1、 本科毕业论文 （ 20 届） 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 所在学院 专业班级 水产养殖学 学生姓名 学号 指导教师 职称 完成日期 年 月 目录 中文摘要 . 1 英文摘要 . 2 1. 前言 . 3 2. 材料和 方法 . 4 2.1 实验用蟹的来源及养殖条件 . 4 2.2 实验饲料 . 4 2.3 分析与测定 . 5 2.4 统计分析 . 7 3. 结果 . 7 3.1 不同饲料蛋白质水平对三疣 梭子蟹生长的影响 . 7 3.2 蟹体生化组成 . 8 4. 讨论 . 9 5. 小结 . 9 6. 致谢 . 10 参 考 文 献 . 10 不同饲料蛋白质水平对三
2、疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 1 不同饲料蛋白 质 水平对三疣梭子蟹 生长和体组成影响的研究 摘要 本 实验 使用等能的实验饲料开展养殖实验，评价饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)生长及饲料转化率的影响。实验配制了五种不同蛋白质水平的饲料CP30 组 (30%)， CP35 组 (35%)， CP40 组 (40%)， CP45 组 (45%)和 CP50 组 (50%)，评价其对三疣梭子蟹特定生长率（ SGR)、增重率（ WG）、饲料转化率（ FCR）的影响。结果显示，用不同蛋白质水平的饲料喂养三疣梭子蟹得到的特定生长率（ SGR)、增重率（ W
3、G）、饲料转化率（ FCR）有显著差异 （ p 0.05），其中蛋白质水平为 45%时，其相应的实验组有最好的 特定生长率（ SGR)、增重率（ WG）、饲料转化率（ FCR）。 关键词 三疣梭子蟹 生长 饲料转化率 蛋白质水平 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 2 The effect of dietary protein on Portunus trituberculatus growth and body composition Abstract A feeding trial was conducted using isoenergetic practical di
4、ets to evaluate the effects of the dietary protein level on growth performance,feed utilization of the Portunus trituberculatus.Experiment designed five different protein levels diet CP30 (30%),CP35(35%),CP40(40%),CP45(45),CP50(50%).Evaluated their growth gain (WG),specific growth rate(SGR) and feed
5、 conversion rate(FCR) of Portunus trituberculatus.The results showed that Portunus trituberculatus fed with different protein levels had the significantly differences of the weight gain(WG),specific growth rate(SGR) and feed conversion rate(FCR) (p 0.05),and the dietary protein level 45% had the bes
6、t growth gain(WG),specific growth rate(SGR) and feed conversion rate(FCR). Key words Portunus trituberculatus Growth Feed conversion rate Protein level 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 3 1. 前言 三疣梭子蟹 (Portunus trituberculatus)俗称梭子蟹，又称呛蟹、海螃蟹、海蟹、门蟹等，隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、梭子蟹科。身体分为头胸部和腹部，头胸部由头部与胸部愈合而成，头胸甲呈梭形，中央凸起，
7、周边凹下，头胸甲表面布满颗粒，以胃区和心区的颗粒为大，此外在心区还有三颗疣状突起。鳌足较为发达，第四对步足为浆状，腕节宽而且扁平，有助于游泳。蟹体前后短 ,两侧宽 ,沙质海底的蟹体，多为浅灰绿色，岩礁或海藻间的蟹体，颜色多为深茶绿色。蟹的食性为杂食性，但以动物性为主，如鱼、虾等，有时也以海藻为食。三疣梭子蟹味道鲜美， 实用价值高，市场价格高，是人们喜爱的海鲜，是我国沿海地区出口国外的一种重要海鲜产品。三疣梭子蟹 主要分布于我国沿海 ,以及东亚和菲律宾等海域 1 2。近年来梭子蟹人工养殖在浙江、江苏等沿海地区发展迅速 ， 对梭子蟹的研究目前多集中于育苗、养殖、病害防治等方面 ， 对其营养需求、配
8、合饲料等方面的研究报道比较少 3 4 5。 蛋白质在生物的生命活动中有极其重要的作用，它是生命的物质基础，也是一切生物体的重要组成成分。蛋白质由氨基酸构成，经元素分析，大多数蛋白质的组成基本相似，主要含氮、碳、氢、氧及少量的硫元素 。虾蟹类的生长主要是依靠蛋白质在体内构成组织和器官。虾蟹类和其他动物一样从外界饲料中摄取蛋白质，蛋白质在消化道中经消化分解成氨基酸后被吸收利用后，供体组织蛋白质的更新、修复以及维持体蛋白质现状，也是部分能量的来源，并且组成机体各种激素和酶类等具有特殊生物学功能的物质。中华绒螯蟹在其不同的生长时期，最适蛋白质需要量不同。虾蟹对蛋白质的需求，实质上是对氨基酸的需求，即对
9、必需氨基酸（ EAA）和非必需氨基酸 (NEAA)的需求。虾蟹是通过摄取食物而获取蛋白质。当食入的蛋白质在虾蟹体内被分解成氨基酸后，即可用于合成自身 所需要的蛋白质。中华绒螯蟹对必需氨基酸需要的种类，目前认为与对虾相似，即苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸和精氨酸 10 种 6。对于中华绒螯蟹蚤状幼体期对蛋白质最适需求量的研究，即溞状幼体，溞状幼体到大眼幼体，大眼幼体到期幼体，徐新章 7（ 1991），韩小莲 8等（ 1991），张家国 9（ 2001）实验得出的结论分别为 45%， 55%， 45%。徐新章 10(1992)用 0.618 法优选出饲料
10、蛋白质水平值，以成活率为指标进行试验，研究表明，个体重量在 9 10g 之间 的中华绒螯蟹的最适蛋白质水平为 41.7%。陈立侨 11（ 1993）在对中华绒螯蟹蟹种研究最适蛋白质的适宜水平时，得出最适蛋白质水平为是 35% 40%，并指出配合饲料蛋白质含量在 34%以下时，中华绒螯蟹的生长速度减慢。樊发聪 12（ 1991）根据中华绒螯蟹的食性，设计了 6 个饲料配方进行实验，得出最适蛋白质水平为 46%。中科院植物所 13（ 1988）经过两年生产实验表明，用蛋白质含量 39.78%的饲料喂养中华绒螯蟹时，蟹的生长发育最好。刘学军等 14（ 1990）研究得出的结论为，中华绒螯蟹饲养前期的
11、饲料最适蛋白 质水平为 41%，饲养中后期为 36%。徐新章等 15在对体质量 3g 的中华绒螯蟹幼蟹进行研究中 ,以增长率为指标 ,饲料中最佳能蛋比为 8.51kCal/kg；以成活率为指标，饲料中的最佳能蛋比为 11.98kCal/kg。林仕梅等 16研究得出，体质量为 8 10.5g 的中华绒螯蟹的总氮(TN)、氨态氮 (NH3-N)排泄率随饲料中蛋白能量比 (P/E)的增加而升高。 Chen et al(1994)17报道，对于 6 10g 的中华绒螯蟹幼蟹，以酪蛋白为主要蛋白源，总能为 12.96 13.38kJ/g干物质的饲料，饲料蛋白水 平为 46.5%和 53.6%时，获得了最
12、好的生长。 Mu 等人（ 1998 年 )不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 4 发现，对于 1.06 1.50 克的中华绒螯蟹幼蟹，以虾粉为主要蛋白源，其中含有可消化能为14.50 14.84kJ/g 干物质的饲料，其最佳蛋白质水平为 39% 42.5%。 本实验设计了五个不同蛋白质水平的实验组，分别为 CP30 组 (30%)、 CP35 组 (35%)、CP40 组 (40%)、 CP45 组 (45%)、 CP50 组 (50%)，从梭子蟹的增重率（ WG）、特定生长率（ SGR）、饲料转化率（ FCR）等不同指标观察不同蛋白质水平对三疣梭子蟹的影响。 2. 材料和方
13、法 2.1 实验用蟹的来源及养殖条件 实验用的三疣梭子蟹来自西轩岛的池塘里， 2010 年 7 月运至养殖池。为适应实验条件和饲料，暂养实验蟹一周。实验在两个海水养殖池中进行。每个池包括两排充气装置，总共90 个塑料篓。用沙滤池过滤后的海水加入到养殖池中。每个塑料篓都用塑料网覆盖，提供缓慢的充气，养殖池的水体每天换 1 次。在实验开始前，螃蟹禁食 24 小时。用游标卡尺测壳宽和壳长，用电子称（ 0.01 克误差）测体重。蟹（幼蟹初始平均体重在 20.00 1.07 和24.71 2.06 克之间，初始平均壳宽 在 6.85 0.12 和 7.47 0.22 毫米之间，初始平均壳长为 3.45
14、0.14 和 3.74 0.19 毫米之间）。随机分布在 90 个塑料桶中用于养殖实验。人工投喂实验饲料到塑料篓里，每天喂相当于体重 6 8%的饲料， 并且每蜕壳一次饲料量加倍并做记录。 每天投喂两次，分别在 07:00 和 18:00，每周投喂 7 天。在 自然光照下进行养殖两个月 。每天确定死亡的情况，并记录。 2.2 实验饲料 分别配制了含有 30、 35、 40、 45和 50蛋白水平的五种等能饲料（见表 1）。使用的主要饲料蛋白质源是酪蛋白、鱼粉。 玉米淀粉被用来作为糖源。鱼油和豆油混合物（ 2：1）作为脂肪的来源。当饲料蛋白水平降低时，玉米淀粉被添加到饲料中以维持饲料组间的总能相等
15、，并被作为填充物所需。 实验饲料以下述方法配制：所有干物质原料先在一个混合机中混合，然后添加油和水混合产生一个稠密的面团，之后通过一个实验饲料机制作为 3.0 毫米的颗粒饲料，在 100烘箱中干燥至水分含量减少到约 100g/kg。干燥后的饲料颗粒被放置在封口的塑料袋中，储存在 -20的冰箱中。 表 1 实验饲料配方和组成分析（ %干重 ) Table.1 Experimental diet composition of different protein levels 原料名称 CP30 CP35 CP40 CP45 CP50 鱼粉 40.00 40.00 40.00 40.00 40.00
16、 酪蛋白 1.60 6.60 11.60 16.60 21.60 鱼油 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 5 豆油 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 玉米淀粉 25.00 20.00 15.00 10.00 5.00 大豆卵磷脂 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 牛磺酸 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 胆固醇 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 氯化胆碱 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 褐藻酸钠 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00
17、 矿物盐 b 3.00 3.00 3.00 3.00 3.00 维生素 a 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 磷酸二氢钙 2.00 2.00 2.00 2.00 2.00 微晶纤维素 13.40 13.40 13.40 13.40 13.40 合计 100 100 100 100 100 蛋白质 30.0 35.0 40.0 45.0 50.0 脂肪 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0 碳水化合物 20.0 16.0 11.2 6.5 1.5 能量 301.0 301.0 301.0 301.0 301.0 a 复合维生素，（）：硫胺素 B1， 0.50；核黄素， 0.80
18、；烟酰胺， 2.60；维生素H，生物素， 0.10；泛酸钙， 1.50；维生素 B6， 0.30；叶酸，维生素 B， 0.50；肌醇， 18.10； 维生素 C， 12.10；维生素 K， 0.20；对氨基苯甲酸， 3.00；氰钴维生素，维生素 B12， 0.10；纤维素， 50.40；维生素 A， 2.50；维生素 D3， 2.50；维生素 E， 5.00； b 复合矿物盐， g/kg mixture：磷酸二氢钙， 122.87；乳酸钙， 474.22；磷酸二氢钠， 42.03；硫酸钾， 163.83；硫酸亚铁， 10.78；柠檬酸铁， 38.26；硫酸镁，44.19；硫酸锌， 4.74；硫
19、酸锰， 0.33；硫酸铜， 0.22；氯化钴， 0.43；碘酸钾，0.02；氯化钠， 32.33；氯化钾， 65.75。 2.3 分析与测定 喂养结束后将存活的梭子蟹取回称重，在 -70条件下储存备用。按组计算增重率（ WG）、特定生长率（ SGR）及饲料转化率（ FCR），采用冷冻干燥法，凯氏定氮法，索氏抽提法和 550灼烧法分别测定全鱼及饲料的水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分。 2.3.1 水分的测定 使用冷冻干燥机将螃蟹脱水，称量干燥前后的重量并记录。 计算公式： 水分（ %） = 100W1 0W1W W0：冷冻干燥后的重量（ g） W1: 冷冻干燥前 的重量（ g） *水分测定完成后将螃蟹
20、用粉碎机粉碎至粉状，放置 -70条件下保存备用。 2.3.2 粗蛋白测定 依照 Micro Kjeldahl（ AOAC）方法进行，称取螃蟹样品约 0.2g，然后加入 3g 硫酸钾、0.5g 硫酸铜及 10ml 的浓硫酸于消化管中，将消化管置于已经预热的消化仪器（ BUCHI Distillation Unit K 355）中，盖上抽气头，打开水流并加热（约 420）消化液至澄清不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 6 碧绿后，停止加热并取出消化管冷却至室温，然后将每支试管依次装入蒸馏仪器（ Digest Automat K 438）中，按照预先设定好的程序先加入适量蒸馏水进行
21、稀释，然后加入适量40%NaOH，最后以含有溴甲酚绿和甲基红指示剂的 4%硼酸 50ml 收集 5min，用标定过的 Hcl滴定至溶液呈微红时达滴定终点。 计算公式： 蛋白质含量（ %） = 10S N25.6007.14a-b ）（ a：空白组的滴定毫升数 b：样品的滴定毫升数 S：样品的重量（ g） N： Hcl的摩尔浓度 2.3.3 粗脂肪测定 称取 0.5g左右的螃蟹样品，放入滤纸筒，然后将滤纸筒放到干燥的浸提管内，浸提管置于抽提瓶中 ，加入约瓶体 1/2的石油醚，并置于已预热的 BUCHI脂肪测定仪中。打开冷凝水，按照预选设定的程序开始加热抽提， 60分钟后抽提完毕，回收石油醚。取下
22、抽提瓶，移去浸提管；将抽提瓶放在通风厨中，使抽提瓶中的石油醚完全挥发，再将抽提瓶置于 DGG 9123A型恒温鼓风干燥箱中 105烘干 2h后，取出放进干燥器中冷却。等冷却至室温后准确称重。抽提瓶前后的重量差即为样品中的粗脂肪重量。 计算公式： 脂肪含量（ %） = 100S 0W1W W0：抽滤前抽提瓶重量（ g） W1：抽滤后抽提瓶重量（ g） S：样品重量（ g） 2.3.4 灰分的测定 依照 AOAC（ 1984）分析方法，称取饲料或样品，置于已达恒重且已称重的坩埚中，置于550的马福炉中，灰化 12h，取出放入干燥皿中冷却至室温，称重并记录。 计算公式： 灰分（ %） = 100S
23、0W1W W0：坩埚的恒重量（ g） W1：坩埚重 +灰化后的样品重量 （ g） S：灰化前样品重量（ g） 2.3.5 结果计算 实验蟹的增重率 (WG)、特定生长率（ SGR）、饲料转化率（ FCR）等的计算公式如下： 增重率 (WG)=）实验开始时的蟹重（ ）实验开始的蟹重（）实验结束时的蟹重（ g g-g 100 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的研究 7 特定生长率（ SGR） = 1 0 0glngln 投喂天数 ）（实验开始时鱼重（）（实验结束时鱼重（饲料转化率（ FCR） =）实验开始时蟹重（）实验结束时蟹重（ ）摄食量（ gg g2.4 统计分析 所有数据均采用
24、平均数 标准误差表示，经单因子方差分析（ ANOVA） 之后采用 Duncans（ 1955）多重比较检验均值的差异显著性，显著水平为 0.05。所有统计分析采用 SPSS10.0在 windows 条件下进行。 3. 结果 3.1 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长的影响 表 2 是饲料中不同蛋白水平对幼蟹的生长影响的结果。由表可知， CP45 组的增重率最大，其值为 264.56 115.76%，与 CP30 组、 CP40 组均有显著差异（ p 0.5），与 CP35 组、CP50 组没有显著差异， CP30 组、 CP35 组、 CP40 组、 CP50 组各组间没有显著差异。其特定生
25、长率与 增重率有相似的结论， CP45 组的特定生长率最大，其值为 2.76 0.82%。 CP45 组的饲料转化率最小，其值为 1.01 0.32，与 CP30 组有显著差异（ p 0.5），与 CP35 组、CP40 组、 CP50 组各组均没有显著差异， CP35 组、 CP40 组、 CP45 组、 CP50 组各组间没有显著差异。 从 表格中数据结果可以看出，不同蛋白质水平对三疣梭子蟹的增重率（ WG）、特定生长率（ SGR）及饲料转化率（ FCR）有显著影响（ p 0.05），其中蛋白质水平为 45%时的实验组有最好的增重率（ WG）、特定生长率（ SGR）和饲料 转化率（ FCR
26、），当饲料蛋白质水平为40%时，这三个指标都要比蛋白质含量为 45%时低。当饲料蛋白质含量为 50%时，这三个指标与蛋白质含量为 45%时差异不显著，但都有下降趋势。 表 .2 不同蛋白质水平三疣梭子蟹的增重率，特定生长率，饲料转化率 Table.2 Weight gain, specific growth rate, feed conversion rate of Portunus trituberculatus fed in different protein levels diet 饲料号 CP30 CP35 CP40 CP45 CP50 不同饲料蛋白质水平对三疣梭子蟹生长和体组成影响的
27、研究 8 初始体重 20.001.07a 21.913.62ab 23.784.15ab 23.174.96ab 24.71 2.06b 初始壳宽 6.85 0.12a 7.09 0.42ab 7.36 0.54b 7.35 0.46b 7.47 0.22b 初始壳长 3.45 0.14a 3.430.17a 3.620.26ab 3.69 0.28b 3.74 0.19b 最终体重 49.637.87a 61.5420.11ab 53.9010.88a 81.0422.25b 70.8831.27ab 最终壳宽 9.55 0.73a 10.261.24ab 9.82 0.79a 11.321
28、.24b 10.71 1.53ab 最终壳长 4.80 0.35a 5.250.67ab 4.82 0.37a 5.69 0.59b 5.35 0.86ab 增重率 148.7541.94a 183.4593.08ab 125.8512.10a 264.56115.76b 180.64100.10ab 特定 生长率 2.00 0.36a 2.210.73ab 1.81 0.12a 2.76 0.82b 2.19 0.69ab 壳宽增加率 39.5810.85ab 45.2519.41ab 33.251.82a 54.5018.30b 43.1017.42ab 壳长增加率 39.4413.26a
29、b 53.2018.60b 33.392.70a 54.9919.57b 42.9518.01ab 饲料转化率 1.76 0.68b 1.410.79ab 1.610.51ab 1.01 0.32a 1.43 0.63ab 表中同一行内，数据后不同的字母表示具有显著性差异 (p 0.05)。 Table in the same row, data with different letters significantly different(p0.05). 3.2 蟹体生化组成 由表 3 可知， CP30 组、 CP35 组、 CP40 组、 CP45 组、 CP50 组 各组间的水分含量无差异
30、。CP35 组的蛋白质含量最高，其值为 39.42 6.51， CP35 组与 CP45 组无差异， CP30 组、 CP40组、 CP50 组各组 间无差异。 CP40 组的脂肪含量最高， CP30 组、 CP35 组、 CP45 组、 CP50组各组间无显著差异，其中， CP45 组的脂肪含量最低，其值为 6.47 0.73。 CP35 组的灰分含量最高，其值为 36.09 6.42， CP30 组、 CP40 组、 CP45 组、 CP50 组各组间没有显著差异，其中 CP50 组的灰分含量最低，其值为 32.20 2.46。 表 3 不同蛋白质水平对三疣梭子蟹蟹体组成的影响 （ %） Table. 3 Portunus trituberculatus body composition of different protein levels diet 饲料号 CP30 CP35 CP40 CP45 CP50 水分 7.64 1.85 4.97 1.21 9.05 2.16 8.35 1.78 9.37 2.30
