率便会开始下降，原因是当超过其最高温度耐受范围后，会引起生物体生理功能的紊乱，耗氧率下降（杨红生等，1998）。如单齿螺的最高耐受温度为29，在29之前，耗氧率随温度升高而增加，一旦超过29，随着温度的进一步升高，耗氧率反而下降（朱爱意等，2007）。在下表（表1）中例举了几种水生生物最大耗氧率时的温度，在此温度前生物体的耗氧率随温度的升高而增加，超过此温度则呈现负增长模式。表1不同生物体最大耗氧率时温度TAB1THETEMPERATUREOFMAXIMUMOXYGENCONSUMPTIONRATEINDIFFERENTORGANISMS物种SPECIES最大耗氧率时温度T
19、HETEMPERATUREOFMAXIMUMOXYGENCONSUMPTIONRATE单齿螺MONODONTALABIO29大西洋浪蛤SPISULASOLIJISSIMA22管角螺HEMIFUSUSTUBAGELIN29华贵栉孔扇贝CHLAMYSNOBILIS33疣荔枝螺THAISCLAVIGERA32方斑东风螺BABYLONIAAREOLATA33马氏珠母贝PINCTADAMARTENSII（DUNKER）33橄榄蛏蚌SOLENAIAOLEIVORA25缢蛏SINONOVACULACONSTRICTALAMARCK20扁玉螺NEVERITADIDYMA30文蛤MERETRIXMERETRIX
20、30褐菖鲉SEBASTISCUSMARMORATUS2022盐度盐度对生物体的影响主要表现在渗透压上，一旦生物体的生存环境中渗透压的改变超出了自身调节能力，就会导致体内大量耗氧来调节渗透压的平衡。一旦生物生境中的盐度变化过大，便会导致其心脏周围腔液压力猛增，表现出心跳减慢，对外界刺激反应迟钝等现象。和温度不同，盐度对生物体的耗氧率可产生两种表现，一种是耗氧率随盐度的升高而降低，如JOHN等（1997）研究发现莫桑比克罗非鱼（MOZAMBIQUETILAPIA）耗氧率随盐度的升高而下降；丁彦文和李加儿（2002）报道了1025G平鲷（RHABDOSARGUSSARBA）的耗氧率随着海水盐度的增加
21、而降低；王广军等（2001）发现，日本鳗鲡（ANGUILLAJAPONICA）仔鱼在低盐度环境下耗氧率较高，随着盐度的升高，其耗氧率逐渐降低。另一种是耗氧率随盐度的升高而增加，但当达到某一极值后随盐度升高而降低，如闫茂仓等（2007）报道盐度为1126时，鮸鱼（MIICHTHYSMIIUY）幼鱼耗氧率逐步上升，盐度26时达到峰值后呈下降趋势；樊甄姣等（2009）发现，当盐度在15012819时，疣荔枝螺的耗氧率逐渐增大，并在盐度2819时出现峰值，然后开始下降。还有一些研究表明，盐度对耗氧率的影响还取决于生物体的生活史，MORGAN和IWAMA（1998）对不同盐度下银大马哈鱼幼鱼（ONCOR
22、HYNCHUSKISUTCHTO）代谢率的研究表明，21日龄和42日龄泳动状态下，淡水、海水（S28）和等渗水（S10）中的耗氧率差异不显著，说明幼龄鲑科鱼类对不同盐度的代谢反应还与生活史有关。23酸碱度一般来说，海水呈弱碱性，PH值为7585。但是大气中CO2的溶解，海洋生物的呼吸作用，海水中有机物含量的升高都会引起水体的PH值升高，影响水生动物的生长发育，也表现在对耗氧率的影响。水生动物在对水环境PH值均有一定的适应范围。HARRIS等（1999）研究表明，PH608672时，鲍鱼（HALIOTISRUBRA）的耗氧率明显低于PH845时的耗氧率；吴常文等（2005）在研究杂交鲟（HYBR
23、IDSTURGEON）时也发现，一定PH值的范围内杂交鲟耗氧率是随外界PH值的变化而变化的，PH值越高杂交鲟耗氧率就越大，反之耗氧率就降低。而在鮛鱼幼鱼研究中，当PH6590时，鮛鱼幼鱼的耗氧率变化并不明显，这是否说明鮛鱼幼鱼对PH值的适应性较强。BUCKINGHAM等（1976）在研究VIVIPARUSCONTECTOIDES时发现，在PH值71和89时，该种贝类的耗氧率会出现2个峰值，在这2个峰值附近，不论PH升高或降低，其耗氧率均变小。樊甄姣等发现当PH值在75时，疣荔枝螺的耗氧率最大，但PH值降到50或是升到95时，耗氧率都急剧下降。24体重体重是影响水生动物耗氧率的重要因素之一。国内
24、外许多学者对呼吸和排泄与体重的关系进行了大量研究（HERRMANN等，2000），并证实耗氧量与体重之间通常呈幂函数相关。闫茂仓等研究体重与条石鲷幼鱼耗氧率的关系时也发现，体重对条石鲷幼鱼的呼吸和排泄有显著的影响，个体较小的条石鲷幼鱼耗氧量比个体大的要低，而个体较小的条石鲷幼鱼耗氧率比个体大的要高，耗氧率与体重之间分别呈幂函数关系，这与对其它鱼类的呼吸研究得到的结果一致，如牙鲆（张兆琪等，1997）。25活动水平除了温度、盐度、酸碱度以及体重这四个因子会对生物体的耗氧率产生影响外，生物体的活动水平也会对耗氧率产生影响，其中就贝类的活动对耗氧率的影响较大。与其它动物类似，一些学者也将贝类的呼吸代
25、谢分为标准代谢亦即饥饿、相对静止状态的代谢和最大活动条件下的活动代谢以及处于前两者之间的日常代谢（MACDONATD，1988）。活动代谢由于实验室条件难以测到，故多为估测，而日常代谢则范围较大，主要取决于贝类的活动强度。栗志民等（2010）在研究华贵栉孔扇贝时也发现，华贵栉孔扇贝23下日常代谢中的平均耗氧率提高约299，这一结果支持了常亚青等（1992）和王俊等的实验结果。3展望为了提高水产动物的人工培育技术，学者们已经对多种水产动物进行了溶氧需求的研究，今后，基础呼吸研究仍是重要的研究内容之一。在有关养殖新品种、引进种及其它具有发展潜力的种类的呼吸代谢的应用研究中，溶氧需求也将是重要的课题
26、。参考文献1常亚青,王子臣魁蚶耗氧率的初步研究J水产科学,1992,112162陈佳荣,臧维玲,金送笛,等水化学测试指导M北京中国农业出版社,20003陈宁生,施瑔芳草鱼、白鲢和花鲢的耗氧率J动物学报,1955,7143584陈琴,谢达祥,吕业坚合浦绒螯蟹豆蟹耗氧率与窒息点的初步测定J水产科学,2002,21215175丁彦文,李加儿平鲷RHABDOSARGUSSARBAFORSKAL幼鱼耗氧率的初步研究J湛江海洋大学学报,2000,2038126樊甄姣,吕振明,吴常文,等温度、盐度和PH值对疣荔枝螺耗氧率的影响J河北渔业,2009,25237李加儿,刘士瑞,区又君,等浅色黄姑鱼幼鱼耗氧率、排
27、氨率及窒息点的初步研究J海洋学报,2008,3051651708李庭古盐度对克氏原螯虾幼虾耗氧率和排氨率的影响J水产科学,2009,28116987009栗志民,刘志刚,谢丽,等体重和温度对华贵栉孔扇贝耗氧率和排氨率的影响J海洋与湖沼,2010,4119910510刘中,石俊艳河蟹幼体不同发育期耗氧率和窒息点的测定J水产科技情报,1998,252666911罗杰,刘楚吾,唐洪超,等温度对管角HEMIFUSUSTUBAGELIN耗氧率和排氨率的影响J广东海洋大学学报,2008,281858812彭文国,郑建民墨吉对虾幼体耗氧量的初步研究J水产科技报,1996,23416917213王春琳,吴丹华
28、,董天野,等曼氏无针乌贼耗氧率及溶氧胁迫对其体内酶活力的影响J应用生态学报,2008,19112420242714王广军,谢骏,潘德博日本鳗鲡初孵仔鱼耗氧率的初步研究J海洋水产研究,2001,221525515王俊,姜祖辉,唐启升栉孔扇贝耗氧率和排氨率的研究J应用生态学报,2002,1391157116016王艺磊,张子平,张殷鹏,等耗氧率的初步研究J集美大学学报自然科学版,2002,7319319717吴常文,朱爱意,赵向炯海水养殖杂交鲟耗氧量、耗氧率和窒息点的研究J浙江海洋学院学报,2005,14210010418闫茂仓,单乐州,邵鑫斌,等盐度和PH对鮸鱼幼鱼耗氧率和氨氮排泄率的影响J台湾
29、海峡,2007,261859119闫茂仓,单乐州,谢起浪,等温度、盐度及体重对条石鲷幼鱼耗氧率和排氨率的影响J海洋科学进展,2008,26448649620杨红生,张涛,王萍,等温度对墨西哥湾扇贝耗氧率及排泄率的影响J海洋学报,1998,204919521张媛,方建光,毛玉泽,等温度和盐度对橄榄蚶耗氧率和排氨率的影响J中国水产科学,2007,14469069422张兆琪,张美昭牙鲆鱼耗氧率、氨排泄率与体重及温度的关系J青岛海洋大学学报,1997,27448348923朱爱意,谢佳彦,陈金海温度和个体大小对单齿螺耗氧率和排氨率的影响J生态科学,2007,26323223624朱小明,李少菁,宋星
30、宇温度对锯缘青蟹状幼体呼吸和排泄的影响J厦门大学学报,2003,421929625BUCKINGHAMMJ,FREEDDJEFFECTSOFTEMPERATUREANDPHONTHEOXYGENCONSUMPTIONINTHEPROSOBRANCHSNAILVIVIPARUSCONTECTOIDESMOLLUSCAGASTROPODAJCOMPBIOCHEMPHYSIOL,1976,53A24925226HARRISJO,MAGUIREGB,EDWARDSSJ,ETALEFFECTSOFPHONGROWTHRATE,OXYGENCONSUMPTIONRATE,ANDHISTOPATHOLOGY
31、OFGILLANDKIDNEYTISSUEFORJUVENILEGREENLIPABALONE,HALIOTISLAEVIGATADONOVANANDBLACKLIPABALONE,HALIOTISRUBRALEACHJJTHELLFISHRES,1999,1861161927HERRMANNJP,ENMELSECEFFECTOFBODYSIZEONTHESTANDARDMETABOLISMOFHORSEMACKERELJJFISHBIOL,2000,57374676028JOHND,SAKAMOTOMT,GORDONGE,ETALPHYSIOLOGICALANDRESPIRATORYRESP
32、ONSESOFTHEMOZAMBIQUETILAPIAOREOCHROMISMOSSAMBICUSTOSALINITYACCLIMATIONJCOMPARATIVEBIOCHEMISTRYANDPHYSIOLOGYPARTAPHYSIOLOGY,1997,117339139829MACDONATDBAPHYSIOLOGICALENERGETICSOFJAPANESESCALLOPPATINOPECTENYESSOENSISLARVAEEXPBIOLECOL,1988,12015017030MORGANJ,IWAMATSALINITYEFFECTSONOXYGENCONSUMPTION,GILL
33、NA,KATPASEANDIONREGULATIONINJUWENILECOBOSALMONJJFISHBIOL,1998,53511101119本科毕业设计（20_届）溶藻弧菌筛选的三疣梭子蟹早期发育阶段的溶氧需求目录1引言32材料和方法421实验材料422实验条件423实验方法424数据处理53结果531筛选蟹和普通蟹早期发育阶段体重比较532筛选蟹和普通蟹早期发育阶段耗氧量、耗氧率比较533筛选蟹和普通蟹早期发育阶段耗氧量、耗氧率与体重的关系54讨论841实验方法842筛选蟹和普通蟹的体重比较843筛选蟹和普通蟹溶氧需求的比较944筛选蟹和普通蟹耗氧量、耗氧率和体重的关系9致谢错误未定义
34、书签。参考文献11摘要溶氧需求常作为衡量动物能量消耗的一个重要指标，在很大的程度上反映了动物代谢水平的高低。本研究测定了溶藻弧菌病原筛选三疣梭子蟹（PORTUNUSTRITUBERCULATUS）和普通三疣梭子蟹从第期溞状幼体到第期稚蟹各发育阶段的耗氧量，并进行了耗氧率计算，对两种梭子蟹的耗氧情况进行了比较，并研究了体重与溶氧需求的关系。实验测得普通三疣梭子蟹的体重与耗氧率的关系为Y4006X0528，体重与耗氧量的关系为Y3978X0474，溶藻弧菌病原筛选的三疣梭子蟹的体重与耗氧率的关系为Y3701X0506，体重与耗氧量的关系为Y3650X0481，结果表明三疣梭子蟹体重与耗氧量、耗氧率
35、呈幂函数，耗氧量随体重的增加而增加，耗氧率随体重的增加而降低。在溞状幼体期到稚蟹期阶段，溶藻弧菌病原筛选的三疣梭子蟹的平均体重要小于普通梭子蟹，且溶藻弧菌病原筛选的三疣梭子蟹的耗氧量和耗氧率都明显低于普通的三疣梭子蟹（P001），表明溶藻弧菌病原筛选三疣梭子蟹的耐低氧能力高于普通三疣梭子蟹。关键词三疣梭子蟹；幼体；溶氧需求；体重ABSTRACTTHEDISSOLVEDOXYGENDEMANDINCLUDINGOXYGENCONSUMPTIONANDOXYGENCONSUMPTIONRATE,REFLECTINGTHELEVELOFMETABOLISMOFANIMALSTHEREFORE,ITI
36、SALWAYSREGARDEDASANIMPORTANTINDICATOROFMEASURINGENERGYCONSUMPTIONOFANIMALSINTHEPRESENTSTUDYTHEOXYGENCONSUMPTIONANDTHEOXYGENCONSUMPTIONRATEOFSIFTEDSWIMMINGCRABANDCOMMONSWIMMINGCRABWEREDETERMINEDTHECRABSWEREFROMZOEATOJUVENILECRABTHECOMMONCRABSRELATIONSHIPBETWEENWEIGHTANDOXYGENCONSUMPTIONRATEISY4006X05
37、28,ANDTHERELATIONSHIPBETWEENWEIGHTANDOXYGENCONSUMPTIONISY3978X0474THESIFTEDONEISY3701X0506ANDY3650X0481THERESULTSSHOWEDTHATTHEREWASAPOSITIVECORRELATIONSHIPBETWEENOXYGENCONSUMPTIONANDBODYWEIGHT,ANDANEGATIVECORRELATIONSHIPBETWEENOXYGENCONSUMPTIONRATEANDBODYWEIGHTTHESIFTEDCRABHADALOWERP001OXYGENCONSUMP
38、TION,THEOXYGENCONSUMPTIONRATEANDAVERAGEWEIGHTTHANTHATOFTHECOMMONCRABS,ITINDICATESTHESIFTEDONECANTOLERATEHYPOXIACOMPAREDWITHTHECOMMONONEKEYWORDSPORTUNUSTRITUBERCULATUSJUVENILEDISSOLVEDOXYGENDEMANDBODYWEIGHT1引言三疣梭子蟹（PORTUNUSTRITUBERCULATUS）属于节肢动物门（ARTHROPODS）、甲壳纲（CRUSTACEA）、十足目（DECAPODA）、梭子蟹科（PORTUNID
39、AE），广泛分布于我国辽东半岛、山东半岛到广东、广西的各海区以及日本、朝鲜、马来西亚群岛等海域，是一种大型海产经济蟹类。作为重要的大型经济蟹类，三疣梭子蟹肉质鲜美，营养丰富，食用价值高，不仅是我国传统的名贵海鲜，也是一种重要的出口海产品。20世纪90年代中期开始，三疣梭子蟹的大规模育苗和养殖在我国逐渐推广，现今三疣梭子蟹已是世界上养殖规模最大的海洋经济蟹类之一。虽然养殖三疣梭子蟹的开始时间较早，但在科研方面对三疣梭子蟹的研究还是侧重于人工苗种培育和人工养殖方法13，其次是对其生理过程以及行为学的研究。但随着养殖的深入会发现，在三疣梭子蟹繁育过程中往往会出现蟹苗大规模的死亡、成活率较低等问题，因
40、此有必要对其不同幼体阶段的生命活动进行研究。对水生生物来说，影响成活率的最主要因素是水体中的溶解氧，因此开展对三疣梭子蟹幼体阶段的溶氧需求是解决成活率的重要措施。溶氧需求主要包括生物的耗氧量和耗氧率，耗氧量是指1L水中的还原性物质在一定条件下被氧化时消耗的氧毫克数。耗氧率指动物单位时间的耗氧量，可分为单位体重耗氧率和单位个体耗氧率。近年来，很多学者都对水产经济类甲壳动物进行过溶氧需求的研究，如陈琴等4研究合浦绒螯蟹（ERIOCHEIRHEPUENSIS）豆蟹的耗氧率时发现，平均体重125G的豆蟹耗氧率为0128MG/GH；平均体重070G的豆蟹耗氧率为037MG/GH；刘中等5在水温212条件
41、下，测得中华绒螯蟹（ERIOCHEIRSINENSIS）溞状幼体（Z1Z5）、大眼幼体（M）及期仔蟹（P1）的耗氧量与体重呈正相关，而其耗氧率与体重呈负相关；李明云等6研究了脊尾白虾PALAEMONEXOPALAEMONCARINICAUDAHOLTHUIS的耗氧率；彭文国等7研究了墨吉对虾（PENAEUSMERGUIENSIS）幼体的耗氧量，发现墨吉对虾幼体各阶段（N1P1）耗氧量逐渐提高,且在Z2期和M2期分别出现突跃点，相应递增率也加大；刑克智等8测定了青虾（MACROBRACHIUMNIPPONENSE）幼体的耗氧率等。溶氧需求的研究，在养殖生产上是决定放养密度、水质管理等技术措施的基
42、础，蔡文琴、卢迎春、王艺磊等911都做过相关研究。国内外学者已经对很多水生生物，如太平洋牡蛎CRASSOSTREAGIGASTHUNBERG12，鲶鱼HORABAGRUSBRACHYSOMAGNTHER13，章鱼（OCTOPUSVULGARIS）14的溶氧需求的研究做过很多工作，这些实验为我们进行三疣梭子蟹亲体培育与幼体管理方面提供了重要的理论依据，但是对三疣梭子蟹不同幼体阶段溶氧需求的研究却进行得较少。耗氧率和耗氧量是水生生物生理学研究的一个重要方面，三疣梭子蟹的溶氧需求直接或间接反映了其新陈代谢规律，反映了三疣梭子蟹的生理状况，也反映了三疣梭子蟹在不同环境条件影响下的生活状况。近几年来，三
43、疣梭子蟹已经在我省多家水产苗种场育苗成功，如宁海县得水苗种场，三疣梭子蟹的养殖从亲蟹采捕到繁育已经获得了成功，其人工条件下的育苗和繁殖技术取得了突破性的进展，作为高价值的水产经济品种三疣梭子蟹的养殖前景十分可观。本研究对普通三疣梭子蟹和溶藻弧菌筛选的三疣梭子蟹两类蟹不同幼体发育阶段的溶氧需求进行初研究，旨在给三疣梭子蟹的人工繁殖、育苗育种、运输和成体养殖提供呼吸生理方面的理论依据，提高三疣梭子蟹的养殖产量，增加经济收入，稳定和发展我省三疣梭子蟹养殖事业。2材料和方法21实验材料本实验从2010年5月下旬开始至7月上旬于宁海县得水水产苗种场进行，实验所用的蟹苗有两类，一组为普通的三疣梭子蟹子代（
44、以下简称普通蟹），另一组为溶藻弧菌筛选的三疣梭子蟹子代（以下简称筛选蟹）。溶藻弧菌筛选候选群子代是东海自然海区采捕抱卵三疣梭子蟹，用浓度为112107CFUML1溶藻弧菌（VIBRIOALGINOLYTICUS）人工浸泡感染7H，正常孵化得到的。两组三疣梭子蟹放养在相同条件的育苗池内，海水盐度、水温以及水体溶解氧浓度相同。两组三疣梭子蟹的喂食时间和喂食量相同，并且保证池内的梭子蟹都能正常生长发育，从而减小因为不同环境条件而造成的误差。本实验用水为宁海县得水水产苗种场蟹苗池海水，该海水取自自然海区，经过沉淀池暗沉淀和两次砂滤池过滤。海水进入育苗池后用增氧泵进行水体增氧，保证水体的溶解氧充足。海水
45、盐度控制在2023左右，从而保证梭子蟹幼苗的正常生活。在三疣梭子蟹溞状幼体初期投喂适量湛江等边金藻（ISOCHRYSIDACEAEZHANJIANGGENSIS）、亚心形扁藻（PLATYMONASSUBCORDIFORMIS）等单细胞藻类。随着梭子蟹溞状幼体逐渐长大蜕壳变成大眼幼体后开始投喂臂尾轮虫（BRACHIONUSSP）和丰年虫（CHIROCEPHALIDAESP），并适量投喂配合饲料，其各成分的含量随着蟹蜕壳长大而逐渐增加。当大眼幼体蜕壳变成稚蟹后开始投喂冰冻的小鱼虾。22实验条件溞状幼体阶段水温控制在（2402），大眼幼体阶段控制在（2502），稚蟹阶段控制在（271）。实验期间，随
46、着三疣梭子蟹的蜕壳逐渐改变育苗池的水温，使温度保持在梭子蟹的生长适宜温度。育苗池海水为自然海区海水，盐度2023左右。水体的PH维持在825左右。育苗池覆盖黑色避光薄膜，避免阳光直射苗池。当三疣梭子蟹由大眼幼体蜕壳变成稚蟹后，在育苗池中投放一定数量的固体遮蔽物，避免梭子蟹幼蟹因争夺食物和领域而打斗造成的数量减少。育苗池中每天用增氧泵增氧以保证水体溶氧充足，不会对三疣梭子蟹发育造成影响。23实验方法三疣梭子蟹的耗氧量采用静水式密闭装置测定。装置包括一个呼吸室和塑料薄膜。呼吸室为12000ML的透明广口瓶。将若干处于同一发育阶段，同种梭子蟹蟹苗连同育苗池海水放入广口瓶中，水充满呼吸室后用塑料薄膜盖
47、住瓶口，用YSI55手提式溶解氧测定仪测定呼吸室内的溶解氧浓度，然后用塑料薄膜将瓶口密封，瓶中不能出现气泡，在避光处放置1H后再次测定水体中的溶解氧浓度。经过100目晒网过滤的海水（去除梭子蟹幼体）用作对照，测定1H内的溶氧变化，用以消除测定过程养殖海水自身的呼吸耗氧。将过滤的蟹苗略微控干水分后用EL104电子天平测得总重。实验重复上述操作3次。随后开始进行梭子蟹蟹苗的过滤和称重。实验结束后统计呼吸室中蟹苗个数，溞状幼体时期由于蟹苗个体小、数量大，求取平均数。大眼幼体和稚蟹时期为直接计数。三疣梭子蟹的耗氧量和耗氧率按下列方程式4计算耗氧量（DO1DO2）V/（TN）耗氧率（DO1DO2）V/（
48、TM）式中DO1为实验组的溶解氧含量（MGL1）；DO2为空白组溶解氧含量的平均值（MGL1）；V为呼吸室容积（L）；T为实验时间（H）；N为实验中三疣梭子蟹的个数（INDIVIDUAL）；M为实验中三疣梭子蟹的体重（G）；耗氧量的单位为MGIND1H1；耗氧率的单位为MGG1H1。24数据处理实验数据采用平均值标准差（MEANSD）表示。对相应数据进行单因素方差分析用来检验各梯度是否存在差异。3结果31筛选蟹和普通蟹早期发育阶段体重比较将筛选蟹和普通蟹不同发育阶段（Z1Y5）的平均体重制成表格（表1）。通过对两组三疣梭子蟹平均体重进行单因素方差分析，发现两组梭子蟹的平均体重异显著（P001）
49、。32筛选蟹和普通蟹早期发育阶段耗氧量、耗氧率比较将筛选蟹和普通蟹不同发育阶段（Z1Y5）的耗氧情况制成表格（表2）。通过对两组三疣梭子蟹溶氧情况进行单因素方差分析，发现两组梭子蟹的溶氧情况差异显著（P001）。33筛选蟹和普通蟹早期发育阶段耗氧量、耗氧率与体重的关系表1三疣梭子蟹早期发育阶段的平均体重（G）TAB1THEAVERAGEBODYWEIGHT（G）OFTHEPORTUNUSTRITUBERCULATUSATEARLYDEVELOPMENTALSTAGES发育阶段DEVELOPMENTALSTAGE筛选蟹SIFTEDCRAB普通蟹COMMONCRAB第期溞状幼体（Z1）000014000002000014000001第期溞状幼体（Z2）000018000009000051000002第期溞状幼体（Z3）000045000014000082000013第期溞状幼体（Z4）000081000019000079000013大眼幼体（M）000211000005000229000045第期稚蟹（C1）0014
